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摘要[目的]研究从原料茶叶鲜叶到青砖茶的生产过程中，茶多糖含量的变化。[方法]从青砖茶生产加工过程着手，将茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶3种干燥样品经80%乙醇回流除去杂质后用水提取茶多糖，蒽酮-硫酸法比色测定。用精制茶多糖测得茶多糖对葡萄糖的换算因子，分别对茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶中茶多糖的含量进行了测定，并根据相关文献分析茶多糖含量差异的原因。[结果]研究表明，此测定方法简便，茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶中茶多糖的含量分别为（4.136±0.139）%、（4.879±0.131）%、（7.739±0.127）%。[结论]茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶中茶多糖含量的差异与绿毛茶、青砖茶的加工工艺有关。
关键词茶叶；茶多糖；加工工艺
中图分类号S571文献标识码A文章编号0517-6611（2014）21-07198-01
Analysis on the Contents of Tea Po1ysaccharides from Fresh Leaves to Changshengchuan Hubei Green Brick Tea
HE Jiangang， LI Tao et al（Changshengchuan Hubei Green Brick Tea Institute， Yichang， Hubei 443002； College of Biological and Pharmaceutical Sciences， China Three Gorges University， Yichang， Hubei 443002）
Abstract[Objective] To study the variation of tea po1ysaccharide content in production process of green brick tea. [Method] The fresh leaves， green primary tea and green brick tea were removed by back flowing with 80% ethanol. The contents of tea po1ysaccharides were extracted with water in these tea samples and measured by anthroneH2SO4 colorimetry. The conversion factor of tea po1ysaccharides to glucose was determined by using pure tea po1ysaccharides. [Result] The results showed that the method is simple. The contents of tea po1ysaccharides from fresh leaves， green primary tea and green brick tea are （4.136±0.139）%， （4.879±0.131）%， （7.739±0.127）% respectively. [Conclusion] The differences of tea po1ysaccharide content in fresh leaves， green primary tea and green brick tea are related with processing technique.
Key wordsTea； Tea po1ysaccharides； Processing technology
基金项目三峡大学基金项目（SDHZ2013066）；宜昌市科技局项目（A051172）。
作者简介何建刚（1973- ），男，湖北咸宁人，高级经济师，从事农业经济研究。*通讯作者，副教授，博士，从事茶叶化学研究。
收稿日期20140605茶多糖（TPS）是水溶性复合多糖，其分子量为1×104～5×104，主要成分有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、核糖等。茶多糖是一类具有生理活性的大分子天然产物，具有降血糖、抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗凝血、抗血栓、增强机体免疫功能、防辐射、降血压及保护心血管等多方面生理活性[1-4]，茶多糖及其制品具有广泛的开发应用前景。
黑茶属后发酵茶，是我国特有的茶类。其生产始于明代，历史悠久，茶销量大。湖北青砖茶属于黑茶，茶叶鲜叶经杀青、揉捻、渥堆、晒干而制成[1]。湖北五峰位于武陵山区，生态良好，森林覆盖率达到81%，境内具有优质的高山茶叶资源[5-6]。“长盛川”湖北青砖茶是具有600多年历史的青砖茶老字号，目前鑫鼎生物科技有限公司采用生物医药的标准来打造“长盛川”青砖茶。笔者从青砖茶加工过程着手，对茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶中茶多糖的含量进行了测定，根据相关文献分析茶多糖含量差异的原因。
1材料与方法
1.1材料茶叶鲜叶采自湖北五峰茶叶基地，绿毛茶为上述茶叶鲜叶加工而成，“长盛川”湖北青砖茶为上述绿毛茶根据“长盛川”湖北青砖茶传统工艺结合生物医药技术加工而成。主要试剂：试验中所用化学试剂均为分析纯。蒽酮-硫酸溶液：0.667 1 g蒽酮溶于200 ml浓硫酸，置于棕色瓶中，4 ℃冷藏备用。主要仪器：721分光光度计，上海第三分析仪器厂；台式离心机，上海安亭科学仪器厂；冷冻真空干燥箱，上海离心机机械所。
1.2方法
1.2.1茶叶多糖的提取与精制。分别称取40目干燥鲜叶、绿毛茶、青砖茶粉末各10.000 0 g，放于索氏提取器中，150 ml石油醚（沸程60～90 ℃）100 ℃水浴回流1 h，过滤，80%乙醇洗涤2次（每次10 ml），加入200 ml 80%乙醇90 ℃水浴回流1 h，重复2次。滤布过滤，滤渣加400 ml蒸馏水，沸水浴回流提取1 h，重复1次，合并滤液，离心分离，真空浓缩（60 ℃，0.10 MPa）至20 ml。采用Sevage法除去蛋白质。磁力搅拌获得流动蒸馏水，用此流动蒸馏水透析3次，每次12 h，透析液中加入无水乙醇使乙醇浓度达80%，4 ℃醇沉12 h，离心分离，沉淀分别用无水乙醇、丙酮、乙醚各洗涤2次，真空干燥（60 ℃，0.10 MPa），得精制茶多糖。平行完成5次试验，称重得精制茶多糖质量[7-8]。 1.2.2葡萄糖标准曲线的绘制。称取无水葡萄糖对照品0250 0 g，配成1000 mg/ml的葡萄糖水溶液。移取标准溶液1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、15.00 ml分别置100 ml容量瓶，蒸馏水定容。分别移取上述标准溶液各1.00 ml，置于10 ml具塞试管中，以1.00 ml蒸馏水为空白，每管再加4.00 ml蒽酮-硫酸试液，立即摇匀，冰水浴冷却。沸水浴中加热7 min，流动自来水冷却至室温，10 min后，于波长620 nm处测吸光度（A），以吸光度对葡萄糖浓度作线性回归方程[7-8]。
1.2.3换算因子的测定。精确称取精制茶多糖10.0 mg，蒸馏水溶解，定容于25 ml容量瓶，90 ℃水浴加热，制得茶多糖贮备液。蒽酮-硫酸法测定其吸光度，由线性回归方程求出茶多糖贮备液中葡萄糖浓度，按式（1）计算换算因子[7-8]。
3讨论
研究得出，茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶的茶多糖含量具有显著性差异，茶多糖含量逐渐增加。在绿毛茶加工过程中，在鲜叶摊放时，原果胶酶能把原果胶（不溶于水）水解成水溶性果胶；在杀青过程中，在热的作用下，H+浓度逐渐增大，能部分水解原果胶从而形成水溶性果胶，水溶性果胶属于茶多糖中一大类，所以在绿毛茶的制备过程中，茶多糖含量逐渐增加[1-3]。在青砖茶加工过程中，绿毛茶渥堆发酵，由于微生物的大量繁殖，微生物能分泌大量酶类，包括纤维素酶，纤维素酶可分解纤维素形成可溶性糖类，包括单糖、双糖、茶多糖等[1-3]。鑫鼎生物科技有限公司采用传统工艺结合现代生物医药技术，在青砖茶加工过程中，首先把握好原料茶叶鲜叶的质量，然后杀青、揉捻的精细化，得到品质高的绿毛茶，最后控制好渥堆发酵时间、温度、湿度等因素，可以生产含较多茶多糖的青砖茶。
参考文献
[1] 顾谦，陆锦时，叶宝存.茶叶化学[M].合肥：中国科学技术大学出版社，2002：1-206.
[2] 朱永兴，王岳飞.茶医学研究[M].杭州：浙江大学出版社，2005：137-162.
[3] 屠幼英.茶与健康[M].西安：世界图书出版西安有限公司，2011：1-197.
[4] NIE S P，XIE M Y.A review on the isolation and structure of tea polysaccharides and their bioactivities [J].Food Hydrocolloids，2011，25：144-149.
[5] 陈莉华，李涛，梁亦舟，等.湖北宜昌茶文化、茶叶品质与茶产业的发展[J].安徽农业科学，2012，40（30）：15092-15094.
[6] LI T，YU L J，LI M T，et al.Comparative researches of the quality of green tea in karst area from Yichang，Hubei Province，P.R.China [J].Food Chemistry，2007，103：71-74.
[7] 傅博强，谢明勇，聂少平，等.茶叶中多糖含量的测定[J].食品科学，2001，22（11）：69-73.
[8] 王妍馨，颜仁龙，张小荣，等.峨眉山粗老茶中茶多糖的含量测定[J].时珍国医国药，2009，2（5）：1106-1107.
关键词茶叶；茶多糖；加工工艺
中图分类号S571文献标识码A文章编号0517-6611（2014）21-07198-01
Analysis on the Contents of Tea Po1ysaccharides from Fresh Leaves to Changshengchuan Hubei Green Brick Tea
HE Jiangang， LI Tao et al（Changshengchuan Hubei Green Brick Tea Institute， Yichang， Hubei 443002； College of Biological and Pharmaceutical Sciences， China Three Gorges University， Yichang， Hubei 443002）
Abstract[Objective] To study the variation of tea po1ysaccharide content in production process of green brick tea. [Method] The fresh leaves， green primary tea and green brick tea were removed by back flowing with 80% ethanol. The contents of tea po1ysaccharides were extracted with water in these tea samples and measured by anthroneH2SO4 colorimetry. The conversion factor of tea po1ysaccharides to glucose was determined by using pure tea po1ysaccharides. [Result] The results showed that the method is simple. The contents of tea po1ysaccharides from fresh leaves， green primary tea and green brick tea are （4.136±0.139）%， （4.879±0.131）%， （7.739±0.127）% respectively. [Conclusion] The differences of tea po1ysaccharide content in fresh leaves， green primary tea and green brick tea are related with processing technique.
Key wordsTea； Tea po1ysaccharides； Processing technology
基金项目三峡大学基金项目（SDHZ2013066）；宜昌市科技局项目（A051172）。
作者简介何建刚（1973- ），男，湖北咸宁人，高级经济师，从事农业经济研究。*通讯作者，副教授，博士，从事茶叶化学研究。
收稿日期20140605茶多糖（TPS）是水溶性复合多糖，其分子量为1×104～5×104，主要成分有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、核糖等。茶多糖是一类具有生理活性的大分子天然产物，具有降血糖、抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗凝血、抗血栓、增强机体免疫功能、防辐射、降血压及保护心血管等多方面生理活性[1-4]，茶多糖及其制品具有广泛的开发应用前景。
黑茶属后发酵茶，是我国特有的茶类。其生产始于明代，历史悠久，茶销量大。湖北青砖茶属于黑茶，茶叶鲜叶经杀青、揉捻、渥堆、晒干而制成[1]。湖北五峰位于武陵山区，生态良好，森林覆盖率达到81%，境内具有优质的高山茶叶资源[5-6]。“长盛川”湖北青砖茶是具有600多年历史的青砖茶老字号，目前鑫鼎生物科技有限公司采用生物医药的标准来打造“长盛川”青砖茶。笔者从青砖茶加工过程着手，对茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶中茶多糖的含量进行了测定，根据相关文献分析茶多糖含量差异的原因。
1材料与方法
1.1材料茶叶鲜叶采自湖北五峰茶叶基地，绿毛茶为上述茶叶鲜叶加工而成，“长盛川”湖北青砖茶为上述绿毛茶根据“长盛川”湖北青砖茶传统工艺结合生物医药技术加工而成。主要试剂：试验中所用化学试剂均为分析纯。蒽酮-硫酸溶液：0.667 1 g蒽酮溶于200 ml浓硫酸，置于棕色瓶中，4 ℃冷藏备用。主要仪器：721分光光度计，上海第三分析仪器厂；台式离心机，上海安亭科学仪器厂；冷冻真空干燥箱，上海离心机机械所。
1.2方法
1.2.1茶叶多糖的提取与精制。分别称取40目干燥鲜叶、绿毛茶、青砖茶粉末各10.000 0 g，放于索氏提取器中，150 ml石油醚（沸程60～90 ℃）100 ℃水浴回流1 h，过滤，80%乙醇洗涤2次（每次10 ml），加入200 ml 80%乙醇90 ℃水浴回流1 h，重复2次。滤布过滤，滤渣加400 ml蒸馏水，沸水浴回流提取1 h，重复1次，合并滤液，离心分离，真空浓缩（60 ℃，0.10 MPa）至20 ml。采用Sevage法除去蛋白质。磁力搅拌获得流动蒸馏水，用此流动蒸馏水透析3次，每次12 h，透析液中加入无水乙醇使乙醇浓度达80%，4 ℃醇沉12 h，离心分离，沉淀分别用无水乙醇、丙酮、乙醚各洗涤2次，真空干燥（60 ℃，0.10 MPa），得精制茶多糖。平行完成5次试验，称重得精制茶多糖质量[7-8]。 1.2.2葡萄糖标准曲线的绘制。称取无水葡萄糖对照品0250 0 g，配成1000 mg/ml的葡萄糖水溶液。移取标准溶液1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、15.00 ml分别置100 ml容量瓶，蒸馏水定容。分别移取上述标准溶液各1.00 ml，置于10 ml具塞试管中，以1.00 ml蒸馏水为空白，每管再加4.00 ml蒽酮-硫酸试液，立即摇匀，冰水浴冷却。沸水浴中加热7 min，流动自来水冷却至室温，10 min后，于波长620 nm处测吸光度（A），以吸光度对葡萄糖浓度作线性回归方程[7-8]。
1.2.3换算因子的测定。精确称取精制茶多糖10.0 mg，蒸馏水溶解，定容于25 ml容量瓶，90 ℃水浴加热，制得茶多糖贮备液。蒽酮-硫酸法测定其吸光度，由线性回归方程求出茶多糖贮备液中葡萄糖浓度，按式（1）计算换算因子[7-8]。
3讨论
研究得出，茶叶鲜叶、绿毛茶、青砖茶的茶多糖含量具有显著性差异，茶多糖含量逐渐增加。在绿毛茶加工过程中，在鲜叶摊放时，原果胶酶能把原果胶（不溶于水）水解成水溶性果胶；在杀青过程中，在热的作用下，H+浓度逐渐增大，能部分水解原果胶从而形成水溶性果胶，水溶性果胶属于茶多糖中一大类，所以在绿毛茶的制备过程中，茶多糖含量逐渐增加[1-3]。在青砖茶加工过程中，绿毛茶渥堆发酵，由于微生物的大量繁殖，微生物能分泌大量酶类，包括纤维素酶，纤维素酶可分解纤维素形成可溶性糖类，包括单糖、双糖、茶多糖等[1-3]。鑫鼎生物科技有限公司采用传统工艺结合现代生物医药技术，在青砖茶加工过程中，首先把握好原料茶叶鲜叶的质量，然后杀青、揉捻的精细化，得到品质高的绿毛茶，最后控制好渥堆发酵时间、温度、湿度等因素，可以生产含较多茶多糖的青砖茶。
参考文献
[1] 顾谦，陆锦时，叶宝存.茶叶化学[M].合肥：中国科学技术大学出版社，2002：1-206.
[2] 朱永兴，王岳飞.茶医学研究[M].杭州：浙江大学出版社，2005：137-162.
[3] 屠幼英.茶与健康[M].西安：世界图书出版西安有限公司，2011：1-197.
[4] NIE S P，XIE M Y.A review on the isolation and structure of tea polysaccharides and their bioactivities [J].Food Hydrocolloids，2011，25：144-149.
[5] 陈莉华，李涛，梁亦舟，等.湖北宜昌茶文化、茶叶品质与茶产业的发展[J].安徽农业科学，2012，40（30）：15092-15094.
[6] LI T，YU L J，LI M T，et al.Comparative researches of the quality of green tea in karst area from Yichang，Hubei Province，P.R.China [J].Food Chemistry，2007，103：71-74.
[7] 傅博强，谢明勇，聂少平，等.茶叶中多糖含量的测定[J].食品科学，2001，22（11）：69-73.
[8] 王妍馨，颜仁龙，张小荣，等.峨眉山粗老茶中茶多糖的含量测定[J].时珍国医国药，2009，2（5）：1106-1107.