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目的:开发新的高分子微球材料,用作蛋白分离纯化的层析固定相。方法:以壳聚糖（CTS）为原料,分别与氯乙酸和环氧丙基三甲基氯化铵（GTA）反应,制备N,O-羧甲基壳聚糖（CM-CTS）和氯化三甲基壳聚糖季铵盐（HACC）,然后通过乳化-戊二醛交联得到CM-CTS和HACC微球,优化了反应条件并对合成的微球性能做了表征。主要研究内容及结论如下:1以CM-CTS为原料悬浮交联合成CM-CTS微球,阐述了各种不同的交联条件对微球形态和性能的影响,主要从形态方面确立了最佳反应体系:2 gCM-CTS,50 mL H2O,50 mL石蜡（含2.5%Span80）,10 mL戊二醛。我们以BSA和Cyto-C作为研究对象,考察了CM-CTS微球吸附蛋白的性能。测定的蛋白最大吸附量为69.10 mg╱g。此外为了验证微球吸附蛋白是否可逆,我们还做了微球脱吸附蛋白的测定。此外,加入CaCO3和PEG并未达到良好的致孔效果。2我们利用CTS直接合成CM-CTS,试图通过测定产物羧甲基取代度（DS）来确定羧甲基化合成的反应条件。在这过程中研究了在CM-CTS合成过程中反应温度、反应时间、氯乙酸用量、NaOH用量、碱化温度、等因素对反应产物DS的影响,并确定了最佳反应条件。研究表明,氯乙酸、碱以及原料的用量是影响DS大小的重要因素。反应最佳条件为:3 g CTS,20 g NaOH,200 mL异丙醇,在55℃下碱化12 h,4 g氯乙酸,25 mL异丙醇,在60℃下反应5 h,此时,DS最高为0.7295。3上面我们通过测定DS来确定反应条件并不是很准确,接下来我们采用两步反应合成CM-CTS微球,用微球的蛋白的吸附性能确定CM-CTS合成条件。第一步是CTS合成CM-CTS,第二步是CM-CTS交联成CM-CTS微球,我们以BSA作为研究对象,考察CM-CTS微球吸附蛋白的性能。实验结果证明最佳合成CM-CTS的条件是:2g CTS,25 mL 50%NaOH溶液,碱化12 h,5 g氯乙酸,25mL异丙醇,反应5 h,碱化温度和反应温度均为60℃,产物微球最大BSA吸附量为47.03 mg╱g,仍没有达到理想的蛋白吸附效果。4由于羧甲基化产物的多样性及存在的副反应,使反应很难得到我们预想的结果,所以我们接下来改变策略,在CTS上加活性基团-季铵基,然后交联得到HACC微球,进行BSA吸附的测定和红外光谱的表征。确立了最佳反应条件为5 gCTS,100 mL溶剂（异丙醇:水=9:1）,20 g GTA,反应时间8 h。交联时,加入5 mL戊二醛。其中,微球最大BSA吸附量达到132.2 mg╱g。此外还做了HACC微球BSA等温吸附曲线和HACC及HACC微球的红外表征。