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木蹄层孔菌(Fomes fomentarius)是担子菌纲(Basidiomycetes)多孔菌目(Polyporales)多孔菌科(Polyporaceae)层孔菌属(Fomes)真菌,斑褐孔菌[Fuscoporia punctata(Fr.)Curnn]属于多孔菌科(Polyporaceae)褐孔菌属(Fuscoporia)。木蹄层孔菌与斑褐孔菌都是生长在阔叶树上,且具有多种药理活性的大型药用真菌。木蹄层孔菌的药用部位子实体在民间可治疗食道癌等疾病;斑褐孔菌已有报道显示具有治疗心律不齐等药理特性,但斑褐孔菌子实体的化学成分和生物活性鲜有报道。为了深入认识这两种大型真菌药效物质基础,本课题研究了木蹄层孔菌和斑褐孔菌子实体的化学成分和生物活性,分离获得单体化合物,发现新颖化合物结构和筛选活性成分,为挖掘大型药用真菌中先导分子创制新药以及利用其资源开发产品提供理论依据。采用硅胶柱、反相ODS柱、Sephadex LH-20凝胶柱、半制备高效液相等色谱方法对药用真菌子实体中的化学成分进行分离纯化,并通过核磁波谱数据结合理化性质鉴定化合物结构。从木蹄层孔菌中分离得到1 1个化合物,分别鉴定为:2,4-二羟基-3,5-二甲基苯乙酮(1)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(2)、4-(4-羟基苯基)-3E-丁烯-2-酮(3)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(4)、麦角甾-7,22-二烯-3-酮(5)、1,5-2(3,4-二羟基苯基)-1,4-戊二烯-3-酮(6)、3,4-二羟基苯乙酮(7)、对羟基苯甲醛(8)、4-羟基苯乙酮(9)、3,4-二羟基苯甲醛(10)、4-(3,4-二羟苯基)-3E-丁烯-2-酮(11)。化合物6是首次从木蹄层孔菌中分离得到。从斑褐孔菌中分离得到14个化合物,分别鉴定为:原儿茶醛(12)、friedelin(13)、inonotusin B(14)、inoscavin C(15)、phellibaumin A(16)、phellifuropyranone A(17)、inoscavin A(18)、phelligridin D(19)、phellibaumin D(20)、邻苯二酚(21)、对羟基苯甲酸(22)、邻苯三酚(23)、对羟基苄叉丙酮(24)、1,6-dihydrocyclobuta[l,2-b:4,3-b’]dipyrrole-2,5-dione(25)。全部化合物都是首次从斑褐孔菌中分离得到,化合物25是新化合物。对分离鉴定后的化合物进行活性筛选:用PNPG法测定化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性;评估化合物的抗氧化清除DPPH自由基能力;采用Ellman法测定化合物抑制乙酰胆碱酯酶活性;采用96孔板微量法测定化合物的抑菌活性;采用PNPP方法测定化合物对蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP-1B)的抑制活性。结果显示:木蹄层孔菌中化合物6、7、10具有α-葡萄糖苷酶抑制活性;化合物1-11均有一定的清除DPPH自由基活性,化合物7清除率较高,达到71.99%;化合物1,3,6,7,11具有乙酰胆碱酯酶抑制活性;化合物6能够抑制金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌,最小抑菌浓度分别为64 mg·L-1和128 mg L-1。斑褐孔菌中化合物14、15、17-19都表现出了较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其IC50值分别为256.18、127.77、463.84、264.06、122.99μM;化合物15-17、19、20在清除自由基方面活性较好,IC50分别是30.45、227.82、32.90、25.79、6.71 μM。化合物14、15、17-20具有乙酰胆碱酯酶抑制活性,化合物15的抑制率为32.41%;化合物14-16、19、20对蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP-1B)具有抑制活性。