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目的建立高效液相色谱法测定茜草饮片中大叶茜草素和羟基茜草素的含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸(25:52:23),流速:1.0mL.min-1,检测波长:250 nm,柱温:30℃。结果大叶茜草素和羟基茜草素分别在(10~500)μg.mL-1和(5~200)μg.mL-1范围内线性良好;平均回收率分别为103.12%(RSD=2.27%)和98.72%(RSD=1.31%)。结论本方法准确、重现性好,可作为茜草饮片中大叶茜草素和羟基茜草素的含量测定方法。