【摘 要】
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网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus, REV),属于反转录病毒科。而由于鸡痘病毒基因组DNA分子量很大,所以REV在其病毒繁殖过程中出现了整合入鸡痘病毒基因组D
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网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus, REV),属于反转录病毒科。而由于鸡痘病毒基因组DNA分子量很大,所以REV在其病毒繁殖过程中出现了整合入鸡痘病毒基因组DNA的现象,而目前国外报道这种情况很有可能就是现在的FPV的弱毒疫苗针对此种整合株鸡痘野毒的保护力都不是很理想的原因。本实验根据已发表文献设计合成五对,自行设计合成3对分别以REV基因组,鸡痘病毒(FPV)基因组DNA为不同模板的引物。收集国内不同厂家的八株鸡痘弱毒疫苗和从山东,河南不同地区分离到的七株鸡痘野毒株,分别在鸡胚成纤维细胞(CEF)上传代至出现典型的鸡痘痘斑为止,提取细胞DNA为模板,通过PCR分别在鸡痘野毒中扩增到鸡痘201 ORF与REV 5’端LTR的整合片断,5’端LTR基因片段,REV的gag基因,pol基因片断,env1, env2 ,env3基因,和REV 3’端LTR与鸡痘203 ORF的整合片断。在鸡痘疫苗中扩增到5’端LTR,和鸡痘201 ORF与REV5’端LTR的整合片断。说明野毒中已经几乎整合入REV前病毒基因组的完整序列,但是疫苗中只含有5’端LTR的片断。疫苗和野毒都同时进行间接免疫荧光试验,检测结果都为阴性,未检测到REV游离病毒粒子。并进行了整合有REV基因的鸡痘病毒对鸡群发病情况及疫苗免疫效力影响情况的探索。选择了两株几乎含有REV前病毒全序列的野毒和含有5’LTR的疫苗毒,REV HA-9901分别接种SPF鸡,同时设对照,常规免疫。接毒后每10天采血测NDV抗体滴度,称重。40天,50天分别剖检,取脾脏,胸腺,法氏囊,称重
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