高效液相色谱在食品检测中的应用分析

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  摘 要:食品安全一直是社会高度关注的问题之一,随着我国平均教育程度的提高,人们的食品安全意识逐渐增强。本文对高效液相色谱进行概述,分析了其在食品检测中的主要应用,为相关工作者提供参考。
  关键词:高效相色谱;食品安全;食品检测
  我国人均生活水平随着综合国力与经济水平的发展逐步提高,对食品安全的监管力度正渐渐加大,层出不穷的化学污染和新型添加剂都对当下的食品影响巨大。传统检测方法液相色谱分析速度慢、分析效率低的原因是其依靠重力的流动相,且固定相颗粒直径为100~150 μm,分析方法依靠通过分离后再次分级等多个过程。而高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)则于此方面有技术性上的突破,采用了高压输液系统后,流动相的流速增大,使检测过程达到了高速高效的目的,因此高效液相色谱在现代食品检测中得到了广泛应用。
  1 高效液相色谱概述
  1.1 结构概述
  由图1知,高效液相色谱由紫外吸收检测器、进样器、高压输液泵、数据系统、馏分收集器、色谱柱等部分组成。高压输液泵可分为隔膜泵和往复泵,其高压阈值为30~60 Mpa。
  进样器的压力应小于10 Mpa,进样仪器则采用了容量为1~10 μm
  的注射器。紫外吸收检测器可把检测液浓度转换为光学信号并对其进行分析。在实际检测过程中,通过色谱柱根据食品成分需要选择混合溶剂或者单一溶剂进行有效分析,混合溶剂成分比例不同,而单一溶剂成分极性不同,由此可以在载液泵入固定相色谱柱后由检测器完成有效检测。高压输液泵部分是此方法高压性特点的核心部分。在多数传统检测方法中,液体流动相经过色谱柱时,其受到的阻力使液体通过速度缓慢。另一特性为高灵敏度,可以对0.01 ng级别食品进行检测。在检测过程中流动相与固定相分离效率使其相较于气相色谱法有大幅提升,具备了高效性的特点。
  1.2 应用原理
  高效液相色谱检测方法的核心为分离原理,主要分离方法有液-固分配法、化学键合相色谱、液-液分配、离子交换分配法、离子分配法以及离子对分配法[1]。在检测过程中,需要以食品成分和物质为基准选择合适的分离方法进行相应检测。此方法对高聚物、环芳烃等类大分子、稳定性低且沸点高的物质有针对性。荧光或紫外线检测法可通过使用荧光检测发光物质或使用UVD吸收物质,弥补甜味剂物质检测中传统方法分离效果差的缺点。在色素添加剂的检测过程中,先通过按比例混合的乙醇和氨水对检测样品进行处理,然后使用超声波取样并处理,最后使用二极管阵列对过滤洗脱后的样品进行测定。在其他物质的检测中同样可以用二级管阵列进行测定和分析,回收率高、精确度高是此检测方法的优点。
  2 高效液相色谱在食品检测中的主要应用
  高效液相色谱在食品检测中多被应用于霉菌毒素、兽药残留、添加剂、农药残留以及相关营养成分等方面的检测中。本文将针对食品制造过程中添加剂以及添加剂与食品发生相关反应后产生的有害物质测定展开分析。
  2.1 N-亚硝胺的测定
  食品发色剂多用于熏制肉制品的生产过程中,亚硝酸盐和硝酸盐为常用的发色剂,二者中危害较小的硝酸盐在添加剂量过大的情况下生成N-亚硝胺,此物质对人体危害性极大。传统检测N-亚硝胺的方法为气相色谱法,此方法检测物质的单一性和精确性不高,且测定所需时间较长,基于物质沸点、吸附性以及极性的差异进行分离。而高效液相色谱测定过程约为13 min,极大程度提高了测定效率以及精确度,为食品安全中对易造成消化系统癌症等疾病且危害程度极高的N-亚硝胺成分测定提供了更高的保障[6]。
  2.2 多环芳烃和杂环芳烃的测定
  二苯并芘和中苯并芘是多环芳烃中常见的致癌物,常见于烤肉制品和油炸制品的检测当中,同N-亚硝胺一样在长期食用下有致癌风险。对杂环芳烃和多环烃传统测定方法为氧化铝层分析,基于氧化铝与不同物之间极性和吸附性的差异进行检测物质分离。测定过程通常需要10 h,相较于测定过程需要数十分钟的高效液相色谱花费时间过长、效率低下。高效液相色谱测定多环芳烃时使用的固定相为0.5%AgNO3,AgNO3中的银离子在二烷及化学键合薄壳型硅胶作为填充剂的基础情况下与杂环芳烃形成络合物,在乙腈正己烷淋洗后完成测定[2]。
  2.3 芳香胺的测定
  人工合成色素对人体健康造成极大危害。合成色素成分中含有物质芳香胺,若长期食用会在人体内会积累大量毒素而诱发膀胱癌等疾病,因此在食品安全检测中测定芳香胺也是必不可少的环节。传统测定方法——TCL分析法测定过程为50 min,使用甲醇-环戊烷作为流动相的高效液相色谱法,可极大程度地缩短测定时间至5 min[3]。
  2.4 偶氮化合物的测定
  肉制品生产过程中,食品与芳香胺反应生成二甲基偶氮笨和氨基偶氮笨等偶氮化合物,这类化合物同样具有致癌危害。在高效液相色谱测定中,淋洗过程中采用二氯甲烷-乙烷,通常使用MicropakSI-10色柱谱[4]。
  2.5 黄曲霉毒素的测定
  通过动物实验发现8种黄曲霉毒素都具有很强的毒性,已发现的黄曲霉毒素包括了M2、M1、G1、G2、B1和B2等8种不同结构,在检测发霉食物过程中,需测定是否存在黄曲霉毒素,例如在玉米发霉过程中常发现此类毒素。在诱发肝癌的实验中只需要微克量就可以达到诱发效果。因此在食品安全检测中,为了保障食用者安全,需要高效高速的测定方法。高效液相色谱法使用SiI6-X-11色谱柱,以氯仿-异辛烷作为淋洗液,可以在7 min内一次性洗脱出多种结构的黄曲霉毒素,完成快速高效测定[5]。
  3 结论
  综上所述,高效液相色谱结构中的高压输液泵使其具有高压性,突破了传统方法载液于相色谱中流动性过低的缺点,同时具备了高灵敏度、高效性等特点。其核心的液-液、液-固、离子、离子交换和离子对分等分离法,使高效液相色谱具有较大的应用范围,不仅在工业检测中得以应用,并且在食品安全检测中完成对营养物质和有害物质达到快速高效的测定任务。较之于传统的气相色谱、氧化铝层分析以及TCL分析法等测定方法,高效液相色谱提高了检测精确性和效率,大幅度缩短了测定时间,在食品安全检测中具有较高的实用性,为进一步保障食品安全检测质量做出了巨大贡献。
  参考文献
  [1]谢瑶,石萌萌,庞欣.高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用[J].化学通报,2010,73(8):684-688.
  [2]刘晓红,段常浩.高效液相色谱技术在食品检验中的应用[J].化工设计通讯,2019,45(4):96.
  [3]黎星,江丰,王会霞,等.固相萃取-超高效液相色谱法测定食品中10种合成色素[J].食品工业,2018,39(10):332-335.
  [4]杨春梅.探究食品分析中高效液相色谱技术的应用路径[J].现代食品,2017(9):39-41.
  [5]傅陈晨.高效液相色谱技术在食品检测中的应用[J].中国食品,2019(6):138.
  [6]夏宗艷,徐文远,徐豪,等.超高压液相色谱同时检测食品中8种人工合成色素[J].化工技术与开发,2019(1):56-60.
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