兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体的制备及鉴定

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kenxu
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目的 制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体.方法 构建pET-22b-SAS1 B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达.用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SAS1B多克隆抗体.ELISA检测SAS1B抗体效价,Western blot和免疫组织化学法鉴定SAS1B抗体特异性.结果 在构建pET-22b-SAS1B-His原核表达载体的基础上,在BL21(DE3)细胞成功诱导表达SAS1B重组蛋白.制备的兔抗人SAS1B多克隆抗体效价为1:51200.SAS1B多克隆抗体能与SAS1B重组蛋白特异结合且能识别乳腺癌组织中的SAS1B蛋白.结论 成功制备具有较好特异性的兔抗人SAS1B多克隆抗体.
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