论文部分内容阅读
【摘 要】 目的：建立HPLC法测定复方氨林巴比妥注射液中安替比林含量的方法。方法：采用sinochrom ODS-AP（4.6mm×200mm，5μm）色谱柱；流动相：甲醇-1%醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.7）（45∶55）；流速：0.8ml/min；检测波长：259nm；柱温：40℃；进样体积：10μl。结果：安替比林浓度在0.4～2μg/ml时，线性关系良好（r=0.9999）；平均加样回收率为98.95%（n=9）。结论：该法简便、快速、专属性强、准确度高，适用于复方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量测定。
【关键词】 高效液相色谱法；安替比林；含量
【中图分类号】R927.2 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）09-0010-02
Abstract：Objective：To establish an HPLC method for determination of antipyrine Compound Amionprine and Antipyrine injection.Method： An sinochrom ODS-AP column（4.6mm×200mm，5μm）was used with the temperature of 40℃.The mobile phase consisted of methanol：1%acetic acid solution（adjusted to pH 3.7 with TriethyLamine）（45∶55）and the flow rate was 0.8ml/min.The detection wavelength was 259nm，sample amount to 10μl.Results： the linearity was good in the range of 0.4～2μg/ml（r=0.9999）；The average sample recovery rate was 98.8% （n=9）.Conclusion： This Method is simple，rapid，specific and accurate ，and can be used for determination of compound Amionprine and Antipyrine injection.
Keywords：HPLC；antipyrine；content
复方氨林巴比妥注射液收载于《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十四册，由氨基比林、安替比林、巴比妥和注射用水组成，为解热镇痛药，临床用于急性高热时的紧急退热，对发热时的头痛症状也有缓解作用。本文通过实验，建立了高效液相色谱法测定复方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量测定方法，并对方法进行了验证[1]。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1260高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；BP211D電子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。
1.2 试药 安替比林对照品（批号：100506-200301，中国药品生物制品检定所）；复方氨林巴比妥注射液（批号：1401212A、1401014A ，郑州某药业有限公司生产；批号：13091904，贵州某药业有限公司）；甲醇为色谱纯；水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Sinochrom ODS-AP （4.6mm×200mm，5μm）；流动相：甲醇-1%醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.7）（45∶55）；流速：0.8ml/min；检测波长：259nm；柱温：40℃；进样体积：10μl。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取安替比林对照品10.49mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取复方氨林巴比妥注射液1ml，置200ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2.3 阴性样品溶液的制备 按复方氨林巴比妥注射液处方，不加安替比林制成阴性对照，同“2.2.2”项下的制备方法制成阴性样品溶液。
2.3 阴性对照试验 取对照品溶液、样品溶液和阴性溶液，在上述色谱条件下准确进样10μl，分别记录色谱图，色谱图见图1。结果表明，安替比林的测定不受其他杂质峰的干扰。
2.4 线性关系试验 分别精密量取上述对照品溶液各4、8、12、16、20μl，在上述色谱条件下进样，记录峰面积，以峰面积A为纵坐标，浓度C（μg/ml）为横坐标进行线性回归，得回归方程为Y=3.57748C+1.16032，r=0.9999，安替比林在浓度0.4～2μg/ml的范围内，线性关系良好。
2.5 精密度试验 取上述对照品溶液，准确进样10μl，连续进样6次，分别测定峰面积，RSD为0.30%。表示仪器的精密度良好。
2.6 重复性试验 精密量取同一批号样品（批号：1401212A），按“2.2.2”项下的方法配制溶液，在上述色谱条件下，依法测定，记录峰面积，6份样品按标示量计算的平均含量为99.04%，RSD为0.35%（n=6）。表明该方法重现性较好。
2.7 稳定性试验 取重复性试验项下的第一份样品分别于0、2、4、8、12、24h取样测定，结果安替比林的RSD为0.81%（n=6）。表明该样品在24h内稳定。
2.8 加样回收率试验 精密量取已知含量的样品（批号：1401212A ） 4、5、6ml各3份分别置10ml量瓶中，精密加入“2.2.1”的对照溶液各6、6、6、5、5、5、4、4、4ml，摇匀。照上述色谱条件，进样测定9份，结果平均回收率为98.95%，RSD为0.72%（n=9）。
2.9 样品中安替比林的含量测定 精密称取安替比林对照品适量，照“2.2.1”项下方法制备对照品溶液，另取复方氨林巴比妥注射液三批，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，在上述色谱条件下，注入液相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算，结果见表1。
3 讨论
3.1 《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十四册中，安替比林的含量测定采用紫外法进行定量分析[2]，其操作繁琐，反应时间长。本实验采用HPLC法测定其含量，具有操作简便、专属性强、结果准确的特点，有利于在实际工作中对药品质量的控制。
3.2 检测波长的选择 精密量取对照品溶液适量，用水溶解并稀释制成0.1mg/ml的溶液，以水为空白，用TU-1901紫外-可见分光光度计在200～300nm的波长范围内分别扫描其紫外吸收图谱，在259nm的波长处有最大吸收，所以确定其为检测波长。
3.3 经试验，流动相用甲醇-1%醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.7）（45∶55） [3]，流速为0.8ml/min；柱温为40℃时，安替比林峰的保留时间适宜（5.7min），理论版数按安替比林峰计算达到7093 。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录194-195.
[2]国家药典委员会.国家药品标准（第十四册）[S].北京：人民卫生出版社，2010：81.
[3]国家药典委员会. 国家药品标准（第十六册）[S].北京：人民卫生出版社，2010：396.
（收稿日期：2015.01.29）
【关键词】 高效液相色谱法；安替比林；含量
【中图分类号】R927.2 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）09-0010-02
Abstract：Objective：To establish an HPLC method for determination of antipyrine Compound Amionprine and Antipyrine injection.Method： An sinochrom ODS-AP column（4.6mm×200mm，5μm）was used with the temperature of 40℃.The mobile phase consisted of methanol：1%acetic acid solution（adjusted to pH 3.7 with TriethyLamine）（45∶55）and the flow rate was 0.8ml/min.The detection wavelength was 259nm，sample amount to 10μl.Results： the linearity was good in the range of 0.4～2μg/ml（r=0.9999）；The average sample recovery rate was 98.8% （n=9）.Conclusion： This Method is simple，rapid，specific and accurate ，and can be used for determination of compound Amionprine and Antipyrine injection.
Keywords：HPLC；antipyrine；content
复方氨林巴比妥注射液收载于《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十四册，由氨基比林、安替比林、巴比妥和注射用水组成，为解热镇痛药，临床用于急性高热时的紧急退热，对发热时的头痛症状也有缓解作用。本文通过实验，建立了高效液相色谱法测定复方氨林巴比妥注射液中安替比林的含量测定方法，并对方法进行了验证[1]。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1260高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；BP211D電子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。
1.2 试药 安替比林对照品（批号：100506-200301，中国药品生物制品检定所）；复方氨林巴比妥注射液（批号：1401212A、1401014A ，郑州某药业有限公司生产；批号：13091904，贵州某药业有限公司）；甲醇为色谱纯；水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Sinochrom ODS-AP （4.6mm×200mm，5μm）；流动相：甲醇-1%醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.7）（45∶55）；流速：0.8ml/min；检测波长：259nm；柱温：40℃；进样体积：10μl。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取安替比林对照品10.49mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取复方氨林巴比妥注射液1ml，置200ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2.3 阴性样品溶液的制备 按复方氨林巴比妥注射液处方，不加安替比林制成阴性对照，同“2.2.2”项下的制备方法制成阴性样品溶液。
2.3 阴性对照试验 取对照品溶液、样品溶液和阴性溶液，在上述色谱条件下准确进样10μl，分别记录色谱图，色谱图见图1。结果表明，安替比林的测定不受其他杂质峰的干扰。
2.4 线性关系试验 分别精密量取上述对照品溶液各4、8、12、16、20μl，在上述色谱条件下进样，记录峰面积，以峰面积A为纵坐标，浓度C（μg/ml）为横坐标进行线性回归，得回归方程为Y=3.57748C+1.16032，r=0.9999，安替比林在浓度0.4～2μg/ml的范围内，线性关系良好。
2.5 精密度试验 取上述对照品溶液，准确进样10μl，连续进样6次，分别测定峰面积，RSD为0.30%。表示仪器的精密度良好。
2.6 重复性试验 精密量取同一批号样品（批号：1401212A），按“2.2.2”项下的方法配制溶液，在上述色谱条件下，依法测定，记录峰面积，6份样品按标示量计算的平均含量为99.04%，RSD为0.35%（n=6）。表明该方法重现性较好。
2.7 稳定性试验 取重复性试验项下的第一份样品分别于0、2、4、8、12、24h取样测定，结果安替比林的RSD为0.81%（n=6）。表明该样品在24h内稳定。
2.8 加样回收率试验 精密量取已知含量的样品（批号：1401212A ） 4、5、6ml各3份分别置10ml量瓶中，精密加入“2.2.1”的对照溶液各6、6、6、5、5、5、4、4、4ml，摇匀。照上述色谱条件，进样测定9份，结果平均回收率为98.95%，RSD为0.72%（n=9）。
2.9 样品中安替比林的含量测定 精密称取安替比林对照品适量，照“2.2.1”项下方法制备对照品溶液，另取复方氨林巴比妥注射液三批，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，在上述色谱条件下，注入液相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算，结果见表1。
3 讨论
3.1 《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十四册中，安替比林的含量测定采用紫外法进行定量分析[2]，其操作繁琐，反应时间长。本实验采用HPLC法测定其含量，具有操作简便、专属性强、结果准确的特点，有利于在实际工作中对药品质量的控制。
3.2 检测波长的选择 精密量取对照品溶液适量，用水溶解并稀释制成0.1mg/ml的溶液，以水为空白，用TU-1901紫外-可见分光光度计在200～300nm的波长范围内分别扫描其紫外吸收图谱，在259nm的波长处有最大吸收，所以确定其为检测波长。
3.3 经试验，流动相用甲醇-1%醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至3.7）（45∶55） [3]，流速为0.8ml/min；柱温为40℃时，安替比林峰的保留时间适宜（5.7min），理论版数按安替比林峰计算达到7093 。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录194-195.
[2]国家药典委员会.国家药品标准（第十四册）[S].北京：人民卫生出版社，2010：81.
[3]国家药典委员会. 国家药品标准（第十六册）[S].北京：人民卫生出版社，2010：396.
（收稿日期：2015.01.29）