阿魏提取物对伞形食用菌菌丝生长的影响

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  摘 要:通过阿魏菇、香菇、金针菇、圆菇、平菇几种伞形食用菌的菌丝在阿魏提取物培养基上的生长试验,探讨了不同浓度阿魏提取物对伞形食用菌菌丝生长的影响。结果表明,含阿魏提取物的培养基对阿魏菇母种菌丝生长有明显的促进作用,均优于常规PDA培养基,最佳浓度为24 g/L,而对其他几种食用菌菌菌丝生长有抑制作用,并且随阿魏浓度增加菌丝生长缓慢。
  关键词:阿魏;提取物;食用菌;菌丝
  药用植物野生阿魏是新疆特有的国家级濒危野生保护植物物种,为伞形科多年生、一次结果的草本植物。阿魏所特有的化合物具有抗突变、抗癌以及保护免疫系统和心血管系统的特性,同时也表现出抗肿瘤、真菌和寄生物等增长活性,阿魏中的倍半萜酯Ferutinin和Tenuferidine是低毒副作用的激素活性成分[1]。结构中含有的对羟基苯酰基是必要的药效基团,这两种食用菌是一种高蛋白、低脂肪、富含维生素与矿物质的保健蔬菜,食用菌及其提取物在临床中开始用于治疗癌症,富含的真菌多糖等活性物质,能促进新陈代谢,抵抗衰老,增强机体免疫力,对调节人体生理平衡起积极作用[2]。
  研究表明,添加一定量阿魏粉的阿魏菇能提前出菇且出菇集中,同时也能在一定程度上抑制杂菌感染,提高阿魏菇的出菇率和产量,最终提高经济效益[3]。所以本实验旨在研究几种与人们生产生活关系密切的食用菌(阿魏菇、香菇、金针菇、圆菇、平菇),它们都属于属于真菌门(Eumycota)、担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycotes)、伞菌目(Agaricales)[4]。以求探索它们与阿魏提取物之间的关系,以便为食用菌育种和高产优质栽培技术提供参考,促进“两高一优”食用菌产业的发展。
  1 材料与方法
  1.1 材料与仪器
  1.1.1 试验材料
  供试菌种(阿魏菇、香菇、金针菇、圆菇、平菇)购自新疆农科院;阿魏采于新疆清河。
  1.1.2 试剂
  乙醇;葡萄糖;琼脂;MgSO4·7H2O;KH2PO4。
  1.1.3 仪器设备
  AR5120型电子精密天平:奥豪斯公司;LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸气灭菌器:上海申安医疗器械厂;SW-CJ-LCU型双人单面净化工作台:苏州净化设备有限公司;DHP-9052电热恒温培养箱:上海一恒科技有限公司;DZKW-D-2型电热恒温水浴锅:北京市永光明医疗仪器厂;CS-101-1AB型电热恒温鼓风干燥箱:中国重庆银河试验仪器有限公司;SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵:巩义市英峪予华仪器厂;EYELA-N-1001型旋转蒸发仪:上海爱朗仪器有限公司;EYELA-SB-2000型水浴锅:上海爱朗仪器有限公司。
  1.2 试验方法
  1.2.1 阿魏提取物的制备
  供试阿魏材料干燥、粉碎,分别称取1.5 g、3.0 g、
  4.5 g、5.0 g和7.5 g,置于具塞三角瓶中,按1∶10的料液比加入75%乙醇,在室温条件下浸泡提取24 h,滤出浸提液,加入75%乙醇进行第二次浸提,合并二次提取液,过滤,旋转蒸发器中浓缩,制得阿魏的提取物。
  1.2.2 培养基制备
  1.2.2.1 对照培养基
  以PDA加富培养基为对照培养基。
  1.2.2.2 阿魏提取物培养基
  将制备好的PDA加富培养基,趁热分装入三角瓶中,培养基装量为250 mL,分别在其中加入阿魏的各种量的提取物,使其相当于干阿魏的含量分别达到6 g/L、12 g/L、18 g/L、24 g/L和30 g/L。用棉塞封口,121 ℃高压灭菌20 min,制成平板培养基待用。
  1.2.3 接种培养及观察
  在超净工作台内,取0.5 cm3的各供试菌种块分别接种于含阿魏提取物和对照培养基中,每一浓度接种3块平皿,每块平皿内按对称三角形接种3块菌丝体,28 ℃恒温培养,定期观察菌丝生长势,测量菌落直径,菌斑大小采用十字法测定,计算生长速度。
  2 结果与分析
  2.1 培养基中加与不加阿魏提取物对各菌种菌丝生长的影响
  由图1知,阿魏菇在添加阿魏提取物的培养基上的生长情况与对照相比,菌丝浓密,长势较强,长速较快,而其他几种菌种在添加阿魏提取物的培养基上的生长情况与对照相比,菌丝稀薄,长势较弱,长速缓慢。在添加阿魏提取物的培养基上,几种供试菌种中,阿魏菇生长速度最快,金针菇最慢。在对照组中,平菇生长速度最快,金针菇最慢。
  2.2 金针菇的菌丝生长结果及分析
  金针菇在培养过程中经观察得,所有培养基,无论浓度高低均未生长,整体污染严重,处理组比对照的污染少。
  2.3 平菇的菌丝生长结果及分析
  平菇整体长势旺,菌丝白呈网状布满培养基;对照比处理组菌圈大,生长速度快,且处理随阿魏提取物浓度的增加,菌丝生长速度先快后慢;污染少,添加阿魏提取物的培养基几乎无污染。
  2.4 香菇、圆菇的菌丝生长结果及分析
  香菇、圆菇的菌丝生长非常缓慢,菌丝只在菌塊周围成绒团状,对照菌丝均比处理组菌圈大,且香菇略大于圆菇。不同浓度阿魏提取物培养基之间,菌丝呈短绒毛状,生长速度差异不大。对照菌丝有污染,且圆菇比香菇污染厉害。
  2.5 阿魏菇的菌丝生长结果及分析
  从菌丝生长势来看,各处理均优于对照,菌丝洁白,棉絮状,发达繁茂,阿魏提取物浓度在18~24 g/L的菌丝呈密毡状,生长势强。对照菌丝生长缓慢,绒毛状,菌丝长势弱。
  从菌丝生长速度来看,各处理均优于对照,随着浓度升高生长速度增加。处理4、5与其他处理相比,差异均达到极显著水平,其中长速最快的为处理4,平均长速为
  0.55 cm/d,但达到30 g/L时有所下降,可能存在高浓度的抑制作用,说明适合阿魏菇菌丝体生长的阿魏提取液的浓度为24 g/L。各处理均未污染。(表1)
  3 结论与讨论
  金针菇的菌丝生长对阿魏提取物特别敏感,栽培中应避免使用;阿魏提取物对平菇的菌丝生长影响也较明显,因此,在栽培过程中也不宜使用;阿魏提取物对香菇、圆菇的生长影响不大,生产中也就没必要添加;阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长有促进作用,阿魏菇栽培过程中用阿魏提取物浓度为24 g/L较适宜。
  阿魏提取物对阿魏菇母种菌丝的生长有明显的促进作用,对其他几种伞形食用真菌菌丝生长有抑制作用,并且随阿魏浓度增加菌丝生长缓慢。同是伞形食用菌,作用效果大不相同,可知阿魏和阿魏菇之间的这种特殊效应是与它们的内在物质密切相关的,阿魏提取物的添加是否与阿魏菇中某些药用成分存在相关性,阿魏中是否有某些专一促进阿魏菇菌丝生长的物质存在,从而体现阿魏和阿魏菇之间专性寄生关系,还有待深入研究。
  参考文献
  [1]LKEDA K,ARAO Y,OTSUKA H,et al.Terpenoids Found in the Umbell iferae Family Act as Agonists/Antagonists for Erαand ERβ: Differential Transcription Activity between Ferutinine-liganded Erαand ERβJ[J].Biochem Biophysi Res Commuicat,2002,291(2):354-360.
  [2]马淑凤,李铁超,李书倩,等.白灵菇多糖研究进展[J].安徽农学,2005(7):1264-1268.
  [3]田海霞,刘绪广,等.培养基中添加阿魏粉对阿魏菇生长的影响[J].中国食用菌,2008(1):30-33.
  [4]贾身茂,秦淼.我国白阿魏蘑的驯化与栽培[J].中国食用菌,2006(3):3-7.
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