【摘 要】
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Genome editing based on CRISPR/Cas9 system enables unprecedented breakthroughs in genomic research and the engineering of variants associated to clinical diseas
【机 构】
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College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling 712100, China“,”School
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Genome editing based on CRISPR/Cas9 system enables unprecedented breakthroughs in genomic research and the engineering of variants associated to clinical diseases[1,2].The CRISPR/Cas9 system induces double strand breaks (DSBs), which are primarily repaired by non-homologous end joining (NHEJ) and low-efficiency homology-direct repair (HDR) pathways.However, NHEJ can only randomly produce gene knockouts and HDR inefficiently induces sequence replacement[3].To precisely edit a genome, the CRISPR-based cytosine base editor (CBE) and adenine base editor (ABE) were developed, facilitating C-to-T and A-to-G base substitutions, respectively, without requiring DSBs[4,5].Although many refinements have optimized CBE and ABE[6-10], these editors can only induce base transitions.Also, they cannot achieve the editing of C or A at arbitrary positions due to limited editing windows and protospacer-adjacent motifs (PAMs).Moreover, unwanted bystander mutations can often be found within or near the protospacers, which impedes both the efficiency and fidelity of base editing[6].
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