论文部分内容阅读
【背景】“Correa级联”模型指出肠型胃癌的发展遵循从正常胃上皮细胞发展为慢性胃炎、肠化生、异型增生、胃癌的过程。关键基因的改变可能是介导这一过程的重要事件,因此在癌前病变进展为胃癌过程中寻找关键分子去预警胃癌发生风险显得十分重要。目前对于处于癌前病变阶段的胃癌高危人群患者缺乏有效的癌变预警标志物,胃蛋白酶原（pepsinogen,PG）中PG I与PG II的比值、幽门螺杆菌（helicobacter pylori,HP）抗体、胃泌素17（Gastrin-17）常应用于临床,但预警效能低,因此需要合适的标志物去筛选真正癌变高风险人群。同样对于具备手术机会的胃癌患者,其长短期生存也存在明显差异,预后判断多是依据患者术后病理TNM分期,寻找标志物去预测胃癌术后生存,进行分层管理,是目前亟需解决的临床难题。MG7和MG5是课题组所在单位制备的胃癌单克隆抗体,1A6/DRIM是经北京大学肿瘤医院潘凯枫教授团队筛选验证的原癌基因。研究发现,三个标志物在胃癌高危人群阶段部分患者已有表达,但是表达差异能否预警病变进展以及辅助胃癌患者预后判断,尚不明确。因此本课题拟通过多中心大样本前瞻性人群数据分析上述三个标志物表达特征,然后结合胃癌高危人群队列及胃癌队列,验证其分子预警价值及预后判断。【目的】1.基于多中心胃癌高危人群组织样本,检测MG7-Ag、MG5-Ag、1A6/DRIM在胃癌高危人群组织样本中表达,提高对胃癌高危人群的识别能力。2.基于胃癌高危人群队列,验证MG7-Ag、MG5-Ag以及1A6/DRIM在同一体系中预警胃癌高危人群癌变风险的价值。3.基于前瞻性胃癌队列,检测胃癌组织中MG7-Ag、MG5-Ag的表达,预测胃癌患者术后生存。【方法】基于消化系疾病国家临床医学中心8家成员单位经内镜下活检病理证实的胃癌高危人群患者942例;经过5年以上系统随访的2013年1月-2017年1月的西京医院胃癌高危人群队列2292例;2011年1月-2014年12月西京医院胃癌术后队列187例。依据严格的纳入与排除标准,筛选符合入组的胃癌高危人群及胃癌术后患者。对胃癌高危人群活检蜡块、高危人群队列初次内镜下活检蜡块、胃癌术后癌组织蜡块,进行连续病理切片,采用免疫组织化学染色观察高危人群中MG7-Ag、MG5-Ag、1A6/DRIM在胃黏膜恶性进展过程中表达动态;依据高危人群队列随访结局,观察MG7-Ag、MG5-Ag、1A6/DRIM在初次内镜下活检组织中的表达,开展巢式病例对照研究,验证标志物预警价值;检测胃癌术后队列中胃癌组织蜡块MG7-Ag、MG5-Ag的表达,对胃癌患者进行预后生存判断。统计分析方法:组间差异分析使用卡方检验或Fisher精确概率,Kaplan-Meier方法绘制术后胃癌患者生存曲线,组间生存差异使用Log-rank检验分析,单因素、多因素Cox回归模型分析确立病变进展以及预后独立影响因素,P＜0.05被认为是具有统计学差异。【结果】1.（1）胃黏膜上皮在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃肠上皮化生、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、胃黏膜内癌恶性进展过程中,MG7-Ag阳性率分别是0%、4.0%、5.7%、40.8%、59.5%、75.0%;MG5-Ag阳性率分别是10.5%、24.0%、25.6%、47.9%、59.0%、84.6%;1A6/DRIM的阳性率是0%、11.1%、15.0%、30.8%、55.3%、75.0%均呈逐渐升高趋势（趋势P＜0.05）,提示可能具有预警价值;（2）MG7-Ag在癌变病变中着色模式的随着癌前病变进展由肠上皮化生的腺体腔缘着色逐渐变化为上皮内瘤变及胃癌细胞的胞浆着色;（3）MG7-Ag、MG5-Ag联合在胃黏膜恶性进展过程中,阳性表达率呈逐渐升高趋势（趋势P＜0.05）,可增加癌前病变的识别率。2.（1）MG7-Ag、MG5-Ag阳性表达与胃癌高危人群进展成癌相关,随访进展成癌组阳性率明显高于未进展组（P＜0.001）;（2）单因素分析显示BMI≥24、饮酒史、MG7-Ag阳性、MG5-Ag阳性以及1A6/DRIM阳性表达与高危人群进展为胃癌相关（均P＜0.05）,多因素Cox回归分析显示,MG7-Ag、MG5-Ag阳性表达是阴性病人进展为癌风险的4.20倍（HR=4.20,95%CI=1.71-10.34,P=0.003）和3.88倍（HR=3.88,95%CI=2.80-44.01,P=0.001）,MG7-Ag、MG5-Ag阳性表达是胃癌高危人群进展为癌的独立危险因素,1A6/DRIM不具有独立预警价值（HR=0.81,95%CI=0.25-2.90,P=0.858）。3.（1）MG7-Ag在I、II、III期胃癌中阳性率逐渐升高,MG7-Ag阳性表达与相对较晚的病理分期显著相关（P=0.017）;（2）随着MG7-Ag、MG5-Ag阳性表达强度的增高,胃癌病人预后明显不良,MG7-Ag 3+及MG5-Ag 3+表达生存期显著缩短（P＜0.05）;（3）单因素分析显示肿瘤体积＞5cm、低分化、p T分期晚、p N分期晚、血清CEA＞5.0μg/L、肿瘤组织MG7-Ag高表达以及MG5-Ag高表达是胃癌患者预后不良的危险因素（P＜0.05）,多因素Cox回归分析将MG5-Ag 2+以上表达（HR=1.44,95%CI=1.15-2.16,P=0.043）作为胃癌患者术后死亡的独立危险因素。【结论】1.MG7-Ag、MG5-Ag和1A6/DRIM在胃黏膜上皮病变进展中表达逐渐增强,其中MG7-Ag在细胞胞浆着色提示胃黏膜病变常处于上皮内瘤变及更高阶段。2.MG7-Ag、MG5-Ag阳性表达的患者进展胃癌的风险显著升高,模型将MG7-Ag与MG5-Ag阳性表达与胃黏膜高危人群进展胃癌独立相关,MG7、MG5可作为胃癌高危人群预警工具,1A6/DRIM不具备独立预警胃黏膜高危人群进展的价值。3.MG7-Ag与MG5-Ag强阳性表达的患者生存期明显缩短,MG5-Ag 2+以上表达是胃癌术后预后不良的独立危险因素,可用于指导胃癌术后临床治疗决策。