中药中有效成分黄芩苷含量测定方法研究

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  摘 要:黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分,这种物质提取于黄芩干燥后的根部,是一种黄酮类化合物。它对于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒有很好的效果。本文中重点介绍了几种最普遍的检测方式,导数光谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和液质联用法,对比了几种检测方法的优势与使用条件。
  关键词:黄芩苷含量检测 导数光谱法 紫外分光光度法
  1、引言
  黄芩是一种双子叶植物唇形科植物的药材。黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分,这种物质提取于黄芩干燥后的根部,是一种黄酮类化合物。它能够水解出黄芩素和葡萄糖醛酸,构成了黄芩的一个重要的有效成分。黄芩苷是一种广泛使用的中药成分之一,常用于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒等疾病。它具有一定的生物活性,可以抑制细菌,利于排尿,黄芩苷还具有对抗炎症、清火利咽、安胎保胎、止咳等功效。
  黄芩苷别名为黄芩甙,分子式为C21H18O11,是一种黄色的结晶物质,它的熔点在223℃到225℃之间,溶于N,N-二甲基甲酰胺,吡啶,在碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中有良好的溶解度。在冰醋酸中呈微溶状态,丙酮、甲酸和乙酸中呈现难溶状态。在水、乙醚、氯仿和苯中基本不溶解,所以实验要避免使用这几种溶液作为溶剂。
  图1 黄芩苷化学结构式
  2、测定的药品的含量与纯度的方法
  2.1、导数光谱法
  导数光谱法分为:一阶导数光谱法、二阶导数光谱法和四阶导数光谱法。用一阶导数光谱法测定的时候最初利用紫外分光光度计分别将预先筹备好的黄芩苷标准品、样本溶液和阴性的对照组溶液进行吸光度的测定,记作A。用A对测定波长求一阶导数,用求出的一阶导数对应波长作图,得到需要的一阶导数曲线图。这样我们就可以直接确定出样品与黄芩苷标准品的最大吸收值,除掉阴性的干扰性,可以从图中直观看出对照溶液的波长(平行于基线)。这样简单提取处理的样品就可以检测出黄芩苷的含量了,具有简单、高效、快捷的优点。
  2.2、紫外分光光度法
  可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光光度法或称吸收光谱法的分析方法。紫外分光光度法是在朗伯──比耳定律为基础上展开的。凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,都可用紫外分光光度法来鉴别和测定的药品的含量与纯度。
  2.3、三波长-紫外分光光度计法
  现在科学中对黄芩苷含量检测的方法很多,高压液相、高效毛细血管和反相高效液相都是常用的检测方法,检测经费比较昂贵,主要是在检测仪器上,其维修管理等费用比较高昂,样品的前期处理也比较复杂。通常实验室的条件和资金有限,当然要选择比较便宜又高效的其他检测黄芩苷的方法,例如三波长-紫外分光光度法,这是分光光度法中的一种。它可以用于在工厂内部的线检测,不仅操作简单并且可以处理大量样品和快速检测出结果。它利用计算机计算和仪器检测同时进行。是通过计算干扰分布在三个不同的线性吸收谱在三个波长处的组分,通过对样本组的一系列操作获得获得这三个吸收值。这个方法可以解决当浓度无法保证相同或者稳定时造成的本地值发生移动或错位问题,当吸收峰不能对称排列的时候,还可以排除定量分析时造成的影响。不仅如此,对于一些干扰成分带来的混淆、吸收池不够干净带来的误差或者是不能完全配对组分成分带来的结果偏移,三波长-紫外分光光度计法都能够解决这些問题。并且不会受混浊溶液的干扰。
  2.4、高效液相色谱法
  高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱内,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。高效液相色谱法是一种稳定、分离样品效果好、操作简便可行的测定黄芩苷含量的方法。对于许多中药制剂都有很好的质量控制和监测的效果,发展的已经十分成熟。在检测时通常会使用C18柱或ODS柱作为固定相,而流动相的选择普遍采用甲醇-水-磷酸。
  目前,很多研究者正是采用了HPLC法对消炎灵口服液中黄芩苷含量进行检测,这是一个包括黄芩、大黄、黄柏在内的多种成分组成的复方药制剂。这种方法的实现,对测定药品中有效成分的含量和控制药品品质都有十分重要的意义。
  2.5、高效毛细管电泳法
  毛细管电泳:是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。主要设备由0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置组成。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器。高效毛细管电泳法又称为HPCE法。先要设定一个环境PH值,测试结果非常简便快捷,很短时间内就可以测出结果,并且结果相对准确,对于现场检测是一个良好的选择。
  黄芩经典的溶剂提取工艺暴露了所需溶剂量大、提取时间大、有毒物质滞留、影响提取物更好的利用等缺陷。所以更有必要加快对黄酮类和其他化学成分的提取技术研究。
  参考文献:
  [1]张言波,邵华峰,钱雪峰等.单分散球形硫化镉粒子的制备及其形貌控制[J].无机材料学报,2005,20(3):575-579.
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