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[摘要] 目的 探讨分析全血标本保存时间对血常规各参数的影响。 方法 随机抽取健康体检者40例，将所有全血标本4℃存放，分别在采血后第1、2、3、5、7天运用Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪进行检测，并进行统计学分析。 结果 WBC、RBC、Hb、MCH、PLT、RDW-CV、N、L、M及E在4℃冰箱保存7 d后，仍可保持稳定，测定数据与新鲜标本检测结果无显著性差异（P>0.05）。而HCT、MCV、RDW-SD 及B%所测结果在第3天后结果逐渐升高，MCHC逐渐降低，差异有显著性（P<0.05）。 结论 全血细胞计数标本在4℃条件下存放保存3 d内，结果较稳定，部分主要分析指标结果1周内尚可保持稳定。
[关键词] 保存时间；血细胞分析仪；细胞分类
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）13-0094-02
[Abstract] Objective To investigate and analyze the influence of whole blood specimens storage time in blood routine examination parameters. Methods All 40 healthy cases were randomly selected， and all the whole blood specimens were stored at 4℃. 1， 2， 3， 5 and 7 days after the blood sampling， the specimens were tested by Sysmex-XS1000 automated hematology analyzer， and statistical analysis was conducted. Results The specimens were kept in refrigerator at 4℃， for 7 days， WBC， RBC， Hb， MCH， PLT， RDW-CV， N， L， M and E could still maintain stable. There was no significant difference （P>0.05） in comparing all the measurement data and the fresh sample measurement data. HCT， MCV， RDW-SD and B% gradually increased after 3 days， and MCHC gradually decreased. The difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Complete blood count specimens can store at 4℃ for 3 days. The results are relatively stable， and parts of main analysis indicators results can still remain stable for a week.
[Key words] Storage time； Hematology analyzer； Cell classification
血细胞分析仪已在各级医院临床检验室普遍应用，血常规的准确检验数据可为判断病情起非常重要的作用，国际血液学标准委员会（ICSH）推荐标本应在采集后4 h内检测。随着医疗检验标本质量的改进及对可能有争议的标本进行复查，其中标本放置的时间是一个重要环节，对实验结果的准确性有一定影响[1]。本文应用Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪，对不同放置时间的标本进行了对比测定，以探讨检测标本的时效性对该仪器测定结果的影响。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选择2013～2014年四川省人民医院的健康体检者40例为研究对象，其中男20例，女20例。年龄14～62岁，平均39.42岁。真空采集静脉血2 mL，EDTA-2K抗凝，颠倒混匀。标本均无溶血及凝块。
1.2仪器和试剂
Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪，试剂及质控品均为厂家配套。
1.3方法
按全血标本检测操作规程，将40人份全血标本颠倒混匀后依次在Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪自动进样模式下测定，记录血细胞分析各参数数据。测定完毕后立即保存在4℃冰箱。分别在2、3、5、7 d的同一时间再次检测，检测标本前半小时从冰箱取出放至室温。以第1天新鲜标本结果作为对照。
1.4 统计学分析
使用SPSS17.0软件作统计学处理，进行重复测量资料的方差分析方法，各不同时间点测定结果用（x±s）表示。以第1天新鲜标本结果为对照，各不同时间点测定结果与之相比较，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
40例血常规标本每天测定的其中15项参数测定结果见表1，经过7 d的低温保存后，其中WBC、RBC、Hb、PLT、MCH、RDW-CV结果稳定，测得数据与新鲜标本结果差异无统计学意义（P>0.05）。白细胞分类NEUT、LYMPH、MONO、EO 7 d内低温保存后的结果与新鲜标本结果差异也无统计学意义（P>0.05）。而HCT、MCV、RDW-SD所测结果在第3天后结果逐渐升高，MCHC逐渐降低，差异有统计学意义（P<0.05）。BASO%在低温保存后的结果与新鲜标本结果差异有统计学意义（P<0.01）。
3 讨论 准确的血常规检验数据不仅是诊断各种血液病的主要依据，还对其他系统疾病的诊断和鉴别诊断起非常重要的作用。但血常规的测定也受标本采集是否顺利、抗凝剂的比例、温度、时间、方法学等多方面因素的影响[2]，ICSH推荐标本在采集后应4 h内完成检测，然而有时候标本可能超过1 d或更长时间才能检测，仪器说明书和文献报道则没有明确的说明标本检测的时效性，通常认为血常规标本在室温下保存24 h到48 h不影响检测结果[3，4]。本实验室针对标本保存的标准化操作程序规定，对已完成检测的血常规标本4℃冰箱保存1周，以备复查。
本研究中我们通过对40例标本的时效性分析结果发现，血标本在4℃保存，WBC、RBC、Hb、MCH、PLT、RDW-CV在7 d内，各项结果相对于初次测定值均变化不大（P>0.05），随着时间的增加无趋势性变化，结果比较稳定，尤以RBC和Hb稳定性最好，且RBC、Hb、MCH至少在7d内结果稳定，与Gene等[5]的结论相一致；其次为PLT和WBC，虽然个别标本的PLT结果随着时间推移下降明显，可能在低温保存时使部分细胞黏附、聚集、激活，致使PLT 聚集成较大颗粒，仪器难以识别所致。白细胞分类中NEUT、LYMPH、MONO、EO在低温保存7 d后的结果与新鲜标本差异无统计学意义（P>0.05），这与相关文献报道一致[6，7]。HCT、MCV、MCHC、RDW-SD在7 d内结果较初次测定值的变化明显（P<0.05），且逐渐升高；BASO%在低温保存后结果与新鲜标本结果差异有显著性意义（P<0.01），随着时间的延长，HCT、MCV测定值逐渐增大，MCHC反而逐渐降低，这与娄坚江等[8，9]的报道一致，可能是随着时间的延长，血浆中的葡萄糖减少，维持红细胞形态所必需的各种泵的运转因能量供应中断而停止，无法维持红细胞自身的正常渗透压或形态，导致红细胞的体积随着葡萄糖的消耗殆尽而增大，引起MCV明显增大，MCHC逐渐降低。
在日常检验工作中，最好将血标本尽快检测，如遇特殊原因未能及时检测的应4℃冷藏48～72 h，其检测结果基本可满足血液常规需要，同时也应该考虑到红细胞、血小板相关参数及白细胞分类的细微变化[10，11]，在检验结果中及时解释并标注清楚，以免影响检测结果。本研究基于用Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪对于成年健康体检者的检测，而对于婴幼儿和血液系统疾病如白血病、贫血、红细胞增多症、血小板减少症及增多症等患者，以及用其他仪器的21项血常规参数的变化是否有差异，还需要我们更详细深入的研究。
[参考文献]
[1] 彭黎明，王兰兰. 检验医学自动化及临床应用[M]. 北京：人民卫生出版社，2003：243.
[2] 何敏，熬小梅，李向饶. 标本保存时间和温度对血细胞分析仪测定结果的影响[J]. 中国临床医学，2006，7（ 9）： 17-18.
[3] Sysmex Operator，s Manual.XS-1000 Main Unit[M]. Japan：Sysmex Corporation.
[4] Davies JI，Smyth M S，Martin JH. Automat edreticulocyte counting：Evaluation of the coulter STKS hematology analyzer reticulocyte counting function[J]. Clin Lab Haematology，1997，9（2）：89-92.
[5] Gene L，Gulati PD，Lawrence J，et al. Changes in automated complete blood cell count and differential leukocyte count results induced by storage of blood at room temperature[J]. Arch Pathol Lab Med，2002，126（3）：336-342.
[6] Sirdah MM，Abushahla AK，Al-Sarraj HA，et al. Effect of the addition of the antioxidant taurine on the complete blood count of whole blood stored at room temperature and at 4℃ for up to 7 days[J]. Hematol Hemoter， 2013， 35（1）：44-51.
[7] Hedberg P，Lehto T. Aging stability of complete blood count and white blood cell differential parameters analyzed by Abbott CELL-DYN Sapphire hematology analyzer[J]. Int J Lab Hematol，2009，31（1）：87-96.
[8] 娄坚江. 全血细胞计数标本保存时间对检测结果的影响[J]. 浙江实用医学，2010，15（4）：321-323.
[9] 钱明，郭兆旺，汤艳平，等. 血常规标本保存时间对测定结果的影响[J]. 中国实用医药，2011，6（20）：357-358.
[10] Piva E，Brugnara C，Chiandetti L，et al. Automated reticulocyte counting：state of the art and clinical applications in the evaluation of erythropoiesis[J]. Clin Chem Lab Med， 2010，48（10）：1369-1380.
[11] Sirdah MM，Abushahla AK，Al-Sarraj HA. Effect of the addition of the antioxidant taurine on the complete blood count of whole blood stored at room temperature and at 4℃ for up to 7 days[J]. Rev Bras Hematol Hemoter， 2013， 35（1）：44-51.
（收稿日期：2015-03-03）
[关键词] 保存时间；血细胞分析仪；细胞分类
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）13-0094-02
[Abstract] Objective To investigate and analyze the influence of whole blood specimens storage time in blood routine examination parameters. Methods All 40 healthy cases were randomly selected， and all the whole blood specimens were stored at 4℃. 1， 2， 3， 5 and 7 days after the blood sampling， the specimens were tested by Sysmex-XS1000 automated hematology analyzer， and statistical analysis was conducted. Results The specimens were kept in refrigerator at 4℃， for 7 days， WBC， RBC， Hb， MCH， PLT， RDW-CV， N， L， M and E could still maintain stable. There was no significant difference （P>0.05） in comparing all the measurement data and the fresh sample measurement data. HCT， MCV， RDW-SD and B% gradually increased after 3 days， and MCHC gradually decreased. The difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Complete blood count specimens can store at 4℃ for 3 days. The results are relatively stable， and parts of main analysis indicators results can still remain stable for a week.
[Key words] Storage time； Hematology analyzer； Cell classification
血细胞分析仪已在各级医院临床检验室普遍应用，血常规的准确检验数据可为判断病情起非常重要的作用，国际血液学标准委员会（ICSH）推荐标本应在采集后4 h内检测。随着医疗检验标本质量的改进及对可能有争议的标本进行复查，其中标本放置的时间是一个重要环节，对实验结果的准确性有一定影响[1]。本文应用Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪，对不同放置时间的标本进行了对比测定，以探讨检测标本的时效性对该仪器测定结果的影响。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选择2013～2014年四川省人民医院的健康体检者40例为研究对象，其中男20例，女20例。年龄14～62岁，平均39.42岁。真空采集静脉血2 mL，EDTA-2K抗凝，颠倒混匀。标本均无溶血及凝块。
1.2仪器和试剂
Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪，试剂及质控品均为厂家配套。
1.3方法
按全血标本检测操作规程，将40人份全血标本颠倒混匀后依次在Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪自动进样模式下测定，记录血细胞分析各参数数据。测定完毕后立即保存在4℃冰箱。分别在2、3、5、7 d的同一时间再次检测，检测标本前半小时从冰箱取出放至室温。以第1天新鲜标本结果作为对照。
1.4 统计学分析
使用SPSS17.0软件作统计学处理，进行重复测量资料的方差分析方法，各不同时间点测定结果用（x±s）表示。以第1天新鲜标本结果为对照，各不同时间点测定结果与之相比较，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
40例血常规标本每天测定的其中15项参数测定结果见表1，经过7 d的低温保存后，其中WBC、RBC、Hb、PLT、MCH、RDW-CV结果稳定，测得数据与新鲜标本结果差异无统计学意义（P>0.05）。白细胞分类NEUT、LYMPH、MONO、EO 7 d内低温保存后的结果与新鲜标本结果差异也无统计学意义（P>0.05）。而HCT、MCV、RDW-SD所测结果在第3天后结果逐渐升高，MCHC逐渐降低，差异有统计学意义（P<0.05）。BASO%在低温保存后的结果与新鲜标本结果差异有统计学意义（P<0.01）。
3 讨论 准确的血常规检验数据不仅是诊断各种血液病的主要依据，还对其他系统疾病的诊断和鉴别诊断起非常重要的作用。但血常规的测定也受标本采集是否顺利、抗凝剂的比例、温度、时间、方法学等多方面因素的影响[2]，ICSH推荐标本在采集后应4 h内完成检测，然而有时候标本可能超过1 d或更长时间才能检测，仪器说明书和文献报道则没有明确的说明标本检测的时效性，通常认为血常规标本在室温下保存24 h到48 h不影响检测结果[3，4]。本实验室针对标本保存的标准化操作程序规定，对已完成检测的血常规标本4℃冰箱保存1周，以备复查。
本研究中我们通过对40例标本的时效性分析结果发现，血标本在4℃保存，WBC、RBC、Hb、MCH、PLT、RDW-CV在7 d内，各项结果相对于初次测定值均变化不大（P>0.05），随着时间的增加无趋势性变化，结果比较稳定，尤以RBC和Hb稳定性最好，且RBC、Hb、MCH至少在7d内结果稳定，与Gene等[5]的结论相一致；其次为PLT和WBC，虽然个别标本的PLT结果随着时间推移下降明显，可能在低温保存时使部分细胞黏附、聚集、激活，致使PLT 聚集成较大颗粒，仪器难以识别所致。白细胞分类中NEUT、LYMPH、MONO、EO在低温保存7 d后的结果与新鲜标本差异无统计学意义（P>0.05），这与相关文献报道一致[6，7]。HCT、MCV、MCHC、RDW-SD在7 d内结果较初次测定值的变化明显（P<0.05），且逐渐升高；BASO%在低温保存后结果与新鲜标本结果差异有显著性意义（P<0.01），随着时间的延长，HCT、MCV测定值逐渐增大，MCHC反而逐渐降低，这与娄坚江等[8，9]的报道一致，可能是随着时间的延长，血浆中的葡萄糖减少，维持红细胞形态所必需的各种泵的运转因能量供应中断而停止，无法维持红细胞自身的正常渗透压或形态，导致红细胞的体积随着葡萄糖的消耗殆尽而增大，引起MCV明显增大，MCHC逐渐降低。
在日常检验工作中，最好将血标本尽快检测，如遇特殊原因未能及时检测的应4℃冷藏48～72 h，其检测结果基本可满足血液常规需要，同时也应该考虑到红细胞、血小板相关参数及白细胞分类的细微变化[10，11]，在检验结果中及时解释并标注清楚，以免影响检测结果。本研究基于用Sysmex-XS1000全自动血细胞分析仪对于成年健康体检者的检测，而对于婴幼儿和血液系统疾病如白血病、贫血、红细胞增多症、血小板减少症及增多症等患者，以及用其他仪器的21项血常规参数的变化是否有差异，还需要我们更详细深入的研究。
[参考文献]
[1] 彭黎明，王兰兰. 检验医学自动化及临床应用[M]. 北京：人民卫生出版社，2003：243.
[2] 何敏，熬小梅，李向饶. 标本保存时间和温度对血细胞分析仪测定结果的影响[J]. 中国临床医学，2006，7（ 9）： 17-18.
[3] Sysmex Operator，s Manual.XS-1000 Main Unit[M]. Japan：Sysmex Corporation.
[4] Davies JI，Smyth M S，Martin JH. Automat edreticulocyte counting：Evaluation of the coulter STKS hematology analyzer reticulocyte counting function[J]. Clin Lab Haematology，1997，9（2）：89-92.
[5] Gene L，Gulati PD，Lawrence J，et al. Changes in automated complete blood cell count and differential leukocyte count results induced by storage of blood at room temperature[J]. Arch Pathol Lab Med，2002，126（3）：336-342.
[6] Sirdah MM，Abushahla AK，Al-Sarraj HA，et al. Effect of the addition of the antioxidant taurine on the complete blood count of whole blood stored at room temperature and at 4℃ for up to 7 days[J]. Hematol Hemoter， 2013， 35（1）：44-51.
[7] Hedberg P，Lehto T. Aging stability of complete blood count and white blood cell differential parameters analyzed by Abbott CELL-DYN Sapphire hematology analyzer[J]. Int J Lab Hematol，2009，31（1）：87-96.
[8] 娄坚江. 全血细胞计数标本保存时间对检测结果的影响[J]. 浙江实用医学，2010，15（4）：321-323.
[9] 钱明，郭兆旺，汤艳平，等. 血常规标本保存时间对测定结果的影响[J]. 中国实用医药，2011，6（20）：357-358.
[10] Piva E，Brugnara C，Chiandetti L，et al. Automated reticulocyte counting：state of the art and clinical applications in the evaluation of erythropoiesis[J]. Clin Chem Lab Med， 2010，48（10）：1369-1380.
[11] Sirdah MM，Abushahla AK，Al-Sarraj HA. Effect of the addition of the antioxidant taurine on the complete blood count of whole blood stored at room temperature and at 4℃ for up to 7 days[J]. Rev Bras Hematol Hemoter， 2013， 35（1）：44-51.
（收稿日期：2015-03-03）