探讨Wnt信号通路抑制剂XAV939对胃癌细胞株MKN-45细胞凋亡的影响及其机制。
方法噻唑蓝(MTT)法观察XAV939对MKN-45细胞增殖的影响；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染流式细胞术、原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测XAV939作用不同时段后c-Myc、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、β-连环蛋白(β-catenin) mRNA的表达水平；Western blot法检测凋亡及信号通路相关蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、c-Myc、bcl-2、bcl-2相关X蛋白(bax)、Axin 1、β-catenin、磷酸化β-catenin(p-β-catenin)和细胞周期蛋白(Cyclin) D1等的表达变化。
结果XAV939能明显抑制胃癌细胞株MKN-45细胞的增殖，呈浓度依赖性，半数抑制浓度为(1.91±0.27) μmol/L。Annexin V-FITC/PI流式细胞法检测到早期凋亡细胞，作用12 h后的MKN-45细胞凋亡率分别为8.8%、13.5%、21.5%和25.8%，不同浓度XAV-939作用MKN-45细胞48 h后，实验组c-Myc、bcl-2、β-catenin基因mRNA表达逐渐减弱，与对照组比较差异有统计学意义。c-Myc、bcl-2、PARP(116×103)、β-catenin及Cyclin D1蛋白表达水平呈下调趋势，而bax、Axin 1、p-β-catenin和PARP(85×103)蛋白表达逐渐上升。
结论XAV-939可以有效抑制胃癌细胞株MKN-45的增殖，诱导其凋亡，机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路，促进MKN-45细胞凋亡有关。