【摘 要】
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经过硫酸铵分级盐析、DEAE-cellulose离子交换层析、SephacrylTMS-200柱层析,从白腐菌株Phellinus sp.SYBC-L2所产的漆酶中纯化得到电泳纯漆酶Lac3,其纯化倍数为28.27,回收率
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室
【基金项目】
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长江学者和创新团队发展计划(IRT0532)
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经过硫酸铵分级盐析、DEAE-cellulose离子交换层析、SephacrylTMS-200柱层析,从白腐菌株Phellinus sp.SYBC-L2所产的漆酶中纯化得到电泳纯漆酶Lac3,其纯化倍数为28.27,回收率为14.76%。Lac3为一种糖蛋白,糖含量29.66%,SDS-PAGE表观分子量约为64.3kD;其催化氧化DMP(2,6-Dimethoxyphenol)的表观Km值和Vmax分别为1.01mmol/L和186.2U/mg蛋白。Lac3的最适温度为60℃,最适pH为3.5;在30℃～50℃和pH4.5～9.0范围内稳定。Cu2+、SO42-、CO32-对Lac3具有一定促进作用,而Fe3+、Fe2+、NO3-则具有抑制作用。色素的最佳脱色条件为(Lac3终浓度为2U/ml):媒介元PV在温度50℃、pH值3.0的条件下反应2h,脱色率可达95.10%;弱酸蓝在温度40℃、pH值4.0的条件下作用3h,脱色率为75.09%。
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