【摘 要】
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目的 探讨大脑细胞质RNA 1(BCYRN1)对大鼠哮喘病模型中气管平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响.方法 取雄性SD大鼠20只按随机数字法分为对照组和哮喘组各10只.哮喘组利用卵清
【机 构】
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450003,郑州大学人民医院呼吸科
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目的 探讨大脑细胞质RNA 1(BCYRN1)对大鼠哮喘病模型中气管平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响.方法 取雄性SD大鼠20只按随机数字法分为对照组和哮喘组各10只.哮喘组利用卵清蛋白(OVA)构建大鼠慢性哮喘模型,从大鼠气管组织中分离ASMCs,实时荧光定量PCR检测BCYRN1的mRNA水平.ASMCs转染Ad-BCYRN1,2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺苯基)-2H-四唑(WST-1)法和实时细胞分析仪实验检测ASMCs的增殖变化,Transwell迁移实验检测ASMCs的迁移能力变化.用血小板衍生的生长因子BB(PDGF-BB)处理ASMCs以诱导其增殖,荧光定量PCR检测BCYRN1的mRNA水平;进一步细胞转染si-BCYRN1,检测ASMCs增殖和迁移能力变化.为检测BCYRN1下调对大鼠呼吸系统吸气和呼气阻力的影响,另取雄性SD大鼠40只按随机数字法分为正常组(A组)、致敏+ Ad-GFP组(B组)、致敏+Ad-SM22d-si-BCYRN1组(C组)和正常+ Ad-SM22α-si-BCYRN1组(D组)各10只.B、C、D组大鼠用鼻喷雾剂将相应腺病毒载体传递至肺后,B、C组的大鼠用OVA处理,A、D组大鼠则用等体积的生理盐水处理.在最后一次用OVA或生理盐水处理24 h后,各组大鼠气管插管,连接呼吸机.静脉注射乙酰甲胆碱,用气管乙酰甲胆碱反应评估各组大鼠呼吸系统吸气和呼气阻力变化.结果 哮喘组ASMCs中BCYRN1相对表达水平显著高于对照组(3.60±0.45比1.00);PDGF-BB处理的ASMCs中BCYRN1相对表达水平也显著高于对照组(3.53±0.35比1.00)(均P＜0.01).ASMCs转染Ad-BCYRN1后,BCYRN1表达显著增加;且转染Ad-BCYRN1组中细胞活力及细胞增殖率分别是对照组的1.75倍和1.47倍,迁移率是对照组的2.42倍(均P＜0.01).抑制BCYRN1的表达逆转PDGF-BB诱导的ASMCs增殖率和迁移上升.PDGF-BB处理的细胞增殖率和迁移细胞数均显著大于转染si-BCYRN1后的细胞[(4.87±0.21)％比(3.63 ±0.21)％和80.00±5.00比25.33±2.52,均P＜0.01)].下调BCYRN1表达降低大鼠吸气阻力和呼气阻力;当乙酰甲胆碱浓度达1 mg/kg时,A、B、C、D组吸气阻力分别为(8.27±0.21)、(25.40 ±0.56)、(12.07 ±0.67)、(8.40±0.46) cmH2O·s·ml-1,呼气阻力分别为(13.30±0.56)、(38.37±1.33)、(16.40 ±0.56)、(13.40±0.46) cmH2O·s·ml-1(均P＜0.01).结论 过表达BCYRN1促进大鼠哮喘模型气管平滑肌细胞增殖和迁移.
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