微小RNA-320a在前列腺癌中的表达及其功能

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目的

检测微小RNA(miR-RNA,miR)-320a在前列腺癌患者血清及组织中的表达,探讨miR-320a在前列腺癌中的功能及作用机制。

方法

实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-320a在前列腺癌患者和健康男性血清中的表达,同时检测前列腺癌组织中miR-320a的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测miR-320a对前列腺癌细胞增殖影响;细胞划痕实验检测miR-320a对前列腺癌细胞侵袭的影响;双荧光素酶报告实验检测miR-320a对于SOX4基因调控作用;Western blot实验检测miR-320a对于SOX4抑制作用。

结果

前列腺癌患者血清中miR-320a表达低于正常对照血清[(0.983±0.103)比(2.432±0.376),P=0.000];前列腺癌组织直径≥2.5 cm的肿瘤比直径<2.5 cm的肿瘤miR-320a表达水平低(P=0.023)。Real-time PCR结果显示转染miR-320a mimics后,PC3细胞中miR-320a表达增高。CCK-8检测结果显示转染后24、48、72 h,miR-320a mimics组细胞增殖(0.306±0.041、0.567±0.117、0.612±0.134)低于miR-320aNC组(0.542±0.094、0.976±0.133、1.347±0.217)、PC3组(0.462±0.110、0.954±0.158、1.212±0.161)。细胞划痕实验显示,细胞划痕后培养48 h,miR-320a mimics组细胞间划痕距离大于PC3、miR-320aNC组。双荧光素酶报告实验证明miR-320a可以直接作用于SOX4的3’非翻译区,调控SOX4表达。Western blot检测结果表明高表达miR-320a后,SOX4表达水平降低。

结论

miR-320a在前列腺癌患者血清中低表达,并且miR-320a的表达与前列腺癌肿瘤大小呈负相关;miR-320a抑制前列腺癌细胞增殖和迁移,可能是通过调控SOX4发挥作用的。

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