春兰AGAMOUS同源基因的克隆及表达分析

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为深入探索春兰(Cymbidium goe ringii)中C类MADS-box基因参与春兰花器官发育调控的分子机理,用同源克隆的方法从春兰花芽中分离出两个C类MADS-box基因CygoAG1与CygoAG2.在分析其序列结构的基础上,分别检测2者在春兰不同花器官中的表达差异.序列结构分析表明:CygoAG1序列全长为831bp,包含702bp完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码233个氨基酸和1个终止密码子;CygoAG2基因cDNA序列全长996bp,包含705bp完整开放阅读框,编码234个氨基酸和1个终止密码子,2个基因编码的转录因子均包含保守的MADS、K-box结构域和AG基序.分子系统发生与进化树重建结果显示:春兰CygoAG1与CygoAG2与拟南芥MADS-box基因家族中AG(AGAMOUS)基因的同源性最高.实时荧光定量分析结果表明,春兰CygoAG1基因只在花粉团、合蕊柱和子房中表达,在其它花器官及营养器官叶片中不表达,其在子房中的表达量最高.CygoA G2基因在春兰的花器官如萼片、花瓣、唇瓣、花粉团、合蕊柱和子房中均有表达,但在营养器官叶片中不表达,其在合蕊柱(雌雄蕊合生结构)中的表达量最高.CygoAG1和CygoAG2基因在春兰花器官中的表达模式呈现一定的差异.
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