京大戟对斑马鱼胚胎血管生成的影响

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目的:采用活性导向方法寻找京大戟提取物中具有抗血管生成作用的有效部位.方法:以血管荧光标记的斑马鱼作为实验模型动物,分别使用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇为提取溶剂,按序依次回流提取,得到京大戟的不同极性提取部位,处理受精后6 h的斑马鱼胚胎,药物作用至72 h时观察斑马鱼胚胎背部节间血管数(intersegment vessels,ISV)的生成情况.并选取活性较好的极性提取部位,使用硅胶柱层析进一步分离纯化并观察其不同纯化部位的活性.结果:京大戟二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇各提取部位均可引起不同程度的斑马鱼节间血管残缺或缺失,且其效果呈浓度依赖性.综合毒性和活性考虑,选取甲醇部位进行进一步纯化,其中20%甲醇、80%甲醇洗脱部位对斑马鱼节间血管的生成有抑制作用,且抑制效果呈浓度依赖性.结论:京大戟甲醇提取部位经柱层析纯化后,20%、80%甲醇洗脱部位对斑马鱼血管新生有明显抑制作用,且其抑制作用较甲醇提取部位更强.后续可进一步追踪分析其有效成分.
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