研究血清淀粉样蛋白A(Saa)在刀豆球蛋白A(ConA)诱导的肝损伤过程中发挥的作用及其机制。

通过注射ConA于Saa转基因过表达小鼠(TG)和野生型小鼠(WT)建立肝损伤模型；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测TG小鼠肝脏组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)、趋化因子1α(MIP1α)、趋化因子1β(MIP1β)、趋化因子IP10(IP10)和嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)基因表达；分别测定两组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的浓度；酶联免疫反应(ELISA)测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)浓度；Western blot法测定小鼠肝脏组织中Saa、磷酸化核因子α抑制蛋白[p-IκBα(Ser32/36)]和核因子α抑制蛋白(IκBα)的表达；运用免疫磁珠法分离纯化小鼠肝脏、脾脏中CD4^＋T细胞并进行流式细胞术检测。

TG小鼠肝脏组织中MCP1、MIP1α、MIP1β、IP10、Eotaxin基因表达量(0.61±0.13、0.89±0.15、0.76±0.12、0.37±0.08、0.98±0.17)显著高于WT组(0.13±0.03、0.27±0.02、0.16±0.06、0.07±0.02、0.34±0.07)(P值分别为0.001、0.001、0.001、0.021、0.001)；6 h时TG小鼠肝脏组织中ALT和AST浓度分别为(16.2±3.1) U/L和(18.8±4.2) U/L，显著高于WT组(6.1±1.3) U/L和(4.5±1.4) U/L(P值分别为0.002、0.001)；血清中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8的浓度[(813.6±114.2)、(64.5±8.9)、(1 045.8±138.6)、(43.4±5.5) pg/ml]显著高于WT组[(253.1±33.5)、(10.5±6.7)、(374.1±53.7)、(24.8±3.4) pg/ml](P值分别为0.011、0.006、0.005、0.014)；流式细胞术显示，TG小鼠肝脏中CD4^＋T细胞和F4/80^＋CD11b^＋巨噬细胞比例分别为(60.72±3.65)%和(9.86±0.58)%，显著高于WT组小鼠(35.41±2.45)%和(2.73±0.51)%(P值分别为0.011、0.014)。Western blot显示TG小鼠肝脏组织中p-IκBα(Ser32/36)水平升高，而Toll样受体2抑制剂(CU-CPT22)作用后p-IκBα(Ser32/36)水平降低。

Saa过表达通过诱导趋化因子的表达促进肝损伤的发生，具有Toll样受体(TLR2)活性依赖关系，并通过增加CD4^＋T细胞和巨噬细胞数量发挥作用。