观察热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对间充质干细胞C3H10T1/2增殖、凋亡及成骨分化的影响。
方法用0、0.001、0.010、0.100和1.000 μmol/L浓度17-AAG处理C3H10T1/2，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测C3H10T1/2增殖；流式细胞术检测0、0.1和1.0 μmol/L浓度17-AAG作用下细胞的凋亡率；0、0.1、0.5、1.0 μmol/L 17-AAG处理后，Western blot检测凋亡相关蛋白的变化，半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3试剂盒检测Caspase-3酶活性的变化；0、0.01 μmol/L17-AAG处理后，碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性测定检测两组成骨分化的强弱。
结果0、0.001、0.010、0.100和1.000 μmol/L 17-AAG处理细胞后，随着浓度增加，C3H10T1/2的生长增殖明显受到抑制，呈时间浓度依耐性。流式细胞术检测，0、0.1、1.0 μmol/L 3组凋亡率分别为(1.36±0.43)%、(5.37±1.10)%、(13.30±1.94)%，0.1、1.0 μmol/L组较对照组差异均有统计学意义(P＝0.014、0.011)，0.1、1.0 μmol/L两组之间差异也有统计学意义(P＝0.048)。Western blot结果显示随着17-AAG浓度的升高，抗凋亡蛋白B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)减少，促凋亡蛋白bcl-2相关X蛋白(bax)、BH3结构域凋亡诱导蛋白(bid)表达增加。Caspase-3活性测定17-AAG浓度0.1、0.5、1.0 μmol/L组与对照组比值分别为1.84±0.11、2.19±0.13、2.79±0.24，与对照组比较差异均有统计学意义(P＝0.006，P＝0.004，P＝0.006)。成骨诱导14 d，0.01 μmol/L组ALP染色比未处理组颜色加深，0.01 μmol/L组ALP活力与对照组ALP活力比值为1.646±0.139，差异有统计学意义(P＝0.015)。
结论高浓度17-AAG抑制间充质干细胞C3H10T1/2的增殖，促进其凋亡，低浓度17-AAG能促进C3H10T1/2的成骨分化。