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摘要 [目的]优化超声波辅助提取块菌多糖的工艺条件。[方法]以块菌为原料，采用超声波辅助提取方法，通过单因素试验及正交试验优化了块菌多糖的提取工艺。[结果]试验表明，影响超声波辅助提取块菌多糖的主要因素是超声波处理时间，其次是超声波处理功率，而超声波处理温度与料液比的影响相对较小。最优辅助提取方案为：料液比1∶30 g/ml，超声波处理温度40 ℃，超声波处理功率100 W，超声波处理60 min，在此条件下块菌多糖提取率为17.86%。[结论]研究可为块菌的进一步开发利用提供参考依据。
关键词 块菌；多糖；超声波
中图分类号 S646 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）25-08751-02
Abstract [Objective] To optimize the technique conditions for extracting truffles polysaccharide assisted by ultrasonic. [Method] With truffles as raw material， using ultrasonic assistant method， the technique for extracting truffles polysaccharide was optimized by single factor and orthogonal test. [Result] The results showed that： the ultrasound time was main factor which influenced the extraction of truffles polysaccharides， and ultrasound power was secondary factor. The ratio of material to liquid and the ultrasound temperature were relatively the minimal factors. The optimal extraction scheme was 30 ml/g material liquid ratio， ultrasound temperature 40 ℃， ultrasound power 100 W and ultrasonic treatment 60 min. In these conditions， the truffles polysaccharides yield was 17.86%. [Conclusion] The study can provide reference basis for further development and utilization of truffles.
Key words Truffles； Polysaccharide； Ultrasonic
块菌是一种地下真菌，也俗称“地下黑黄金”，是世界上非常珍贵的药食菌种之一。块菌具有很高的营养价值[1]和特殊的香味，同时还含有多种活性成分，其主要的有块菌多糖、α雄烷醇、神经酰胺等，其中块菌多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等功能[2-4]。超声波辅助提取多糖的方法属于一种物理辅助提取法，其原理是利用超声波辐射产生强烈的空化效应，因而形成了很强的压力让细胞壁甚至整个生物体在极短的时间破裂；辐射时产生的振动作用能加速胞内物质的释放、扩散与溶解，因此可以在极大程度上缩短提取时间并提高目标物质的提取效率[5]。
笔者用超声波辅助提取法，通过单因素试验研究了超声波处理时间、处理功率、处理温度及料液比对提取率的影响，通过正交试验得出最优的提取方案。
1 材料与方法
1.1 材料
供试原料为市售干燥块菌，购自攀枝花市。主要试剂：蒽酮、硫酸、葡萄糖、无水乙醇，均为分析纯，购自成都科龙试剂有限公司。
主要仪器与设备：
低速台式大容量离心机（TDL5C型），循环水式多用真空泵（SHBⅢ型），EYELA旋转蒸发仪（N1000型），数控超声波清洗器（KQ5200DB型），电子恒温水浴锅（DZKW4型），电热鼓风干燥箱（DHG9245A型），盛搏多功能药材粉碎机（SB350型）。
1.2 块菌多糖提取工艺
原料→60 ℃干燥→粉碎过60目筛→无水乙醇预处理（85 ℃，2 h）→超声波处理→水浴浸提（90 ℃，60 min）→真空抽滤→滤液减压浓缩→乙醇醇沉→离心（5 000 r/min，10 min）→冷冻干燥样品→粗多糖。
1.3 多糖含量测定
准确称取样品2.0 g（精准到0.000 1 g），在试验设计的条件下进行提取，得到块菌粗多糖，称量后计算块菌多糖得率。采用蒽酮-硫酸法[6]测定多糖含量，用葡萄糖做标准曲线。
3 讨论
目前多糖的提取方法主要有化学方法（如热水浸提法）、物理辅助法（如超声波提取法）及生物酶法。岳金玫发现，用超声波辅助提取能得到更好的提取率[3]。因此该研究采用超声波辅助提取方法对多糖进行提取，但是随着超声波处理时间、处理温度、处理功率的增加，导致溶出的多糖裂解，得率降低。该试验通过正交试验优化了块菌的提取工艺，并得出了最佳提取工艺参数，即料液比1∶30 g/ml，超声波处理温度40 ℃，超声波功率100 W，超声波处理60 min，此提取工艺下块菌多糖提取率为17.86%。
参考文献
[1] 陶恺，刘波.中国块菌的生态和营养价值[J].山西大学学报，1990，13（3）：319-321.
[2] 汤亚杰，孔国平，朱伶俐，等.块菌活性成分及其人工栽培研究进展[J].中草药，2007，38（4）：629-632.
[3] 岳金玫.攀枝花块菌多糖的提取、纯化及抗氧化活性研究[D].雅安：四川农业大学，2012.
[4] 胡慧娟，李佩珍，林涛，等.块菌多糖对小鼠肿瘤及免疫系统的影响[J].中国药科大学学报，1994，25（5）：289-292.
[5] 邬万宁.超声提取技术在现代中药中的应用[J].中草药，2007，38（2）：315-316.
[6] 阮鸣.蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量[J].安徽农业科学，2008，36（26）：11424-11425.
[7] 王钦德，杨坚.食品试验设计与统计分析[M].北京：中国农业大学出版社，2003：335-337.
关键词 块菌；多糖；超声波
中图分类号 S646 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）25-08751-02
Abstract [Objective] To optimize the technique conditions for extracting truffles polysaccharide assisted by ultrasonic. [Method] With truffles as raw material， using ultrasonic assistant method， the technique for extracting truffles polysaccharide was optimized by single factor and orthogonal test. [Result] The results showed that： the ultrasound time was main factor which influenced the extraction of truffles polysaccharides， and ultrasound power was secondary factor. The ratio of material to liquid and the ultrasound temperature were relatively the minimal factors. The optimal extraction scheme was 30 ml/g material liquid ratio， ultrasound temperature 40 ℃， ultrasound power 100 W and ultrasonic treatment 60 min. In these conditions， the truffles polysaccharides yield was 17.86%. [Conclusion] The study can provide reference basis for further development and utilization of truffles.
Key words Truffles； Polysaccharide； Ultrasonic
块菌是一种地下真菌，也俗称“地下黑黄金”，是世界上非常珍贵的药食菌种之一。块菌具有很高的营养价值[1]和特殊的香味，同时还含有多种活性成分，其主要的有块菌多糖、α雄烷醇、神经酰胺等，其中块菌多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等功能[2-4]。超声波辅助提取多糖的方法属于一种物理辅助提取法，其原理是利用超声波辐射产生强烈的空化效应，因而形成了很强的压力让细胞壁甚至整个生物体在极短的时间破裂；辐射时产生的振动作用能加速胞内物质的释放、扩散与溶解，因此可以在极大程度上缩短提取时间并提高目标物质的提取效率[5]。
笔者用超声波辅助提取法，通过单因素试验研究了超声波处理时间、处理功率、处理温度及料液比对提取率的影响，通过正交试验得出最优的提取方案。
1 材料与方法
1.1 材料
供试原料为市售干燥块菌，购自攀枝花市。主要试剂：蒽酮、硫酸、葡萄糖、无水乙醇，均为分析纯，购自成都科龙试剂有限公司。
主要仪器与设备：
低速台式大容量离心机（TDL5C型），循环水式多用真空泵（SHBⅢ型），EYELA旋转蒸发仪（N1000型），数控超声波清洗器（KQ5200DB型），电子恒温水浴锅（DZKW4型），电热鼓风干燥箱（DHG9245A型），盛搏多功能药材粉碎机（SB350型）。
1.2 块菌多糖提取工艺
原料→60 ℃干燥→粉碎过60目筛→无水乙醇预处理（85 ℃，2 h）→超声波处理→水浴浸提（90 ℃，60 min）→真空抽滤→滤液减压浓缩→乙醇醇沉→离心（5 000 r/min，10 min）→冷冻干燥样品→粗多糖。
1.3 多糖含量测定
准确称取样品2.0 g（精准到0.000 1 g），在试验设计的条件下进行提取，得到块菌粗多糖，称量后计算块菌多糖得率。采用蒽酮-硫酸法[6]测定多糖含量，用葡萄糖做标准曲线。
3 讨论
目前多糖的提取方法主要有化学方法（如热水浸提法）、物理辅助法（如超声波提取法）及生物酶法。岳金玫发现，用超声波辅助提取能得到更好的提取率[3]。因此该研究采用超声波辅助提取方法对多糖进行提取，但是随着超声波处理时间、处理温度、处理功率的增加，导致溶出的多糖裂解，得率降低。该试验通过正交试验优化了块菌的提取工艺，并得出了最佳提取工艺参数，即料液比1∶30 g/ml，超声波处理温度40 ℃，超声波功率100 W，超声波处理60 min，此提取工艺下块菌多糖提取率为17.86%。
参考文献
[1] 陶恺，刘波.中国块菌的生态和营养价值[J].山西大学学报，1990，13（3）：319-321.
[2] 汤亚杰，孔国平，朱伶俐，等.块菌活性成分及其人工栽培研究进展[J].中草药，2007，38（4）：629-632.
[3] 岳金玫.攀枝花块菌多糖的提取、纯化及抗氧化活性研究[D].雅安：四川农业大学，2012.
[4] 胡慧娟，李佩珍，林涛，等.块菌多糖对小鼠肿瘤及免疫系统的影响[J].中国药科大学学报，1994，25（5）：289-292.
[5] 邬万宁.超声提取技术在现代中药中的应用[J].中草药，2007，38（2）：315-316.
[6] 阮鸣.蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量[J].安徽农业科学，2008，36（26）：11424-11425.
[7] 王钦德，杨坚.食品试验设计与统计分析[M].北京：中国农业大学出版社，2003：335-337.