论文部分内容阅读
目的 探讨青蒿琥酯钠对兔耳增生性瘢痕形成的抑制作用，以期为临床应用提供一定的理论依据。方法 选用6只新西兰大白兔，制作增生性瘢痕动物模型，在兔耳腹侧做1cm(1cm大小全层皮肤缺损创面6个/侧，共72个。待兔耳创面上皮化后，利用自身配对对照，将兔左耳作为青蒿琥酯钠组，用60mg/ml青蒿琥酯钠20ul/瘢痕作局部注射,每隔2天1次，共5次；右耳作为对照组，用5%NaHCO320ul/瘢痕作局部注射。用HE、VG染色观察细胞和胶原形态，并测量相对增高指数，甲苯胺蓝染色作肥大细胞计数，TUNEL技术和DNA 琼脂糖凝胶电泳观察成纤维细胞凋亡，氯胺T 法测量羟脯氨酸含量，提取并测量胶原酶活性。结果 1、动物模型部分 增生性瘢痕发生率为90%，创面完全上皮化时间为16~19天。兔耳创面愈合后逐渐增生，明显高于皮面。光镜下观察增生性瘢痕厚度是正常皮肤的4~5倍，HE和VG染色见瘢痕组织表皮完整，真皮层明显增厚，真皮层含大量成纤维细胞和胶原纤维，胶原纤维粗大、排列紊乱，有特征性胶原结节形成。在预实验中我们发现此瘢痕能维持3个月左右，以后就逐渐变平软化。2、实验部分：大体观察青蒿琥酯钠组瘢痕厚度小于对照组。HE和VG染色显示青蒿琥酯钠组真皮层较薄，成纤维细胞数目较少，胶原纤维排列较整<WP=6>齐；对照组真皮层较厚，成纤维细胞数目较多，胶原排列紊乱，有漩涡状结构。青蒿琥酯钠组相对增高指数（HI）为3.56±1.04mm，对照组为4.45±0.81mm，两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。在青蒿琥酯钠组琼脂糖电泳可见DNA梯度，对照组为阴性；TUNEL染色显示两组凋亡率差异有显著性意义(P<0.01)。电镜显示青蒿琥酯钠组成纤维细胞形态不典型，可见核浓缩、核碎裂、核边聚现象，细胞内有较多的溶酶体，并有凋亡小体；对照组成纤维细胞形态正常，偶有少量肿胀线粒体，多数成纤维细胞功能活跃。肥大细胞计数青蒿琥酯钠组为5.27±1.27个/HP，对照组为10.67±2.35个/HP，两组比较差异有显著性意义。青蒿琥酯钠组羟脯氨酸含量明显少于对照组，两组比较差异有显著性意义（P<0.01），两组胶原酶活性比较差异亦有显著性意义（P<0.01）。结论 1. 青蒿琥酯钠能诱导成纤维细胞凋亡，减少瘢痕中肥大细胞数量，抑制成纤维细胞增殖，减少胶原合成；同时它能增强胶原酶活性促进胶原降解。青蒿琥酯钠对兔耳增生性瘢痕有一定的抑制作用，有望为青蒿素的应用开辟一个新的领域。2.在兔耳腹侧做全层皮肤缺损创面能形成类似人类增生性瘢痕，兔耳瘢痕模型是一种可靠的、简单、经济而且可重复性好的动物模型，可以用作增生性瘢痕研究的实验动物模型。