针对人caspase-8基因的siRNA的载体的构建及其表达

来源 :吉林医药学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：charles_y_tang

【摘要】

：

目的构建针对人caspase-8 基因mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中caspase8的抑制作用.方法化学合成针对caspase-8发夹状的RNA寡核苷酸,将其退火形成双链,连接入经H

【作者】

：

张巍赵行宇陈默然吕士杰沈楠田晶任旷

【机构】

：

吉林医药学院生化教研室

【出处】

：

吉林医药学院学报

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

CASPASE8 RNA干涉真核表达载体 HELA细胞 caspase-8RNA interferenceeukaryotic expression vect

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目的构建针对人caspase-8 基因mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中caspase8的抑制作用.方法化学合成针对caspase-8发夹状的RNA寡核苷酸,将其退火形成双链,连接入经HindⅢ和BglⅡ双酶切后的pSUPER真核表达载体.对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定.通过脂质体介导,把重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,RT-PCR测其对mRNA和蛋白表达的干涉效果.结果成功地构建了针对人caspase-8基因的RNA干涉真核表达载体pSUPER-C1和pSUPER-C2,并在人H

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