羊肉作为人们餐桌上常见的肉类之一,深受消费者青睐。近年来,羊肉消费水平稳步提升,肉羊养殖规模也在不断扩大。然而,华东地区集约化及异地育肥的养殖模式,为各类病原的传播提供了有利条件。以致病性大肠杆菌为代表的细菌性病原流行广泛、危害巨大。动物源致病性大肠杆菌中的产志贺毒素大肠杆菌（STEC）和肠道外致病性大肠杆菌（Ex PEC）是两类重要的人兽共患病原菌,具有重要的公共卫生意义。已有多项研究表明STEC及Ex PEC可通过食物链传播人类,对公共卫生安全造成了巨大的威胁。然而相较于禽源及猪源大肠杆菌的研究,针对羊源大肠杆菌的研究较少,多数只针对腹泻病例中大肠杆菌的鉴定,且对于食源性大肠杆菌,通常关注O157:H7等STEC,对于Ex PEC的研究,则屈指可数。此外,大肠杆菌血清型众多,不同地区流行的优势血清型有差异。因此,为明确华东地区肉羊养殖及屠宰加工环节致病性大肠杆菌的流行特点,本研究基于实验室前期调查,建立了检测O8、O9、O89优势血清型大肠杆菌的三重PCR检测方法,用于在临床及食品检测中方便快捷地对该三种血清型进行鉴别。本研究采集了华东地区部分省份肉羊养殖场发生腹泻及呼吸道疾病的样品以及屠宰场肉品、环境样品,进行大肠杆菌的分离鉴定,并对分离菌株的血清型、系统进化分群、毒力基因及耐药性进行检测分析,进而通过小鼠感染模型对部分代表菌株,尤其是STEC及Ex PEC的致病性进行了检测分析。本研究得出以下研究结果:（1）通过引物设计与条件优化成功建立了具有良好重复性、特异性、敏感性的检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的三重PCR方法,利用该三重PCR方法,对来自不同养殖场及屠宰场分离的217株大肠杆菌进行了血清型鉴定,共检测到O8血清型大肠杆菌32株（14.75%）、O9血清型大肠杆菌22株（10.14%）和O89血清型大肠杆菌16株（7.37%）。证明该方法能够用于临床样品及食品源大肠杆菌血清型的鉴定。（2）先后从不同养殖场腹泻及呼吸道疾病的粪便、肠道和肺脏样品以及屠宰场肉品和环境样品分离得到的217株大肠杆菌。利用PCR对分离株进行系统进化分群及毒力基因检测,结果显示A群及B1群在各来源大肠杆菌中占多数,omp A、crl A、yijp、fim H、mat及ibe B的检出率在各来源大肠杆菌均处于高水平,与STEC关系密切的eae、hly基因以及与Ex PEC中的脑膜炎大肠杆菌致病过程中起到关键作用的ibe B、yijp基因在屠宰场来源的大肠杆菌中均有较高的检出率。通过毒力基因分析,本研究分别鉴定得到65株STEC及18株Ex PEC,这两类具有较高人兽共患风险的大肠杆菌在屠宰场样品中也均有检出,证明其在养殖环节流行广泛且在屠宰过程中污染的风险较大。（3）利用K-B纸片法对分离菌株的药敏特性进行检测。共检测9大类17种抗菌药物。结果显示,分离株对克林霉素、氨苄西林、强力霉素、恩诺沙星、阿米卡星、卡那霉素、阿莫西林及复方新诺明的耐药普遍,耐药率均高于70%。此外,这些菌株耐药谱广泛,98.62%的菌株可被定义为多重耐药（MDR）。（4）根据各菌株分子生物学特性的检测结果,选择18株代表菌株,在小鼠模型采用腹腔注射方式检测其致病性,对其毒力进行评估。通过筛选进一步对10株较强的致病菌株进行半数致死量测定及病理组织学观察。结果显示两株屠宰场分离株的毒力较强,其半数致死量分别为5×106.38CFU及5×106.50CFU,其他菌株半数致死量由低至高为5×107.38CFU、5×107.50CFU、5×107.83CFU。病理组织学观察结果显示各攻毒组小鼠肺部病变明显,肝脏也存在不同程度病变。综上,本研究建立了能够快速检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的三重PCR方法,并将其运用到华东地区肉羊养殖及屠宰加工过程中致病性大肠杆菌的检测中。对不同来源分离菌株的进化群、毒力基因和耐药性等生物学特性的研究以及代表菌株的致病性检测,尤其是STEC和Ex PEC的鉴定与分析,丰富了华东地区羊源致病性大肠杆菌的流行病学数据,证明了其在屠宰环节中较高的污染风险。该结果为肉羊养殖过程中大肠杆菌的防控提供了依据和指导,警示应加强肉羊养殖和肉品加工环节中大肠杆菌污染风险的监测与控制。