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目的研究吉西他滨(Gem)耐药的A549和NCI-H460细胞中胞啶脱酰氨酶(CDA)、核糖核苷酸还原酶M1亚单位(RRM1)、10q丢失的与张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)、切除修复交叉互补基因1(ERCCI)和脱氧胞苷酸酶(dCK)的表达以及RRM1(-)37A/C基因多态性。方法采用药物临床血浆峰浓度冲击与逐步增加剂量相结合的诱导方法,成功诱导抗Gem的细胞系A549/Gem和NCI-H460/Gem。在药物诱导前、诱导过程中和诱导成功后,采用实时荧光定量PCR法检测其CDA、RRM1、PTEN、ERCC1和dCKmRNA的表达,并对其RRM1(-)37位点进行基因分型。结果A549/Gem和NCI—H460/Gem细胞在药物诱导过程中,耐药指数(RI)随诱导时间的延长分别升至163.228和181.684,但达到一定峰值后逐渐降低,直至产生稳定的耐药性,R1分别为115.297和129.783。RRM1、VTEN、ERCC1和CDAmRNA表达量随着对Gem耐受程度的变化增高和降低,而dCKmRNA表达变化不明显。RRM1(-)37等位基因野生型引物能扩增出诱导各阶段A549/Gem和NCI—H460/Gem细胞的基因组DNA,而突变型引物则不能,说明A549/Gem和NCI—H460/Gem细胞目前的基因型与其亲代细胞一样,仍均为野生型。结论与亲代细胞比较,A549/Gem和NCI-H460/Gem细胞的CDA、RRM1、PTEN和ERCC1表达升高,dCK表达变化不明显;RRMI(-)37位点单核苷酸无突变,其基因型与亲代细胞一样为野生型。