MiRNA-150-5p抑制食管鳞癌Eca9706细胞增殖分子机制研究

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangbao_2002
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目的食管鳞癌是常见的消化道肿瘤,异常的miRNAs表达现已成为各种疾病的生物学标志。本研究探讨miRNA-150-5p在食管鳞癌细胞的表达及其在食管鳞癌细胞增殖中的分子机制。方法人食管鳞癌Eca9706细胞株转染miRNA-150-5p模拟物和空脂质体分别建立模拟物组和阴性对照组。RT-PCR法检测miRNA-150-5p表达,MTT法检测细胞增殖,数据库预测miRNA-150-5p调控的下游靶基因,RT-PCR法检测miRNA-150-5p和肝细胞再生磷酸因子-1(protein tyrosine phosphatase typeⅣA,number 1,PTP4A1)mRNA表达,蛋白质印迹法检测PTP4A1蛋白表达,细胞免疫荧光法检测Ki-67表达。结果成功建立miRNA-150-5p高表达的Eca9706细胞模型,模拟物组miRNA-150-5p表达量(1.048±0.061)高于空白对照组(0.675±0.024)和阴性对照组(0.624±0.040),差异有统计学意义,F=81.95,P<0.05;与空白对照组(97.333±4.041)和阴性对照组(86.667±5.508)相比,模拟物组细胞活力(11.987±4.612)降低,F=286.47,P<0.05。通过数据库检索发现,PTP4A1为miRNA-150-5p的靶基因。蛋白质印迹结果发现,模拟物组PTP4A1蛋白表达量为0.269±0.104,与空白对照组(0.821±0.078)和阴性对照组(0.768±0.041)相比降低,F=45.08,P<0.05;与空白对照组PTP4A1mRNA的表达量(0.798±0.033)和阴性对照组(0.809±0.029)相比,模拟物组PTP4A1mRNA的表达量(0.292±0.081)降低,F=93.77,P<0.05。结论 MicroRNA-150-5p可以通过PTP4A1抑制Eca9706细胞增殖,其机制可能与抑制PTP4A1mRNA和蛋白表达有关。
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