转录因子GABP调控YAP基因的表达

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Hippo信号通路是近年来在果蝇体内发现的一条新的细胞信号通路,它通过调节细胞增殖、调亡以及细胞接触性生长抑制等方面实现对器官尺寸大小的控制。YAP(yes-associated protein)是Hippo信号通路下游的转录共激活因子,研究表明,YAP是一个癌基因,通路中其它成员通过磷酸化负调控YAP,来实现该通路的生物学功能。Hippo信号通路的调控异常会诱导YAP介导的靶基因激活并导致肿瘤的发生。在很多人类癌症疾病中,都已检测到YAP蛋白水平的上调。但目前有关YAP基因的表达调节,以及它如何在机体的正常发育、器官大小调节和肿瘤发生中起作用,仍然有待阐明。   为研究YAP基因的表达调节,寻找与其表达相关的转录因子,首先我们获得了YAP基因不同长度的启动子片段,利用链霉亲和素DNA-Protein pull down技术,我们发现Ets转录因子家族成员GABP能够与YAP启动子片段相互作用,接着我们通过q78实验以及染色体免疫共沉淀实验进一步证实了GABP能够与YAP启动子结合。然后我们将这些启动子片段与pGL3-Basic luciferase表达载体连接,荧光素酶检测实验表明GABP确实能够促进YAP基因表达,同时我们还发现,YAP启动子上含有多个Ets结合位点(GGAAG序列),GABP通过与YAP启动子上的Ets结合位点特异结合而实现对YAP基因的调控作用。最后我们将包括GABP在内的19个Ets家族成员(SP1B、ETV6、ETV7、ELF3、EHF、ELF2、SPDEF、ETV1、ETV5、ETV4、ELK3、ELK1、ETS2、ERF、ERG、Ell1、FEV、GABPα、GABPβ1L)与YAP启动子驱使的荧光素酶表达载体(YAP2600)共转,结果表明GABP可能是Ets家族转录因子成员中能够激活YAP基因最有效的一个多聚体蛋白复合物。   本文研究结果揭示了调节YAP蛋白水平的转录因子GABP的发现与鉴定过程,并初步阐明了Hippo信号通路在转录调控水平上的调节机制,为完善Hippo信号通路做出了新的贡献。
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