【摘 要】
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为了获得高产反式-4-羟脯氨酸的菌株,基于大肠杆菌的代谢网络模型的指导,以大肠杆菌E.coli BL21（DE3）Δput A为出发菌株,通过基因敲除技术成功敲除arg B基因,阻断L-脯氨酸合成
【基金项目】
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国家自然科学基金（30970058）,江苏省自然科学基.金（BK2012554）,工业生物技术教育部重点实验室（江南大学）开放课题基金（KLIB-ZR200801）
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为了获得高产反式-4-羟脯氨酸的菌株,基于大肠杆菌的代谢网络模型的指导,以大肠杆菌E.coli BL21（DE3）Δput A为出发菌株,通过基因敲除技术成功敲除arg B基因,阻断L-脯氨酸合成的前体物L-谷氨酸的分支代谢途径,增加L-脯氨酸合成的代谢流,构建了精氨酸缺陷型菌株E.coli BL21（DE3）Δput AΔarg B。同时转入表达质粒p UC19-pro B2A-Ptrp2-hyp,该质粒含有突变基因pro B2,该突变基因所编码的谷氨酸激酶受L-脯氨酸的反馈抑制作用显著降低。摇瓶发酵结
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