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【背景】帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种以黑质多巴胺能神经元进行性变性和丢失,路易体形成和沉积为主要病理特征的神经退行性疾病,近年来在中老年人群中的发病率日益增高。因线粒体功能障碍与衰老和多巴胺能神经元间存在密切的关联,因而被视为帕金森病发病机制中的关键因素之一。过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(Peroxisome proliferator-activated receptor 1 alpha,PGC-1α),由核基因PPARGC1Aγ编码,是一种功能强大的核转录调节因子,通过与不同的转录因子结合,广泛参与调控细胞线粒体再生和协调氧化代谢功能。新的研究表明,PGC-1α亦在中枢神经系统病变中起重要的保护作用,尤其是与线粒体功能障碍密切相关的退行性疾病,包括PD。本课题组前期试验显示,PGC-1α在MPP+诱导SH-SY5Y细胞的PD细胞模型中发挥了神经保护的作用,干扰PGC-1α基因的表达加重了MPP+毒性诱发的细胞线粒体破坏、氧化应激损伤及神经细胞的丢失。但目前较少有关于PGC-1α在PD动物模型中的运用及其可能扮演的有益角色的研究。【目的】鉴定慢病毒载体干扰C57BL/6小鼠SN区PGC-1α基因的表达。研究干扰SN区PGC-1α的表达对MPTP诱导的PD模型小鼠DA神经元及其线粒体功能的影响。【方法】1.实验模型建立:予C57BL/6雄性成年鼠PGC-1α-si RNA-GV118慢病毒载体(2.5 ul,5×108/ul)纹状体定点注射,2周后行MPTP(30 mg/kg)连续5天腹腔注射建立干扰PGC-1α表达的PD动物模型。2.转棒疲劳试验观察干扰PGC-1α表达对小鼠行为学的影响。免疫印迹和实时荧光定量PCR方法分别鉴定SN区PGC-1α的m RNA和蛋白表达水平。免疫组化染色和免疫印迹检测DA神经元存活。线粒体损伤和氧化应激水平通过对SN区线粒体超微结构的变化和黑质SOD活性的起伏进行观察和评估。【结果】1.PGC-1α-si RNA-GV118干预后,小鼠SN区PGC-1α的m RNA和蛋白表达显著降低。2.MPTP造模后,C57BL/6小鼠运动协调能力受损,DA神经元丢失,线粒体超微结构轻度破坏,SOD活性减低。3.与空病毒载体干预组相比,干扰PGC-1?基因使MPTP诱导的PD模型小鼠运动协调能力进一步受损,DA神经元严重缺失,线粒体超微结构明显破坏,SOD活性亦相应地减低。【结论】1.本实验运用PGC-1α-si RNA-GV118在C57BL/6小鼠纹状体定点注射有效地干扰SN区PGC-1α基因的表达,为研究PGC-1α在PD动物模型提供了实验基础。2.MPTP干预C57BL/6雄性小鼠建立PD动物模型成立,MPTP诱导C57BL/6小鼠出现帕金森样的改变,包括运动协调能力的损伤和SN区DA神经元的丢失。3.干扰PGC-1α基因的表达加重了MPTP的神经毒性作用,导致DA神经元线粒体功能障碍和抗氧化应激能力下降,提示PGC-1α对线粒体具有重要的调节作用,可能成为未来PD治疗和修复线粒体功能的潜在靶点。