芦荟多糖对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合作用研究

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目的:观察芦荟多糖对大鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合作用,通过测定创面愈合过程中EGF(表皮生长因子)、b FGF(碱性纤维细胞生长因子)、炎性介质(TNF-α、IL-1、IL-10)、免疫因子(Ig A、Ig G、Ig M)的表达,探讨芦荟多糖促进烫伤创面愈合的作用机制,为芦荟凝胶的开发推广应用提供科学实验依据。方法:SD大鼠150只,随机分成5组:阴性对照组、阳性对照组、给药组3组,每组30只,分笼喂养,自由摄食饮水,脱毛膏脱毛。麻醉前12小时禁食,可饮水。10%水合氯醛腹腔注射麻醉,水浴烙铁法致烫伤,经病理学测定为深Ⅱ度烫伤。阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予湿润烫伤膏,给药组3组分别给予含量为4mg/ml、6mg/ml、8mg/ml的芦荟多糖,各组动物每天给药4次,动态观察并记录伤口愈合状态及愈合时间。分别于第2,6,10,14,24d时间点处死动物并取材。HE染色,观察创伤组织的病理学形态改变;免疫组化法测定创面创面组织中EGF、b FGF的表达;ELISA检测炎性介质TNF-α、IL-1、IL-10水平变化;ELISA检测免疫因子Ig A、Ig G、Ig M含量变化。采用SPSS18.0统计学分析,以P值小于0.05具有统计学意义。结果:1.愈合率及愈合时间:阳性对照组≈8mg/ml给药组<6mg/ml给药组<4mg/ml给药组≈阴性对照组;2.HE染色:8mg/ml给药组和阳性对照组成纤维组织、毛细血管形成速度相近,比其它三组的形成速度明显增快;3.生长因子EGF、b FGF的表达:第6天达到峰值,随后下调,8mg/ml给药组与阳性对照都能明显增强EGF、b FGF的表达,表达强度由强到弱依次为:阳性对照组≈8mg/ml给药组<6mg/ml给药组<4mg/ml给药组≈阴性对照组;4.促炎因子(TNF-α、IL-1)的含量变化:8mg/ml给药组含量直接下调且与阳性对照组无明显差异,4mg/ml、6mg/ml给药组及阴性对照组在第6天达峰值,随后下调,至第14天,6mg/ml给药组明显低于阴性对照组,4mg/ml给药组水平明显高于阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5.抗炎因子IL-10的含量变化:8mg/ml给药组第6天达峰值,随后下调,与阳性对照组无明显差异,4mg/ml、6mg/ml给药组第10天达峰值,随后下调,到第24天时各组间水平无明显差异;6.免疫因子(Ig A、Ig G、Ig M)的含量:(1)Ig G含量变化8mg/ml给药组与阳性对照组无差异,6mg/ml给药组高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),4mg/ml给药组与阴性对照组无差异,(2)Ig A、Ig M含量变化8mg/ml给药组高于阳性对照组,第24天时有统计学差异(P<0.05),4mg/ml给药组与阴性对照组无差异,6mg/ml给药组高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芦荟多糖对大鼠深Ⅱ度烫伤创面疗效显著,通过调节EGF(表皮生长因子)、b FGF(碱性纤维细胞生长因子)、免疫抗体(Ig A、Ig G、Ig M)、炎性介质(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达,促进创面愈合,其中以8mg/ml给药组疗效最为显著。
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