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本发明涉及一种含有大肠杆菌卵黄抗体的饲用蛋白粉的制备方法及其应用。该蛋白粉内含有效价≥1:64的抗大肠杆菌的卵黄抗体。其制备方法包括制备血清型的大肠杆菌免疫原:将免疫原对健康产蛋母鸡进行免疫。免疫原注射剂量为0.5—3.0ml/只动物;收集免疫7-10d后的鸡下的蛋,留取含有抗大肠杆菌的卵黄抗体的效价不小于1:64的鸡蛋备用;