【摘 要】
:
为了开展中华鲟(Acipenser sinensis)种质资源保存及其精原干细胞体外培养的研究,采用蛋白酶消化法,对中华鲟精巢组织细胞进行原代培养,建立了中华鲟精巢细胞系(Acipenser sinensis testicular cell line, AST),经352d传代培养,已稳定传至80代。中华鲟精巢细胞系形态主要呈类纤维状,培养基为DMEM,培养温度为25℃,最适血清浓度为15%。正常
【基金项目】
:
国家重点研发计划(2021YFD1200301和2018YFD0901205); 国家自然科学基金(31902353); 中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2020TD08)资助~~;
论文部分内容阅读
为了开展中华鲟(Acipenser sinensis)种质资源保存及其精原干细胞体外培养的研究,采用蛋白酶消化法,对中华鲟精巢组织细胞进行原代培养,建立了中华鲟精巢细胞系(Acipenser sinensis testicular cell line, AST),经352d传代培养,已稳定传至80代。中华鲟精巢细胞系形态主要呈类纤维状,培养基为DMEM,培养温度为25℃,最适血清浓度为15%。正常传代的AST细胞冻存、复苏后,经台盼蓝染色,约(81.36±1.13)%的细胞具有活性,复苏后细胞仍生长旺盛。染色体核型分析结果显示,第30代中华鲟精巢细胞系染色体数目分布在142—310,众数为264。通过RT-PCR检测发现,在P0和P1细胞中, Sertoli细胞特异表达基因(amh和gsdf)、Leydig细胞特异表达基因(cyp17a1)和生殖细胞特异表达基因(dazl、dnd和vasa)都有表达,且表达量与精巢中的相似;在P15、P30和P60细胞中,只有amh和vasa基因有微弱的表达,说明细胞系传代到了后期,只含有极少量的Sertoli细胞和生殖细胞。通过脂质体转染法将pEGFP-N3质粒转入AST细胞中,可表达增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)。AST细胞系的建立为中华鲟种质资源的保存、精原干细胞的体外增殖与分化、基因功能等研究提供了重要的实验材料。
其他文献
减少传统化石燃料的使用和发展新能源是减少环境问题以及满足人类社会日益增长的能源需求的有效方案。但是,由于材料自身容量的限制,现今的商用锂离子电池已经达不到人们日常生活对于长时间续航使用的要求。而锂/钠金属在作为电池的负极材料的时候具备着高理论比容量和低电极电势的优点从而可以大大的提高电池的能量密度以及可以在更高的电压下进行工作。然而,锂/钠金属电池的负极界面存在着不可控枝晶生长以及“死锂/钠”堆积
钠离子电池由于其资源丰富、成本低廉且具有与锂离子电池相似的工作原理而被认为是大规模储能系统的有力竞争者之一,其中,高性能正极材料的开发至关重要。层状金属氧化物正极材料具有较高的比容量,但是循环稳定性较差。NASICON(Na-ion super ionic cond uctor)型正极材料因其结构稳定和离子电导率高等优点而受到了广泛关注。经典NASICON结构Na3V2(PO4)3具有优异的循环稳
司法救助制度是为平等保护弱势群体免受经济等外部原因的困扰无法维护自身合法权益而设。司法救助制度的创设是为了更好地保障弱势群体平等地享有公平正义的权利,该项制度虽然只是作为《民事诉讼法》中一个极其细微的探讨论题,但其中却蕴含着广泛的宪法学、经济学等原理。本文针对该项制度的创设、沿革、发展进程中所遇到的难题,先从制度与体制的角度进行剖析,最后针对我国的国情与司法现状提出一些制度优化的构想,以释放该制度
以中华鲟保护(荆州)基地建设项目总体规划为例,在设计中,从工程视角提出了6大物种保护工艺方法:原生态全时空自然模拟,全周期重特质物种呵护,尚文保育形体打造鲟馆,绿色零碳工艺推崇节能,人鱼共存之景重塑家园,研普并重之势万世鲟乡。在这六种方法的基础上,我们亦从工程视角方面,在基地建设中,形成了如下五大保护工艺特色:立足规划、凝神生态、修复时空生境;聚焦国策、响应节能、打造绿色建筑;生命建筑、周期呵护、
多年来,鼓泡塔由于其设备成本低,传质和传热效率高等特点,被广泛应用于石油、生物、冶金、环境等工业过程。但其内部气液两相流体力学行为及传递特性复杂,使鼓泡塔反应器的设计、放大与优化存在难点。因此构建高精度、高效率的数值模型,准确描述鼓泡塔内气泡与液体的流动及传质行为具有重要意义。本文首次采用Wray-Agarwal(WA)单方程湍流模型耦合群体平衡模型(Population Balance Mode
碳达峰,碳中和是一场能源革命。作为这场能源革命的关键支撑技术,燃料电池受到了世界范围内的关注。但其阴极反应的动力学缓慢,电催化反应严重依赖贵金属催化剂,这在很大程度上阻碍了它们的实际应用。因此,开发高活性和低成本的阴极电催化剂是助力燃料电池商业化的关键一步。纳米纤维(NFs)作为一种新型的催化剂载体,具备可调的微结构和较大的比表面积,这有利于活性位点的暴露和气液传输,从而大幅提升器件性能。此外,得
臭氧氧化技术被广泛应用于有机废水的处理,但由于目前在传统的化工设备中还存在着臭氧(O3)溶解度较低,吸收效果较差等缺点,使得臭氧氧化技术在工业废水的应用有一定局限性。本论文采用一种新型的外壳固定、内轴旋转的旋转轴反应器(Rotating Bar Reactor,RBR)进行臭氧氧化有机废水研究工作。首先应用臭氧-水实验体系探究了RBR主体段的四种内结构下不同变量对传质性能的影响;然后改变主体段筛板
自从光催化技术问世,为新能源的发展以及环境保护指引了新的发展方向。探究高效的光催化剂是光催化技术发展的重要内容。金属硫化物因为其较小的带隙已成为可见光响应催化剂的适宜候选材料。其中,双金属硫化物因为具有更高的电导率、更低的带隙以及双金属之间的协同作用受到越来越多的关注。本文用水热法合成得到镍钴硫化物(Ni1.5Co1.5S4)纳米材料。通过控制水热合成时间,实现了对Ni1.5Co1.5S4结构形貌
随着现代科技的发展,电子元器件呈现出微型化的发展趋势,这对材料的导电性、导热性和防腐性能提出了越来越高的要求。基于此,本课题研制了一种兼具导电、导热和防腐性能的多功能涂层,对涂层的性能进行了表征并对涂层体系的失效过程进行了分析。主要结论如下:(1)以石墨作为导电填料,制备了石墨/聚氨酯涂层,研究了石墨添加量对涂层性能的影响。结果表明,随着石墨含量的增加,涂层的方阻不断减小,热导率逐渐增大,但是耐盐
苯乙烯是重要的石油化工资源,我国的苯乙烯产业还处于迅猛增长阶段。目前用于合成苯乙烯的方法大多数是乙苯脱氢法,该工艺用苯和乙烯为原料经过两步反应得到苯乙烯。甲苯侧链烷基化反应可以经过一步反应得到苯乙烯,但该方法要求催化剂要有酸碱双功能及一定的空间结构,层状氢氧化物(LDH)焙烧得到的层状复合氧化物(LDO)具备二维层状结构和酸碱位点,满足该反应的要求。本文通过共沉淀法在X分子筛上原位生长Co Al-