VEGFA基因重组真核表达载体的构建与表达

来源 :安徽医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhuhaiyongjiewang

【摘要】

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目的构建VEGFA基因重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,并检测其在人胚胎肾细胞（HEK293T）中的表达。方法以人脐血单核细胞的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增VEGFA基因,并将其定向插入真

【作者】

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吴勇刘学刚郭嘉诚李慧敏丁周志王亚明宋伟徐家丽

【机构】

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蚌埠医学院第一附属医院儿科,蚌埠医学院第一附属医院心胸外科,蚌埠医学院第一附属医院超声心动图

【出处】

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安徽医药

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

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血管内皮生长因子A 基因遗传载体 vascular endothelial growth factor A gene genetic vectors

【基金项目】

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安徽省自然科学基金面上项目（No 11040606M198）

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目的构建VEGFA基因重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,并检测其在人胚胎肾细胞（HEK293T）中的表达。方法以人脐血单核细胞的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增VEGFA基因,并将其定向插入真核表达载体pEGFP-Nl中,构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA。经限制性核酸内切酶BglII和SalI酶切和DNA测序鉴定后,用脂质体法将pEGFP-VEGFA转染HEK293T细胞,转染后24 h和48 h采用荧光显微镜观察pEGFP-VEGFA的表达。结果 pEGFP-VEGFA被双酶切为4

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