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摘要：目的： 探讨空气微生物的检验措施。方法： 通过实验室的科学检验，掌握空气微生物的属性与致病因素，总结出系统的检验措施和相应的控制方法。结论： 科学准确的掌握空气微生物的检验措施，把握致病规律，才能为有效的控制和预防相关疾病提供可靠的依据。
关键词：空气微生物；检验；细菌
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602（2014）01-0188-01
存在于空气中的微生物。是主要的空中浮游生物。对较干燥环境和对紫外线具有抗性的种类，主要有附着于尘埃上的从地面飞起的球菌属（包括八叠球菌属在内的好氧菌）；形成孢子的好氧性杆菌（如枯草芽孢杆菌）；色串孢属等野生酵母；青霉等霉菌的孢子等。下面将空气微生物的检验技术分析汇报如下。
1各类微生物的基本检验程序
空气中微生物检验主要分为细菌、病毒、真菌、立克次体类的检验。
2几种常见空气微生物采样
方法及细菌菌落总数测定
2.1Andersen采样器
2.1.1构造： 新型采样器是Andersenl958年研制而成由采样胶体、流量剂、压力计和抽气泵组成。
2.1.2特点： ①采集空气微粒范围宽；
②采样效率高；
③生物失活率低；
④敏感性高；
⑤操作简便；
⑥应用范围广，常用于空气致病微生物的采集。
2.1.3操作步骤：①消毒
采样器的消毒方法有3种：75%酒精；高压蒸气灭菌：用于采样头的消毒；环氧乙烷消毒。
②有关参数设定：
流量，28.3L/min，固定流量抽吸空气，流量准确与否是该采样器操作的关键所在，流量不准或未经校正的采样器不可使用。真空度，0.1354kPa。若真空度不够，可影响气流速度，从而影响采样效率。
③平皿制备
采样用培养基平皿要提前一天准备好，每个样品需6个平皿，预置37℃18～24h培养，无细菌生长，即可用于采样。
④采样高度
根据采样目的而定，一般置于人的呼吸带高度，大约1.0～1.5m左右，并且采样人员应远离采样头。采集时间要根据现场微生物污染程度而定。
⑤培养
打开采样器，盖上平皿盖。细菌培养37℃培养48h，真菌培养28℃培养72h。
⑥菌落计数：计数方法可以采用分段计数及菌落计数器进行。一般以菌落形成单位表示。一般每个平皿最多不超过250cfu。
2.2THK-201型采样器
2.2.1构造： THK-201型采样器是在JWL型采样器基础上改进而成。基本构成包括：采样头、流量计、抽气泵、可调电路。
2.2.2特性： ①采样头的筛孔（隙）为可调式；
②捕获率高；
③适应范围广，在不同环境通过调节筛孔来采集不同大小的微粒提高了其应用范围，可采集细菌、真菌、病毒、立克次体、原生动物、植物、花粉、藻类等，适用于环保、生物工程、医疗卫生、卫生防疫、工农牧业、食品加工业等；
④功能齐全。
2.2.3操作步骤： ①平板制备
制作平皿培养基应注意厚薄均匀，保证无菌。琼脂浓度要较其他采样方法略高一点（≤2.4%），过高过低均会影响采样效率。
②仪器相关参数
电源，工作电压：220V；转速，选档，定时范围；流量，5～35L/min；采样筛头，最小狭缝≤20μm，最大500μm。根据需要分级调节，使用时要对环境中微生物有一个大略估计，以便进行筛孔调节。
③培养
方法和时间同Andersen采样器。
2.3自然沉降采样法
2.3.1特点：①简便易操作，不需特殊采样器，只需采样的平皿培养基。
②能反映沉降细菌的数量，特别是医院的烧伤外科、手术室、人流室等一些相对空气流动性不大，但空气中微生物在静止时下落到物表，造成污染，更严重的造成院内感染。
③可用于粗略反映空气中细菌污染状况。
④此法不足之处：用下落菌推算空气中悬浮菌量，有推理上的错误。比较公认的是奥梅梁斯基的公式来推算浓度，他认为在100cm2培养基表面，5min内能落下约10L空气中所含菌量。标准细菌种类较少。采样条件要保证无菌状态，十分难以控制[1]。
2.3.2自然沉降法采样的操作步骤：①培养基的制备：
一般采用9cm直径平皿制作。细菌用普通营养琼脂，真菌用沙堡培养基或察氏培养基。制备好的平板应置35～37℃预培养18～24h，选无菌生长的平皿用于采样。
②选择检测点：
室内面积≤30m2沿一对角线上取三点，即中间一点两端各距墙1m处各取一点，室内面积>30m2，设东、南、西、北、中5个点，各点均距墙1m，采样高度0.8～1.5m。若使用采样器监测时，采样器应距地面高度33cm，离门窗及人员流动1m以上，且采样器与采样者要保持一定距离（50cm），防止采样者自身细菌被吸入采样器而影响检测结果。室外采样要根据该地区气象、交通、大气污染程度、建筑物布局、有无树林等进行合理选点，选点数不定，每个点采样高度1.5m以上。可以一个点同时放置两个平皿，以平均菌落数代表该点的菌落数。
③暴露平血时间：
原则是保证客观反映采样点情况，采样后平皿中生长的菌落数要便于准确计数，太多以至于无法计数将造成较大偏差，一般洁净室内暴皿时间可在5～30min，一般室内较洁净的地方，多采用暴皿5min即可。
④培养：
细菌样品35～37℃培养48h，真菌样品置28℃培养72h。
2.4JWL型采样器
2.4.1结构： 由采样头、流量计、抽气泵、电源电路4部分构成。
2.4.2特点： ①采样的平皿可以转动，使平皿上菌落均匀分布；
②交一直流两用，应用简便；
③自动按时采样，可采细菌和病毒；
④但对空气中占大多数的粒子捕获率低。
2.4.3操作步骤： ①平皿制备
细菌用普通琼脂，真菌用选择性培养基（如察氏培养基）。平皿要求厚薄均匀，表面水平，加培养基量4.5ml，琼脂浓度1.8%～2.4%为宜。
②采样相关参数的调整
电源，220V，备24V直流蓄电池；流量调节，25～30L/min；空气压力，采样系统98～245kPa，电气系统为86.6～106.6kPa；采样时间，一次不得超过15min；采样高度，1.0～1.5m[2]。
③培养
同Andersen采样法。
参考文献
[1]吴冬柠，韦彩娇，余波.百色城区高校大学生宿舍空气微生物的监测与分析.右江民族医学院学报，2013，35（05）：667-667.
[2]谈书勤，胡贵方，顾大勇.空气微生物气溶胶富集、检测与空气消毒技术研究进展.中国消毒学杂志，2012，29（12）：1115-1120.
关键词：空气微生物；检验；细菌
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602（2014）01-0188-01
存在于空气中的微生物。是主要的空中浮游生物。对较干燥环境和对紫外线具有抗性的种类，主要有附着于尘埃上的从地面飞起的球菌属（包括八叠球菌属在内的好氧菌）；形成孢子的好氧性杆菌（如枯草芽孢杆菌）；色串孢属等野生酵母；青霉等霉菌的孢子等。下面将空气微生物的检验技术分析汇报如下。
1各类微生物的基本检验程序
空气中微生物检验主要分为细菌、病毒、真菌、立克次体类的检验。
2几种常见空气微生物采样
方法及细菌菌落总数测定
2.1Andersen采样器
2.1.1构造： 新型采样器是Andersenl958年研制而成由采样胶体、流量剂、压力计和抽气泵组成。
2.1.2特点： ①采集空气微粒范围宽；
②采样效率高；
③生物失活率低；
④敏感性高；
⑤操作简便；
⑥应用范围广，常用于空气致病微生物的采集。
2.1.3操作步骤：①消毒
采样器的消毒方法有3种：75%酒精；高压蒸气灭菌：用于采样头的消毒；环氧乙烷消毒。
②有关参数设定：
流量，28.3L/min，固定流量抽吸空气，流量准确与否是该采样器操作的关键所在，流量不准或未经校正的采样器不可使用。真空度，0.1354kPa。若真空度不够，可影响气流速度，从而影响采样效率。
③平皿制备
采样用培养基平皿要提前一天准备好，每个样品需6个平皿，预置37℃18～24h培养，无细菌生长，即可用于采样。
④采样高度
根据采样目的而定，一般置于人的呼吸带高度，大约1.0～1.5m左右，并且采样人员应远离采样头。采集时间要根据现场微生物污染程度而定。
⑤培养
打开采样器，盖上平皿盖。细菌培养37℃培养48h，真菌培养28℃培养72h。
⑥菌落计数：计数方法可以采用分段计数及菌落计数器进行。一般以菌落形成单位表示。一般每个平皿最多不超过250cfu。
2.2THK-201型采样器
2.2.1构造： THK-201型采样器是在JWL型采样器基础上改进而成。基本构成包括：采样头、流量计、抽气泵、可调电路。
2.2.2特性： ①采样头的筛孔（隙）为可调式；
②捕获率高；
③适应范围广，在不同环境通过调节筛孔来采集不同大小的微粒提高了其应用范围，可采集细菌、真菌、病毒、立克次体、原生动物、植物、花粉、藻类等，适用于环保、生物工程、医疗卫生、卫生防疫、工农牧业、食品加工业等；
④功能齐全。
2.2.3操作步骤： ①平板制备
制作平皿培养基应注意厚薄均匀，保证无菌。琼脂浓度要较其他采样方法略高一点（≤2.4%），过高过低均会影响采样效率。
②仪器相关参数
电源，工作电压：220V；转速，选档，定时范围；流量，5～35L/min；采样筛头，最小狭缝≤20μm，最大500μm。根据需要分级调节，使用时要对环境中微生物有一个大略估计，以便进行筛孔调节。
③培养
方法和时间同Andersen采样器。
2.3自然沉降采样法
2.3.1特点：①简便易操作，不需特殊采样器，只需采样的平皿培养基。
②能反映沉降细菌的数量，特别是医院的烧伤外科、手术室、人流室等一些相对空气流动性不大，但空气中微生物在静止时下落到物表，造成污染，更严重的造成院内感染。
③可用于粗略反映空气中细菌污染状况。
④此法不足之处：用下落菌推算空气中悬浮菌量，有推理上的错误。比较公认的是奥梅梁斯基的公式来推算浓度，他认为在100cm2培养基表面，5min内能落下约10L空气中所含菌量。标准细菌种类较少。采样条件要保证无菌状态，十分难以控制[1]。
2.3.2自然沉降法采样的操作步骤：①培养基的制备：
一般采用9cm直径平皿制作。细菌用普通营养琼脂，真菌用沙堡培养基或察氏培养基。制备好的平板应置35～37℃预培养18～24h，选无菌生长的平皿用于采样。
②选择检测点：
室内面积≤30m2沿一对角线上取三点，即中间一点两端各距墙1m处各取一点，室内面积>30m2，设东、南、西、北、中5个点，各点均距墙1m，采样高度0.8～1.5m。若使用采样器监测时，采样器应距地面高度33cm，离门窗及人员流动1m以上，且采样器与采样者要保持一定距离（50cm），防止采样者自身细菌被吸入采样器而影响检测结果。室外采样要根据该地区气象、交通、大气污染程度、建筑物布局、有无树林等进行合理选点，选点数不定，每个点采样高度1.5m以上。可以一个点同时放置两个平皿，以平均菌落数代表该点的菌落数。
③暴露平血时间：
原则是保证客观反映采样点情况，采样后平皿中生长的菌落数要便于准确计数，太多以至于无法计数将造成较大偏差，一般洁净室内暴皿时间可在5～30min，一般室内较洁净的地方，多采用暴皿5min即可。
④培养：
细菌样品35～37℃培养48h，真菌样品置28℃培养72h。
2.4JWL型采样器
2.4.1结构： 由采样头、流量计、抽气泵、电源电路4部分构成。
2.4.2特点： ①采样的平皿可以转动，使平皿上菌落均匀分布；
②交一直流两用，应用简便；
③自动按时采样，可采细菌和病毒；
④但对空气中占大多数的粒子捕获率低。
2.4.3操作步骤： ①平皿制备
细菌用普通琼脂，真菌用选择性培养基（如察氏培养基）。平皿要求厚薄均匀，表面水平，加培养基量4.5ml，琼脂浓度1.8%～2.4%为宜。
②采样相关参数的调整
电源，220V，备24V直流蓄电池；流量调节，25～30L/min；空气压力，采样系统98～245kPa，电气系统为86.6～106.6kPa；采样时间，一次不得超过15min；采样高度，1.0～1.5m[2]。
③培养
同Andersen采样法。
参考文献
[1]吴冬柠，韦彩娇，余波.百色城区高校大学生宿舍空气微生物的监测与分析.右江民族医学院学报，2013，35（05）：667-667.
[2]谈书勤，胡贵方，顾大勇.空气微生物气溶胶富集、检测与空气消毒技术研究进展.中国消毒学杂志，2012，29（12）：1115-1120.