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摘 要：本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相，检测波长为254nm，流速1.0mL·min-1，柱温：25℃。头孢美唑钠在0.05～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性關系。头孢美唑钠的平均回收率为99.5%，RSD为0.65%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量测定。
关键词：注射用头孢美唑钠；头孢美唑钠；含量
头孢曲松钠为第三代头孢菌素。头孢美唑钠适用于金黄色葡萄球菌、肺炎杆菌、拟杆菌属、大肠埃希菌、变形杆菌属、摩氏摩根菌、普罗威登斯菌属、普雷沃菌属（双路普雷沃菌除外）等所引起的前庭大腺炎、子宫内感染、子宫附件炎、子宫旁组织炎、肺炎、肺脓肿、脓胸、膀胱炎、肾盂肾炎、败血症、慢性呼吸道疾病继发感染、胆囊炎、胆管炎、颌炎等。本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量。
1 仪器与试药
超声波清洗器SCQ？1020 2500W大容量超声波清洗设备（上海声彦超声波仪器有限公司）；Bante210 标准型台式pH计（上海般特仪器有限公司）；SP-1900双光束紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；Flexar液相色谱仪（珀金埃尔默仪器（上海）有限公司）；RephiLe Direct-Pure EDI 10 UV纯水系统（上海乐枫生物科技有限公司）；ULABO 实验室温度控制器（优莱博技术（北京）有限公司）；赛多利斯PM2.5分析天平MSA2.7S-0CE-DM（广州市深华生物技术有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）。头孢美唑钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。磷酸（上海昊化化工有限公司）、四丁基氢氧化铵（永华化学科技（江苏）有限公司）、冰醋酸（德州市富凯化工有限责任公司）、乙腈（永华化学科技（江苏）有限公司）、甲醇（上海昊化化工有限公司）、磷酸二氢铵（德州市富凯化工有限责任公司）、庚烷磺酸钠（德州市富凯化工有限责任公司）、二甲基甲酰胺（永华化学科技（江苏）有限公司）、戊烷磺酸钠（永华化学科技（江苏）有限公司）、磷酸二氢钾（德州市富凯化工有限责任公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按头孢美唑钠峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用头孢美唑钠，精密称取，精密加入流动相30mL，超声提取30分钟，放冷，过滤，滤液转移至50毫升容量瓶内用流动相定容，摇匀，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢美唑钠对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含0.2mg的溶液，作为对照溶液。
2.4 准曲线的制备
制备浓度为0.05、、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，头孢美唑钠对照品在0.05～1.6mg·mL-1范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验
依照2.4项下制备对照品溶液，精密吸取头孢美唑钠对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.77%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批注射用头孢美唑钠样品6份，分别依照2.2项下制备供试品分别测定含量，含量RSD为0.82%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品头孢美唑钠峰面积积分值的RSD为0.81%。结果表明头孢美唑钠至少在6小时内稳定。
2.8 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的头孢美唑钠对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.65%。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定注射用头孢美唑钠三批样品中头孢美唑钠的含量，含量标示量的99.3%、100.2%、99.1%。
3 讨论
分别考察0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5），0.067moloL-1磷酸二氢铵溶液-乙腈-三乙胺（60∶40：0.02），乙腈-0.08%磷酸溶液（20：80），乙腈-甲醇-水（10：5：85）（用磷酸调PH值为3.0），0.1%庚烷磺酸钠溶液（取0.1%的庚烷磺酸钠500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混匀）-乙腈（70∶30），10mmol.L-1戊烷磺酸钠的10mmol.L-1磷酸氢二钾缓冲溶液（以磷酸调节pH值为6.0）-乙腈（95∶5），10mmol.L-1戊烷磺酸钠的10mmol.L-1磷酸氢二钾缓冲溶液（以磷酸调节pH值为6.0）-乙腈（93∶7）不同比例的流动相，结果以0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量测定。注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量应为标示量的95-105%。
参考文献
[1]单红宾，于力，谢红艳，徐成玮，高红，许贵娥，王作江.HPLC法测定头孢菌素类药物中聚合物的含量[J].山东医药工业，2000（4）.
[2]刘英，杨淑先.高效液相色谱法测定注射用头孢曲松钠三唑巴坦钠的含量[J].中国药学杂志，2005（20）.
[3]汤玮珉，薛佩华.头孢曲松钠粉针剂配液的稳定性观察[J].药学服务与研究，2002（3）.
[4]苗奕，刘真业，季小慎，张华峰.高效液相色谱法测定人血清中头孢曲松浓度[J].药物分析杂志，1999（6）.
[5]李军，黄萍，谢元超，于力，单红宾.用HPLC法测定头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠聚合物[J].中国药品标准，2002（3）.
关键词：注射用头孢美唑钠；头孢美唑钠；含量
头孢曲松钠为第三代头孢菌素。头孢美唑钠适用于金黄色葡萄球菌、肺炎杆菌、拟杆菌属、大肠埃希菌、变形杆菌属、摩氏摩根菌、普罗威登斯菌属、普雷沃菌属（双路普雷沃菌除外）等所引起的前庭大腺炎、子宫内感染、子宫附件炎、子宫旁组织炎、肺炎、肺脓肿、脓胸、膀胱炎、肾盂肾炎、败血症、慢性呼吸道疾病继发感染、胆囊炎、胆管炎、颌炎等。本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量。
1 仪器与试药
超声波清洗器SCQ？1020 2500W大容量超声波清洗设备（上海声彦超声波仪器有限公司）；Bante210 标准型台式pH计（上海般特仪器有限公司）；SP-1900双光束紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；Flexar液相色谱仪（珀金埃尔默仪器（上海）有限公司）；RephiLe Direct-Pure EDI 10 UV纯水系统（上海乐枫生物科技有限公司）；ULABO 实验室温度控制器（优莱博技术（北京）有限公司）；赛多利斯PM2.5分析天平MSA2.7S-0CE-DM（广州市深华生物技术有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）。头孢美唑钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。磷酸（上海昊化化工有限公司）、四丁基氢氧化铵（永华化学科技（江苏）有限公司）、冰醋酸（德州市富凯化工有限责任公司）、乙腈（永华化学科技（江苏）有限公司）、甲醇（上海昊化化工有限公司）、磷酸二氢铵（德州市富凯化工有限责任公司）、庚烷磺酸钠（德州市富凯化工有限责任公司）、二甲基甲酰胺（永华化学科技（江苏）有限公司）、戊烷磺酸钠（永华化学科技（江苏）有限公司）、磷酸二氢钾（德州市富凯化工有限责任公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按头孢美唑钠峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用头孢美唑钠，精密称取，精密加入流动相30mL，超声提取30分钟，放冷，过滤，滤液转移至50毫升容量瓶内用流动相定容，摇匀，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢美唑钠对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含0.2mg的溶液，作为对照溶液。
2.4 准曲线的制备
制备浓度为0.05、、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，头孢美唑钠对照品在0.05～1.6mg·mL-1范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验
依照2.4项下制备对照品溶液，精密吸取头孢美唑钠对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.77%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批注射用头孢美唑钠样品6份，分别依照2.2项下制备供试品分别测定含量，含量RSD为0.82%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品头孢美唑钠峰面积积分值的RSD为0.81%。结果表明头孢美唑钠至少在6小时内稳定。
2.8 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的头孢美唑钠对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.65%。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定注射用头孢美唑钠三批样品中头孢美唑钠的含量，含量标示量的99.3%、100.2%、99.1%。
3 讨论
分别考察0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5），0.067moloL-1磷酸二氢铵溶液-乙腈-三乙胺（60∶40：0.02），乙腈-0.08%磷酸溶液（20：80），乙腈-甲醇-水（10：5：85）（用磷酸调PH值为3.0），0.1%庚烷磺酸钠溶液（取0.1%的庚烷磺酸钠500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混匀）-乙腈（70∶30），10mmol.L-1戊烷磺酸钠的10mmol.L-1磷酸氢二钾缓冲溶液（以磷酸调节pH值为6.0）-乙腈（95∶5），10mmol.L-1戊烷磺酸钠的10mmol.L-1磷酸氢二钾缓冲溶液（以磷酸调节pH值为6.0）-乙腈（93∶7）不同比例的流动相，结果以0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.2%四丁基氢氧化铵溶液-0.3%磷酸二氢钾溶液-乙腈（35：35：30）（磷酸调PH值4.5）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量测定。注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量应为标示量的95-105%。
参考文献
[1]单红宾，于力，谢红艳，徐成玮，高红，许贵娥，王作江.HPLC法测定头孢菌素类药物中聚合物的含量[J].山东医药工业，2000（4）.
[2]刘英，杨淑先.高效液相色谱法测定注射用头孢曲松钠三唑巴坦钠的含量[J].中国药学杂志，2005（20）.
[3]汤玮珉，薛佩华.头孢曲松钠粉针剂配液的稳定性观察[J].药学服务与研究，2002（3）.
[4]苗奕，刘真业，季小慎，张华峰.高效液相色谱法测定人血清中头孢曲松浓度[J].药物分析杂志，1999（6）.
[5]李军，黄萍，谢元超，于力，单红宾.用HPLC法测定头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠聚合物[J].中国药品标准，2002（3）.