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乳腺癌是女性肿瘤相关性死亡的主要原因,患者最终一般死于肿瘤的远处转移。脂肪肝是乳腺癌患者中常见的肝脏疾病,随着人类饮食结构的改变,非酒精性脂肪肝这种肝脏代谢紊乱性疾病的发病率日益上升,其发病与肥胖、2型糖尿病等代谢性疾病密切相关。即使肥胖及肥胖相关性炎症被认为是乳腺癌发病、复发和转移的危险因素,脂肪肝也被证明与肝癌、肠癌、肺癌等恶性肿瘤的肝转移密切相关,但是脂肪肝与乳腺癌肝转移之间的关系鲜有研究。课题组前期的临床数据分析显示,被诊断有脂肪肝的乳腺癌患者出现肝转移的可能性显著低于无脂肪肝患者。但是这些数据仅仅是揭示了临床上这两个事件之间的关联性,若要确定脂肪肝对抑制乳腺癌肝转移的影响及其作用机制,还需进一步的实验研究。目的:本实验希望构建一个免疫功能正常的尽可能模拟人的脂肪肝小鼠乳腺癌肝转移模型,为深入研究脂肪肝对乳腺癌肝转移的影响及其作用机制奠定基础。方法:1、构建乳腺癌细胞脾内注射肝转移模型,从Balb/c小鼠同基因型细胞株(67NR、66c14、4T1.2 chA5、EMT 6.5)和 C57BL/6小鼠细胞株(E0771 LMB、AT-3)中分别选取最适宜形成肝转移瘤的细胞株;2、实验组Balb/c小鼠用含46%脂肪能量的高脂饮食喂养9-15周,对照组用普通饲料喂养相同时间,分别于实验饮食的第9、12、15周随机选取部分小鼠的肝脏行ORO和HE染色,检测脂肪肝程度,并于实验饮食的第9、12周脾脏内注射乳腺癌细胞,3周后处死小鼠,取小鼠整个肝脏提取基因组DNA检测肝转移瘤负荷;3、实验组与对照组C57BL/6小鼠分别于予高脂饮食和普通饮食饲养9周,随机选取部分小鼠的肝脏行ORO和HE病理学染色,判断肝脂肪变性的程度,另一部分小鼠注射乳腺癌细胞,三周后取小鼠肝脏提取基因组DNA并检测肝转移瘤负荷。结果:1、Balb/c小鼠细胞株(67NR、66c14、4T1.2 chA5、EMT 6.5)及 C57BL/6 小鼠细胞株(E0771 LMB、AT-3)经脾内注射后均可形成肝转移瘤,但是C57BL/6小鼠细胞株成瘤率只有约50%。比较细胞特性及成瘤时间、成瘤数目等因素后,选取最适合研究肝转移的Balb/c小鼠细胞株为4T1.2 chA5,C57BL/6小鼠细胞株为E0771 LMB;2、Balb/c小鼠在高脂饮食喂养9、12、15周后没有明显的肝脂肪变性,实验组与对照组之间肝转移瘤负荷无明显差异;3、C57BL/6小鼠在高脂饮食喂养9周后与正常饮食组对比,肝脏脂肪积聚增多,脾内注射肿瘤细胞后,RT-PCR结果显示高脂饮食降低了小鼠肝转移瘤负荷,但无论是脂肪积聚还是肿瘤负荷,实验组与对照组之间的差异均无统计学意义。结论:1、可通过脾内注射乳腺癌细胞株成功建立乳腺癌肝转移小鼠模型;2、发现Balb/c小鼠短期高脂饮食喂养不形成明显脂肪肝,且高脂饮食不能促进或抑制Balb/c小鼠乳腺癌肝转移,所以该品系小鼠不作为研究脂肪肝对乳腺癌肝转移影响的优先选择;3、C57BL/6小鼠高脂饮食喂养9周后倾向于形成脂肪肝,且高脂饮食有抑制小鼠乳腺癌肝转移的趋势,但要验证脂肪肝与肝转移之间的关系,还需继续优化实验条件进一步研究。