【摘 要】
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目的 探讨NLRP3上调主动脉瓣膜间质细胞(VICs)的骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达,在钙化性主动脉瓣膜疾病(CAVD)发生发展过程中的作用.方法 使用免疫组织化学染色对比不同钙化
【机 构】
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200000 上海市 上海交通大学大学医学院;200000 上海市 上海交通大学附属第一人民医院心脏及大血管外科
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目的 探讨NLRP3上调主动脉瓣膜间质细胞(VICs)的骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达,在钙化性主动脉瓣膜疾病(CAVD)发生发展过程中的作用.方法 使用免疫组织化学染色对比不同钙化程度区域NLRP3的表达情况.体外培养VICs后,以不同浓度NLRP3(0、50、100、200 ng/ml)干预48h,使用PCR和蛋白印迹法检测OPN的表达;以NLRP3 100 ng/mL分别干预VICs 48h、72h、96h、120h,使用PCR和蛋白印迹法检测OPN的表达;采用OPN靶向小干扰RNA(OPN siRNA)转染VICs敲低OPN,PCR检测OPN的表达;以NLRP3的最适浓度(100 ng/mL)干预OPN敲低的VICs 120 h,使用茜素红染色观察VICs的钙化情况.结果 NLRP3在严重钙化组织区域高表达.不同浓度NLRP3干预VICs均可使OPN表达增加,以100 ng/ml浓度效果最佳.且相同浓度NLRP3干预VICs增加OP的表达呈时间依赖性.OPN siRNA组与对照组比较可有效敲低OPN的表达.与对照组比较,NLRP3+OPN siRNA组VICs的钙化程度明显减少.结论 NLRP3可刺激VICs表达OPN,从而促进VICs钙化并参与CAVD的发生发展.
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