【摘 要】
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目的 构建纳米抗体噬菌体展示库，筛选抗鼠疫菌中和抗体，为鼠疫防治药物研制奠定基础。方法 重组鼠疫菌保护性抗原V蛋白免疫双峰驼，分离外周血单核细胞，提取RNA,构建纳米抗体噬菌体展示库。以V蛋白为抗原对抗体库进行3轮固相筛选，挑选单克隆phage-ELISA鉴定，然后将富集的纳米抗体进行表达、纯化及评价。结果 成功构建了库容量为1.9×10~8的抗鼠疫菌V蛋白纳米抗体噬菌体展示库。经过3轮筛选，获得
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目的 构建纳米抗体噬菌体展示库，筛选抗鼠疫菌中和抗体，为鼠疫防治药物研制奠定基础。方法 重组鼠疫菌保护性抗原V蛋白免疫双峰驼，分离外周血单核细胞，提取RNA,构建纳米抗体噬菌体展示库。以V蛋白为抗原对抗体库进行3轮固相筛选，挑选单克隆phage-ELISA鉴定，然后将富集的纳米抗体进行表达、纯化及评价。结果 成功构建了库容量为1.9×10~8的抗鼠疫菌V蛋白纳米抗体噬菌体展示库。经过3轮筛选，获得8种抗体序列，表达和纯化后经ELISA检测，8株纳米抗体针对鼠疫菌V蛋白特异性良好且结合活性高。动物实验表明其中一株纳米抗体VHH-hFc6对鼠疫菌201株气溶胶攻击的保护率为33%。结论 成功构建了抗鼠疫菌保护性抗原V蛋白的纳米抗体噬菌体展示库，筛选出8株抗V蛋白特异性纳米抗体，其中一株具有良好的中和活性。
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