狂犬病是一种急性、致死性神经系统疾病,其病原是狂犬病病毒（RABV）,大部分陆生哺乳动物均能感染。感染后一旦出现临床症状,死亡率达100%,是大多数发展中国家和地区的重大公共卫生问题。据世界卫生组织（WHO）估计,全世界每年有约6万人死于狂犬病。RABV编码五个结构蛋白,其中G蛋白是决定毒力和诱导机体产生中和抗体的唯一蛋白,因此,开展G蛋白表达的研究可为构建高效、安全的疫苗奠定基础。本研究用连接子（Linker）将狂犬病病毒街毒GD-SH-01的G蛋白胞外区和小鼠IgG2a Fc片段（CH2、CH3、Hinge）连接,构建重组IgG分子SHG-Fc/wt。以基因克隆的方法扩增狂犬病病毒GD-SH-01 G蛋白胞外区（SHG）作为对照。在野生体SHG-Fc/wt的基础上,将IgG2a Fc片段第310位和第435位组氨酸突变成丙氨酸,让其丧失与FcRn结合的能力,作为突变对照。将三个片段分别与与表达载体pFastBac Dual连接,构建重组表达质粒。再将重组质粒转化至DH10Bac大肠杆菌中获得重组穿梭载体Bacmid,转染Sf9细胞获得重组杆状病毒。病毒扩增至第三代（P3）,以MOI=1接种细胞,获得三个重组蛋白。经SDS-PAGE、LC-MS/MS液相二级质谱蛋白分析,表明目的蛋白的氨基酸序列和大小与理论氨基酸序列相符合。Western-blot结果显示,三个重组蛋白均能在小鼠IgG-Fc多克隆抗体、狂犬病阳性血清、小鼠His-tag单克隆抗体孵育后产生特异性条带;间接免疫荧光试验结果显示在小鼠IgG-Fc抗体和His-tag抗体孵育后,均能看到荧光斑点;间接ELISA试验结果表明,用狂犬病免疫球蛋白以及肌注免疫后的小鼠血清作为抗体,三个重组蛋白均能产生反应。因此,由上述实验表明,表达的三个重组蛋白均有反应原性。综上所述,本研究成功将狂犬病病毒G蛋白与小鼠IgG2a Fc片段在杆状病毒表达系统中进行融合表达,并且成功纯化出蛋白,通过实验验证表达的重组蛋白均有免疫原性。本实验将对下一步粘膜免疫模拟FcRn介导IgG转运的胞转通道研究打下基础,为狂犬病口服疫苗的研究和制备提供一种新的思路。