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[摘要] 目的 建立八味痛经胶囊的质量控制标准。 方法 采用TLC法对八味痛经胶囊中当归、桂枝、牡丹皮、延胡索进行鉴别，用HPLC法测定八味痛经胶囊中的牡丹皮和白芍共同有效成分芍药苷的含量。 结果 薄层色谱可鉴别出当归、桂枝、牡丹皮、延胡索的特征斑点，且阴性对照无干扰；HPLC法测定芍药苷0.2575～2.5750μg线性关系良好，平均加样回收率为98.98%，RSD=1.0%（n=6）。 结论 该方法简便可靠，专属性强，重现性好，可用于八味痛经胶囊的质量控制。
[关键词] 八味痛经胶囊；薄层色谱法；高效液相色谱法；芍药苷；质量标准
[中图分类号] R286 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2015）13-28-05
[Abstract] Objective To establish quality standard for Baweitongjing Capsules. Methods Angelicae sinensis Radix， Cinnamomi Ramulus， Moutan Cortex， Corydalis Rhizoma were identified by TLC， and the content of Paeoniflorin in Moutan Cortex and Paeoniae Alba Radix was determined by HPLC. Results TLC could identify Angelicae sinensis Radix， Cinnamomi Ramulus， Moutan Cortex， Corydalis Rhizoma. Paeoniflorin showed a good linear relationship at a range of 0.2575-2.5750μg. The average recovery was 98.98%（n=6） and RSD was 1.0%. Conclusion The method is simple， accurate， high specificity， and with good repeatability. The method can be used for Baweitongjing Capsules quality control.
[Key words] Baweitongjing capsules； TLC； HPLC； Paeoniflorin； Quality standard
八味痛经胶囊由牡丹皮、白芍、川牛膝等八味中药组成，是根据《国家中成药标准汇编·中成药地方标准上升国家标准部分》外科、妇科分册收载的八味痛经片[1]，经剂型改革研制而成。具有活血调经，化瘀止痛的功效，用于经行不畅，色紫成块，行经腹痛。为提供该药品可行的质量标准，我们对其开展了试验研究，采用薄层色谱法对八味痛经胶囊中当归、桂枝、牡丹皮、延胡索进行鉴别；牡丹皮、白芍为处方中主要药味，芍药苷是其共同的有效活性成分，具有抗自由基损伤，抑制细胞内钙超载和抗神经毒性等活性，体内实验证明其有降低血液黏度、抗血小板聚集、扩张血管、改善微循环、抗氧化、抗惊厥等多种生物学效应，并且毒副作用较小[2]。目前报道芍药苷的含量测定方法多为高效液相色谱法[3-13]，通过试验摸索和方法学研究，建立了HPLC法测定该制剂中芍药苷的含量，提高了该制剂的质量控制标准。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters 2996高效液相色谱仪；Waters 2996 PDA检测器；Empower数据工作站。WD-9403C型紫外分析仪（北京市六一仪器厂），BYCDE-939薄层自动铺板器（重庆南岸贝尔德仪器技术厂），KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），定量毛细管（美国Drummond公司），BP211D电子天平（Sartorius）。
1.2 试药
当归对照药材、桂皮醛、丹皮酚、延胡索乙素等对照品，均购自中国药品生物制品检定所。八味痛经胶囊（规格：0.31g/粒，江西汪氏药业有限公司，批号080107、080108、080109、080128、080129、080130），芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110736-200423）。甲醇、乙腈均为色谱纯，乙醚、丙酮等试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。硅胶G（薄层色谱用，青岛海洋化工有限公司）。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 当归的鉴别 取本品内容物6g，研细，加乙醚20mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液挥至1mL作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g，加乙醚20mL，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺当归的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约10cm，取出晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
2.1.2 桂枝的鉴别 取桂皮醛对照品，加乙醇适量制成每1mL含桂皮醛1μL的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺桂枝的阴性样品，再按2.1.1项下的供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取2.1.1项下的供试品溶液以及上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（17∶3）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约13cm，取出晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，置日光下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。见图2。 2.1.3 牡丹皮的鉴别 取丹皮酚对照品，加丙酮适量制成每1mL含丹皮酚1mg的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺牡丹皮的阴性样品，再按2.1.1项下的供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取2.1.1项下的供试品溶液以及上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸（7∶2∶1）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约10cm，取出晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。
2.1.4 延胡索的鉴别 取本品内容物3g，研细，加甲醇20mL，超声处理20min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，加氨试液调节pH值至9，用乙醚萃取3次，每次10mL，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1mL含延胡索乙素1mg的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺延胡索的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶三氯甲烷∶甲醇（15∶8∶2）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约11cm，取出晾干，置碘缸中熏至斑点显色清晰，取出在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
2.2 芍药苷的含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 采用Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相A（乙腈）、流动相B（0.1%磷酸溶液）按表1进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min；柱温为25℃；检测波长为230nm；进样量为20μL。理论板数以芍药苷峰计不低于2000。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品10.3mg，置100mL量瓶中，加稀乙醇适量使溶解
并稀释至刻度，摇匀，作为对照品母液。精密量取对照品母液5mL，置10mL量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得（HPLC色谱图见图5）。
2.2.3 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25mL，密塞称重，超声处理（功率250W，频率50kHz）30min，放冷，再称重，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得（HPLC色谱图见图5）。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺牡丹皮和白芍的阴性样品，再按2.2.3项下的供试品溶液的制备方法制得阴性对照溶液（HPLC色谱图见图5）。
2.2.5 线性关系考察 精密吸取2.2.2项下的对照品母液2.5、5、10、15、20、25μL，注入液相色谱仪，测定其峰面积。以芍药苷进样量x（μg）为横坐标，以峰面积y为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程y=1331863x-17482.93，r=0.9999。表明芍药苷进样量与峰面积在0.2575～2.5750μg范围内呈良好的线性关系。
2.2.6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，注入液相色谱仪，重复进样6次，测定其峰面积，RSD为0.7%。
2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于放置0、2、4、6、8h进样，按上述色谱条件测定，峰面积的RSD为0.5%，说明八味痛经胶囊供试品溶液中芍药苷在8h内均稳定。
2.2.8 重复性试验 取同一批号八味痛经胶囊样品（批号080107），按2.2.3项下的供试品溶液处理方法制备6份供试品溶液，进行测定，计算含量，结果平均含量为3.0573mg/g，RSD为0.1%。
2.2.9 回收率试验 取已知含量的八味痛经胶囊样品（批号080107）6份，每份取样0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入芍药苷对照品溶液（0.0309mg/mL）25mL，密塞称重，超声处理（功率250W，频率50kHz）30min，放冷，再称重，用稀乙醇
3 讨论
取芍药苷对照品溶液，注入液相色谱仪，选取二极管阵列检测器在210～400nm范围内进行全波长扫描，测定芍药苷在230.8nm波长处有一较大吸收，参照中国药典（一部）白芍药材项下规定[14]，选择230nm作为本实验检测波长。
曾考察过I.甲醇∶水（25∶75），II.乙腈∶0.1%磷酸溶液（15∶85），III.乙腈∶0.1%磷酸溶液（17∶83）这三种流动相，但以乙腈∶0.1%磷酸溶液（17∶83）为流动相，芍药苷峰基线完全分离，对称性好，分析时间适中，但芍药苷峰后较长时间处有2～3个小峰，为了避免影响后面进样中芍药苷峰，在芍药苷峰采集完后采用梯度洗脱赶掉小峰，经试验摸索，按本文中的色谱条件梯度洗脱较佳。
试验中对供试品溶液提取方法、提取溶剂、溶剂用量和提取时间分别进行了考察，提取方法考察了加热回流法和超声提取法，结果表明超声提取法较加热回流法提取更完全，且操作方便，故选择超声提取法；提取溶剂考察了甲醇、50%甲醇、乙醇、稀乙醇四种溶剂，结果表明稀乙醇较其他溶剂提取更完全，故选择稀乙醇作为提取溶剂；溶剂用量考察了稀乙醇25、50、75mL三种用量，结果表明稀乙醇25mL提取已较完全，与稀乙醇50、75mL的结果无显著差异，故选择稀乙醇用量为25mL；提取时间考察了超声提取15、30、45、60min，结果表明超声提取30min已较完全，与超声提取45、60min的结果无显著差异，故选择提取时间为30min。 [参考文献]
[1] 国家药品监督管理局.国家中成药标准汇编·中成药地方标准上升国家标准部分[S].外科（妇科分册）：426-429.
[2] 郑世存，李晓宇，欧阳兵，等.芍药苷药理作用研究新进展[J].中国药物警戒，2012，9（2）：100-103.
[3] 吴琼莲，何继祥，程静，等.HPLC法测定八珍益母片中芍药苷含量[J].中国药师，2007，10（10）：982-983.
[4] 林丽洋，贺英菊，陈艳，等.阿归养血片质量标准的研究[J].中成药，2007，29（3）：375-378.
[5] 钟美霞，肖佳尚，劳海燕.HPLC法测定通络胶囊中芍药苷含量[J].广东药学院学报，2007，23（3）：252-253.
[6] 孙学勤，洪莲，许凡，等.牡丹皮中芍药苷含量测定方法的研究[J].宿州学院学报，2007，22（3）：109-112.
[7] 王晓玲，邓平.反相高效液相色谱法测定更年静心胶囊芍药苷含量[J].医药导报，2007，26（11）：1362-1363.
[8] 庞鹏.归芍合剂中丹参的鉴别和芍药苷的含量测定[J].药学与临床研究，2007，15（3）：249-250.
[9] 彭文进，杨芳.反相高效液相色谱法测定舒心宁片中芍药苷含量[J].中国药业，2007，16（22）：34-35.
[10] 张俊红，刘桂林，陈平.高效液相色谱法测定健肝乐软胶囊中芍药苷含量[J].医药导报，2007，26（12）：1504-1505.
[11] 刘平，王艳君.RP-HPLC法测定调经祛斑片中芍药苷的含量[J].中国药房，2007，18（36）：2850-2852.
[12] 王晓玲，陈振德，邓平.更年静心胶囊质量标准研究[J].中国药房，2007，18（36）：2834-2836.
[13] 谢海萍，刘柳毅.骨刺胶囊的质量标准研究[J].中国当代医药，2015，22（19）：9-11.
[14] 国家药典委员会.中国药典[S].第一部.北京：化学工业出版社，2005：68-69.
（收稿日期：2015-03-22）
[关键词] 八味痛经胶囊；薄层色谱法；高效液相色谱法；芍药苷；质量标准
[中图分类号] R286 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2015）13-28-05
[Abstract] Objective To establish quality standard for Baweitongjing Capsules. Methods Angelicae sinensis Radix， Cinnamomi Ramulus， Moutan Cortex， Corydalis Rhizoma were identified by TLC， and the content of Paeoniflorin in Moutan Cortex and Paeoniae Alba Radix was determined by HPLC. Results TLC could identify Angelicae sinensis Radix， Cinnamomi Ramulus， Moutan Cortex， Corydalis Rhizoma. Paeoniflorin showed a good linear relationship at a range of 0.2575-2.5750μg. The average recovery was 98.98%（n=6） and RSD was 1.0%. Conclusion The method is simple， accurate， high specificity， and with good repeatability. The method can be used for Baweitongjing Capsules quality control.
[Key words] Baweitongjing capsules； TLC； HPLC； Paeoniflorin； Quality standard
八味痛经胶囊由牡丹皮、白芍、川牛膝等八味中药组成，是根据《国家中成药标准汇编·中成药地方标准上升国家标准部分》外科、妇科分册收载的八味痛经片[1]，经剂型改革研制而成。具有活血调经，化瘀止痛的功效，用于经行不畅，色紫成块，行经腹痛。为提供该药品可行的质量标准，我们对其开展了试验研究，采用薄层色谱法对八味痛经胶囊中当归、桂枝、牡丹皮、延胡索进行鉴别；牡丹皮、白芍为处方中主要药味，芍药苷是其共同的有效活性成分，具有抗自由基损伤，抑制细胞内钙超载和抗神经毒性等活性，体内实验证明其有降低血液黏度、抗血小板聚集、扩张血管、改善微循环、抗氧化、抗惊厥等多种生物学效应，并且毒副作用较小[2]。目前报道芍药苷的含量测定方法多为高效液相色谱法[3-13]，通过试验摸索和方法学研究，建立了HPLC法测定该制剂中芍药苷的含量，提高了该制剂的质量控制标准。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters 2996高效液相色谱仪；Waters 2996 PDA检测器；Empower数据工作站。WD-9403C型紫外分析仪（北京市六一仪器厂），BYCDE-939薄层自动铺板器（重庆南岸贝尔德仪器技术厂），KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），定量毛细管（美国Drummond公司），BP211D电子天平（Sartorius）。
1.2 试药
当归对照药材、桂皮醛、丹皮酚、延胡索乙素等对照品，均购自中国药品生物制品检定所。八味痛经胶囊（规格：0.31g/粒，江西汪氏药业有限公司，批号080107、080108、080109、080128、080129、080130），芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110736-200423）。甲醇、乙腈均为色谱纯，乙醚、丙酮等试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。硅胶G（薄层色谱用，青岛海洋化工有限公司）。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 当归的鉴别 取本品内容物6g，研细，加乙醚20mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液挥至1mL作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g，加乙醚20mL，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺当归的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约10cm，取出晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
2.1.2 桂枝的鉴别 取桂皮醛对照品，加乙醇适量制成每1mL含桂皮醛1μL的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺桂枝的阴性样品，再按2.1.1项下的供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取2.1.1项下的供试品溶液以及上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（17∶3）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约13cm，取出晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，置日光下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。见图2。 2.1.3 牡丹皮的鉴别 取丹皮酚对照品，加丙酮适量制成每1mL含丹皮酚1mg的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺牡丹皮的阴性样品，再按2.1.1项下的供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取2.1.1项下的供试品溶液以及上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸（7∶2∶1）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约10cm，取出晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。
2.1.4 延胡索的鉴别 取本品内容物3g，研细，加甲醇20mL，超声处理20min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，加氨试液调节pH值至9，用乙醚萃取3次，每次10mL，合并乙醚萃取液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1mL含延胡索乙素1mg的溶液作为对照品溶液。同时制备阴性对照溶液（按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺延胡索的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备）。按中国药典（一部）薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷∶三氯甲烷∶甲醇（15∶8∶2）为展开剂，置展开剂预饱和10min的展开缸内，展开约11cm，取出晾干，置碘缸中熏至斑点显色清晰，取出在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
2.2 芍药苷的含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 采用Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相A（乙腈）、流动相B（0.1%磷酸溶液）按表1进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min；柱温为25℃；检测波长为230nm；进样量为20μL。理论板数以芍药苷峰计不低于2000。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品10.3mg，置100mL量瓶中，加稀乙醇适量使溶解
并稀释至刻度，摇匀，作为对照品母液。精密量取对照品母液5mL，置10mL量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得（HPLC色谱图见图5）。
2.2.3 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25mL，密塞称重，超声处理（功率250W，频率50kHz）30min，放冷，再称重，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得（HPLC色谱图见图5）。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按照处方中各药味的比例和制法项规定制成缺牡丹皮和白芍的阴性样品，再按2.2.3项下的供试品溶液的制备方法制得阴性对照溶液（HPLC色谱图见图5）。
2.2.5 线性关系考察 精密吸取2.2.2项下的对照品母液2.5、5、10、15、20、25μL，注入液相色谱仪，测定其峰面积。以芍药苷进样量x（μg）为横坐标，以峰面积y为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程y=1331863x-17482.93，r=0.9999。表明芍药苷进样量与峰面积在0.2575～2.5750μg范围内呈良好的线性关系。
2.2.6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，注入液相色谱仪，重复进样6次，测定其峰面积，RSD为0.7%。
2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于放置0、2、4、6、8h进样，按上述色谱条件测定，峰面积的RSD为0.5%，说明八味痛经胶囊供试品溶液中芍药苷在8h内均稳定。
2.2.8 重复性试验 取同一批号八味痛经胶囊样品（批号080107），按2.2.3项下的供试品溶液处理方法制备6份供试品溶液，进行测定，计算含量，结果平均含量为3.0573mg/g，RSD为0.1%。
2.2.9 回收率试验 取已知含量的八味痛经胶囊样品（批号080107）6份，每份取样0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入芍药苷对照品溶液（0.0309mg/mL）25mL，密塞称重，超声处理（功率250W，频率50kHz）30min，放冷，再称重，用稀乙醇
3 讨论
取芍药苷对照品溶液，注入液相色谱仪，选取二极管阵列检测器在210～400nm范围内进行全波长扫描，测定芍药苷在230.8nm波长处有一较大吸收，参照中国药典（一部）白芍药材项下规定[14]，选择230nm作为本实验检测波长。
曾考察过I.甲醇∶水（25∶75），II.乙腈∶0.1%磷酸溶液（15∶85），III.乙腈∶0.1%磷酸溶液（17∶83）这三种流动相，但以乙腈∶0.1%磷酸溶液（17∶83）为流动相，芍药苷峰基线完全分离，对称性好，分析时间适中，但芍药苷峰后较长时间处有2～3个小峰，为了避免影响后面进样中芍药苷峰，在芍药苷峰采集完后采用梯度洗脱赶掉小峰，经试验摸索，按本文中的色谱条件梯度洗脱较佳。
试验中对供试品溶液提取方法、提取溶剂、溶剂用量和提取时间分别进行了考察，提取方法考察了加热回流法和超声提取法，结果表明超声提取法较加热回流法提取更完全，且操作方便，故选择超声提取法；提取溶剂考察了甲醇、50%甲醇、乙醇、稀乙醇四种溶剂，结果表明稀乙醇较其他溶剂提取更完全，故选择稀乙醇作为提取溶剂；溶剂用量考察了稀乙醇25、50、75mL三种用量，结果表明稀乙醇25mL提取已较完全，与稀乙醇50、75mL的结果无显著差异，故选择稀乙醇用量为25mL；提取时间考察了超声提取15、30、45、60min，结果表明超声提取30min已较完全，与超声提取45、60min的结果无显著差异，故选择提取时间为30min。 [参考文献]
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（收稿日期：2015-03-22）