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摘要 [目的]研究几种生防菌对烟草生长发育及其抗病性的影响。[方法]从云南曲靖烟区采摘的健康烟叶中筛选分离出3种生防菌株，分别命名为XGR、SHNA和FXJ，再将这3种菌种混合为复配菌剂，共4种生防菌同时应用于大田烟叶生产中。在采烤前测量其株高、茎围、叶片数、最大叶面积和赤星病发病率及病情指数。 [结果]相对于空白对照处理，处理D施用复配菌剂，不接种病原的株高、茎围、叶片数和最大叶面积分别高13.21%、3.74%、6.15%和8.55%，其他施用生防菌的几个处理农艺性状也优于对照。赤星病发病率和病情指数最低的处理C，分别为16.5%和3.55，发病率和病情指数较低的分别是其他几种施用生防菌的处理。烟草产量最高的是处理D
2 468.21 kg/hm2 ，上等烟比例也最高，其他几种施用生防菌的处理也比空白处理高。[结论] 这几种生防菌对烟叶的生长发育及抗赤星病等方面具有较好的效果。
关键词 烟叶；生防菌；赤星病；产量
中图分类号 S572 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）08-02356-03
Study about the Influence of Several Biocontrol Microorganisms on the Growth and Resistance of Tobacco
ZOU Cheng，WEN Guosong et al
（Institute of Plant Protection， Yunnan Agricultural University， Kunming， Yunnan 650201）
Abstract [Objective] The aim was to study the influence of several biocontrol microorganisms on the growth and resistance of tobacco. [Method]Three kinds of biocontrol microorganisms named XGR， SHNA and FXJ from healthy tobacco leaves using confront culture at Yunnan Qujing tobacco growing areas were screened and separated.Three kinds of biocontrol microorganisms and compound inoculants of that to the field of tobacco production were applied. The height， stem girth， number of leaves and maximum leaf area before baking were measured. [Result]The result showed that the height， stem girth， number of leaves and maximum leaf area of treatment D that using compound inoculants without inoculation of pathogen was much higher respectively by 13.21%， 3.74%，6.15% and 8.55% compared with treatment blank control. The economical characters of other treatments with biocontrol microorganisms were higher than the contrast. The lowest disease incidence and disease index of red star disease was treatment C， respectively 16.5% and 3.55. The lower of disease incidence and disease index of red star disease were other treatments with biocontrol microorganisms. The highest of the output of tobacco was treatment D， 2 468.21 kg/hm2， the same with the proportion of superior leaves. The other treatments with biocontrol microorganisms were higher than treatment blank. [Conclusion] The several kinds of bio-control bacteria had good promotion effect on growth and development of tobacco leaf and red star disease resistance， etc.
Key words Tobacco； Biocontrol microorganism； Red star disease； Output of tobacco
當前烟草安全性问题已成为全社会越来越关注的焦点，而烟叶农药残留（以下简称农残）是影响安全性的一个重要因素，自然也备受关注，控制烟草中的农药残留量也日趋急迫和重要[1-2]。解决烟叶农药残留超标问题，应从合理使用农药和减少使用化学农药两方面人手。农业上重点是烟草优良品种的选育和降焦减害栽培技术，加快选育低焦油等安全性好的品种。工业上应加强产品改造新技术的研究。不断探讨新技术、新方法，以采用最新科技手段，来减少有害物质。降低有害成分，提高卷烟安全性，是烟草发展的必由之路[3-4]。目前有益微生物在烟草病虫害防治、烟草产量和品质提高等方面均取得了一定的进展，许多微生物农药和微生物肥料已在烟草生产实践中得到应用，并取得了明显的经济效益和社会效益。因此，大力开展生物防治研究对于农业可持续发展具有重要意义。烟草病害生物防治已成为近年来科技工作者研究较多和最具发展潜力的领域，受到国内外的普遍关注[5-6]。笔者利用从田间烟叶提取到的微生物作为材料，在温室大棚内证明有明显防治效果的基础上，进行大田试验，研究其对烟草生长发育和抗病性的影响。 1 材料与方法
1.1 微生物菌剂
分离自健康烟叶的芽孢杆菌微生物菌株，分别为SHNA、XGR和FXJ，及分离自赤星病病株的烟叶赤星病病源，保存于云南农业大学植物病理学实验室。
1.2 试验设计
试验地位于云南省曲靖市沾益县大坡乡耕德村委会，供试品种为当地主栽品种云97，前茬作物为冬闲地红壤旱地。采用标准化大棚漂浮育苗，烟苗于2013年4月21日统一按照株行距120 cm×55 cm，植株密度150.00 株/hm2移栽，试验地合计0.2 hm2。基肥按照75 kg/hm2农家肥、750 kg/hm2普钙、450 kg/hm2复合肥和150 kg/hm2硝酸钾标准施用，追肥则按照75 kg/hm2农家肥和75 kg/hm2硝酸钾追加。中耕管理于2013年6月15日进行，包括除草、统防和田间卫生，采用雨水和人工灌溉。病虫害方面喷施康福多农药、敌杀死、链霉素和甲霜灵锰锌。
共设10个处理，每处理50株烟，4次重复。菌剂于移栽时按30 L/hm2的用量均匀施于定植穴中，然后定植烟苗。处理依次为处理A：空白对照（不接种病原、不施用菌剂）；处理B：施用生防菌XGR，不接种病原。处理C：施用生防菌SHNA，不接种病原。处理D：施用复配菌剂，不接种病原。处理E：施用生防菌XGR，15 d后接种病原。处理F：施用生防菌SHNA，15 d后接种病原。处理G：施用复配菌剂，15 d后接种病原。处理H：只接种病原。处理I：施用生防菌FXJ，不接种病原。处理J：施用生防菌FXJ，接种病原。
在初烤前，每个处理随机测量15株健康烟叶的农艺性状，包括株高、茎围、叶片数和最大叶面积以及赤星病的发病率和病情指数。挂牌采烤烟叶采收烘干后统计各处理的烟叶产量，并统计烟叶等级。
2 结果与分析
2.1 生防菌对烟草生长发育的影响
2.1.1 生防菌对烟草株高的影响。由图1可知，处理D的平均株高最高达89.68 cm，而同样是接种复配菌剂15 d后接种病源的处理G的平均株高只有80.60 cm，说明病源能在一定程度上抑制烟草的生长。处理F的平均株高为87.27 cm，处理C的为84.77 cm，但处理C是接种SHNA 15 d后接种了病源，说明病源对SHNA菌株发生了一定的作用，处理B为82.65 cm，同样的处理E略低。处理I的平均株高为83.8 cm，15 d后接种病源的处理J略低，这几个处理相对于空白处理A都高，接种病源的处理H最低，只有78.4 cm。
图1 生防菌对烟草株高的影响
2.1.2 生防菌对烟草茎围的影响.由图2可知，处理F的茎围最大为9.4 cm，定植了SHNA 15 d后接种病源的处理C的茎围略低，为9.19。处理D的茎围为9.33 cm，同样定植了复配菌剂15 d后接种病源的处理G的茎围稍小，为9.2 cm。处理B的茎围为9.16 cm，接种XGR 15 d后接种病源的处理E为9.06。处理I的茎围是9.1 cm，接种FXJ 15 d后接种病源的处理J的茎围为9.06。空白处理的茎围9.06 cm，比前面的处理都低。直接种病源的处理H最低只有8.91 cm。
图2 生防菌对烟草茎围的影响
2.1.3 生防菌对烟草叶片数的影响。由图3可知，处理D长得最茂盛，叶片数为19.93，定植复配菌剂15 d后接种病源的处理G则为19.42。其次是接种SHNA的处理F为19.82，15 d后再接种病源的处理C为19.62，差异不显著。接种XGR的处理B的叶片数其次，为19.62，15 d后接种病源的处理E为19.18。接种FXJ的处理J的叶片数为19.32，处理I未接种病源的则是19.30，两者差异不显著。这些处理相对于空白处理都高，处理A的叶片数为18.88。只接种病源的处理I最低只有18.65。
图3 生防菌对烟草叶片数的影响
2.1.4 生防菌对烟草最大叶片叶面积的影响。由图4可知，接种XGR的处理B最大叶片叶面积最大为0.084 m2，而15 d后接种病源的处理E则为0.079，略低。其次為接种SHNA的处理C为0.083 m2，15 d后接种病源的处理F的最大叶叶面积则为0.078 m2，相对较小。施用复配菌剂的处理D为0.081 m2，15 d后接种病源的处理G为0.081 m2，差异不显著。接种FXJ的处理J最大叶片叶面积为0.079 m2，未接种病源的处理I为0.078，无显著差别。空白处理A相对前面各个处理都要低为18.88 m2。只接种病源的处理H为18.65 m2。
图4 生防菌对烟草最大叶片叶面积的影响
2.2 生防菌对烟叶产量和品质的影响
各处理烟叶成熟后正常烘烤，分类挑选，统计结果表明（表1），接种过复配菌剂的处理D产量最高达2 468.21 kg/hm2，比对照处理A高16.42%，15 d后接种病源的处理G次之，产量为2 371.13 kg/hm2，比对照高13.00%；接种生防菌SHNA的处理C产量为2 317.58 kg/hm2，比对照高10.97%，15 d后接种病原的处理F产量2 267.7 kg/hm2，比对照高9.03%；接种XGR处理B产量为2 216.21 kg/hm2，比对照高6.92%，15 d后接种病原的处理E产量2 178.71 kg/hm2，比对照高5.31%。与对照相比均达极显著水平。从烟叶品质上看，中上等烟比例最高的是施用过复配菌剂的处理D达66.56%，处理G次之为65.28%，均与对照处理A呈极显著差异；施用SHNA的处理C则为65.1%，处理F占62.58%，也与对照处理A呈极显著差异；施用XGR的处理B占63.86%，与对照处理A呈极显著差异，处理E占57.39%，与对照处理A无显著性差异。可以看出烟叶品质的差异变化与烟草产量变化趋势是一致的。
2.3 生防菌对烟叶抗赤星病的影响
由表2可知，各处理施用生防菌的烟叶其赤星病发病率与病情指数均低于空白处理A，处理C发病率和病情指数均最低，分别为16.5%和3.55，其次是处理G的22.5%和4.45，接下来是处理F的23.25%和4.48、处理B为25.75%和4.63、处理E的30%和6.45和处理D的31.5%及5.83。
3 小结
在烟叶移栽时接种生防菌，用清水浇透烟苗周围土壤方便生防菌定植于其中，烟草株高、茎围、叶片数和最大叶叶面积均比对照空白处理高，烤后烟叶产量和中上等烟所占比例也高，如接种过复配菌剂的处理D产量达2 468.21 kg/hm2，中上等烟比例占66.56%，赤星病发病率和病情指数相对于空白对照则普遍偏低。这几种生防菌在大田试验中对烟叶生长发育及抗赤星病等方面都具有较好的促进效果。该试验结果表明，几种生防菌对烟叶各方面的影响优劣从高到底分别是复配菌剂、SHNA、XGR和FXJ。
参考文献
[1] 石杰，严会会，刘惠民，等.L CMS/MS方法分析烟草中的3 8种农药残留[J].中国烟草学报，2011，17（4）：16-22.
[2] 王津军，文国松，丁金玲，等.烟草农药残留研究进展及降低烟叶农药残留的探讨[J].云南农业大学学报，2006，21（3）：329-332.
[3] 佟英.提高卷烟安全性促进烟草业健康发展[J].世界农业，2006（3）：46-51.
[4] 陈庆园，黄刚，商胜华.烟草农药残留研究进展[J].安徽农业科学，2008，36（11）：4575-4576.
[5] 雷丽萍，郭荣君，缪作清，等.微生物在烟草生产中应用研究进展[J].中国烟草学报，2006，8（4）：13-16.
[6] 赵荣艳，杨靖华，蒋士君.烟草病害生物防治研究进展[J].安徽农业科学，2006，34（22）：5918-5919.
2 468.21 kg/hm2 ，上等烟比例也最高，其他几种施用生防菌的处理也比空白处理高。[结论] 这几种生防菌对烟叶的生长发育及抗赤星病等方面具有较好的效果。
关键词 烟叶；生防菌；赤星病；产量
中图分类号 S572 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）08-02356-03
Study about the Influence of Several Biocontrol Microorganisms on the Growth and Resistance of Tobacco
ZOU Cheng，WEN Guosong et al
（Institute of Plant Protection， Yunnan Agricultural University， Kunming， Yunnan 650201）
Abstract [Objective] The aim was to study the influence of several biocontrol microorganisms on the growth and resistance of tobacco. [Method]Three kinds of biocontrol microorganisms named XGR， SHNA and FXJ from healthy tobacco leaves using confront culture at Yunnan Qujing tobacco growing areas were screened and separated.Three kinds of biocontrol microorganisms and compound inoculants of that to the field of tobacco production were applied. The height， stem girth， number of leaves and maximum leaf area before baking were measured. [Result]The result showed that the height， stem girth， number of leaves and maximum leaf area of treatment D that using compound inoculants without inoculation of pathogen was much higher respectively by 13.21%， 3.74%，6.15% and 8.55% compared with treatment blank control. The economical characters of other treatments with biocontrol microorganisms were higher than the contrast. The lowest disease incidence and disease index of red star disease was treatment C， respectively 16.5% and 3.55. The lower of disease incidence and disease index of red star disease were other treatments with biocontrol microorganisms. The highest of the output of tobacco was treatment D， 2 468.21 kg/hm2， the same with the proportion of superior leaves. The other treatments with biocontrol microorganisms were higher than treatment blank. [Conclusion] The several kinds of bio-control bacteria had good promotion effect on growth and development of tobacco leaf and red star disease resistance， etc.
Key words Tobacco； Biocontrol microorganism； Red star disease； Output of tobacco
當前烟草安全性问题已成为全社会越来越关注的焦点，而烟叶农药残留（以下简称农残）是影响安全性的一个重要因素，自然也备受关注，控制烟草中的农药残留量也日趋急迫和重要[1-2]。解决烟叶农药残留超标问题，应从合理使用农药和减少使用化学农药两方面人手。农业上重点是烟草优良品种的选育和降焦减害栽培技术，加快选育低焦油等安全性好的品种。工业上应加强产品改造新技术的研究。不断探讨新技术、新方法，以采用最新科技手段，来减少有害物质。降低有害成分，提高卷烟安全性，是烟草发展的必由之路[3-4]。目前有益微生物在烟草病虫害防治、烟草产量和品质提高等方面均取得了一定的进展，许多微生物农药和微生物肥料已在烟草生产实践中得到应用，并取得了明显的经济效益和社会效益。因此，大力开展生物防治研究对于农业可持续发展具有重要意义。烟草病害生物防治已成为近年来科技工作者研究较多和最具发展潜力的领域，受到国内外的普遍关注[5-6]。笔者利用从田间烟叶提取到的微生物作为材料，在温室大棚内证明有明显防治效果的基础上，进行大田试验，研究其对烟草生长发育和抗病性的影响。 1 材料与方法
1.1 微生物菌剂
分离自健康烟叶的芽孢杆菌微生物菌株，分别为SHNA、XGR和FXJ，及分离自赤星病病株的烟叶赤星病病源，保存于云南农业大学植物病理学实验室。
1.2 试验设计
试验地位于云南省曲靖市沾益县大坡乡耕德村委会，供试品种为当地主栽品种云97，前茬作物为冬闲地红壤旱地。采用标准化大棚漂浮育苗，烟苗于2013年4月21日统一按照株行距120 cm×55 cm，植株密度150.00 株/hm2移栽，试验地合计0.2 hm2。基肥按照75 kg/hm2农家肥、750 kg/hm2普钙、450 kg/hm2复合肥和150 kg/hm2硝酸钾标准施用，追肥则按照75 kg/hm2农家肥和75 kg/hm2硝酸钾追加。中耕管理于2013年6月15日进行，包括除草、统防和田间卫生，采用雨水和人工灌溉。病虫害方面喷施康福多农药、敌杀死、链霉素和甲霜灵锰锌。
共设10个处理，每处理50株烟，4次重复。菌剂于移栽时按30 L/hm2的用量均匀施于定植穴中，然后定植烟苗。处理依次为处理A：空白对照（不接种病原、不施用菌剂）；处理B：施用生防菌XGR，不接种病原。处理C：施用生防菌SHNA，不接种病原。处理D：施用复配菌剂，不接种病原。处理E：施用生防菌XGR，15 d后接种病原。处理F：施用生防菌SHNA，15 d后接种病原。处理G：施用复配菌剂，15 d后接种病原。处理H：只接种病原。处理I：施用生防菌FXJ，不接种病原。处理J：施用生防菌FXJ，接种病原。
在初烤前，每个处理随机测量15株健康烟叶的农艺性状，包括株高、茎围、叶片数和最大叶面积以及赤星病的发病率和病情指数。挂牌采烤烟叶采收烘干后统计各处理的烟叶产量，并统计烟叶等级。
2 结果与分析
2.1 生防菌对烟草生长发育的影响
2.1.1 生防菌对烟草株高的影响。由图1可知，处理D的平均株高最高达89.68 cm，而同样是接种复配菌剂15 d后接种病源的处理G的平均株高只有80.60 cm，说明病源能在一定程度上抑制烟草的生长。处理F的平均株高为87.27 cm，处理C的为84.77 cm，但处理C是接种SHNA 15 d后接种了病源，说明病源对SHNA菌株发生了一定的作用，处理B为82.65 cm，同样的处理E略低。处理I的平均株高为83.8 cm，15 d后接种病源的处理J略低，这几个处理相对于空白处理A都高，接种病源的处理H最低，只有78.4 cm。
图1 生防菌对烟草株高的影响
2.1.2 生防菌对烟草茎围的影响.由图2可知，处理F的茎围最大为9.4 cm，定植了SHNA 15 d后接种病源的处理C的茎围略低，为9.19。处理D的茎围为9.33 cm，同样定植了复配菌剂15 d后接种病源的处理G的茎围稍小，为9.2 cm。处理B的茎围为9.16 cm，接种XGR 15 d后接种病源的处理E为9.06。处理I的茎围是9.1 cm，接种FXJ 15 d后接种病源的处理J的茎围为9.06。空白处理的茎围9.06 cm，比前面的处理都低。直接种病源的处理H最低只有8.91 cm。
图2 生防菌对烟草茎围的影响
2.1.3 生防菌对烟草叶片数的影响。由图3可知，处理D长得最茂盛，叶片数为19.93，定植复配菌剂15 d后接种病源的处理G则为19.42。其次是接种SHNA的处理F为19.82，15 d后再接种病源的处理C为19.62，差异不显著。接种XGR的处理B的叶片数其次，为19.62，15 d后接种病源的处理E为19.18。接种FXJ的处理J的叶片数为19.32，处理I未接种病源的则是19.30，两者差异不显著。这些处理相对于空白处理都高，处理A的叶片数为18.88。只接种病源的处理I最低只有18.65。
图3 生防菌对烟草叶片数的影响
2.1.4 生防菌对烟草最大叶片叶面积的影响。由图4可知，接种XGR的处理B最大叶片叶面积最大为0.084 m2，而15 d后接种病源的处理E则为0.079，略低。其次為接种SHNA的处理C为0.083 m2，15 d后接种病源的处理F的最大叶叶面积则为0.078 m2，相对较小。施用复配菌剂的处理D为0.081 m2，15 d后接种病源的处理G为0.081 m2，差异不显著。接种FXJ的处理J最大叶片叶面积为0.079 m2，未接种病源的处理I为0.078，无显著差别。空白处理A相对前面各个处理都要低为18.88 m2。只接种病源的处理H为18.65 m2。
图4 生防菌对烟草最大叶片叶面积的影响
2.2 生防菌对烟叶产量和品质的影响
各处理烟叶成熟后正常烘烤，分类挑选，统计结果表明（表1），接种过复配菌剂的处理D产量最高达2 468.21 kg/hm2，比对照处理A高16.42%，15 d后接种病源的处理G次之，产量为2 371.13 kg/hm2，比对照高13.00%；接种生防菌SHNA的处理C产量为2 317.58 kg/hm2，比对照高10.97%，15 d后接种病原的处理F产量2 267.7 kg/hm2，比对照高9.03%；接种XGR处理B产量为2 216.21 kg/hm2，比对照高6.92%，15 d后接种病原的处理E产量2 178.71 kg/hm2，比对照高5.31%。与对照相比均达极显著水平。从烟叶品质上看，中上等烟比例最高的是施用过复配菌剂的处理D达66.56%，处理G次之为65.28%，均与对照处理A呈极显著差异；施用SHNA的处理C则为65.1%，处理F占62.58%，也与对照处理A呈极显著差异；施用XGR的处理B占63.86%，与对照处理A呈极显著差异，处理E占57.39%，与对照处理A无显著性差异。可以看出烟叶品质的差异变化与烟草产量变化趋势是一致的。
2.3 生防菌对烟叶抗赤星病的影响
由表2可知，各处理施用生防菌的烟叶其赤星病发病率与病情指数均低于空白处理A，处理C发病率和病情指数均最低，分别为16.5%和3.55，其次是处理G的22.5%和4.45，接下来是处理F的23.25%和4.48、处理B为25.75%和4.63、处理E的30%和6.45和处理D的31.5%及5.83。
3 小结
在烟叶移栽时接种生防菌，用清水浇透烟苗周围土壤方便生防菌定植于其中，烟草株高、茎围、叶片数和最大叶叶面积均比对照空白处理高，烤后烟叶产量和中上等烟所占比例也高，如接种过复配菌剂的处理D产量达2 468.21 kg/hm2，中上等烟比例占66.56%，赤星病发病率和病情指数相对于空白对照则普遍偏低。这几种生防菌在大田试验中对烟叶生长发育及抗赤星病等方面都具有较好的促进效果。该试验结果表明，几种生防菌对烟叶各方面的影响优劣从高到底分别是复配菌剂、SHNA、XGR和FXJ。
参考文献
[1] 石杰，严会会，刘惠民，等.L CMS/MS方法分析烟草中的3 8种农药残留[J].中国烟草学报，2011，17（4）：16-22.
[2] 王津军，文国松，丁金玲，等.烟草农药残留研究进展及降低烟叶农药残留的探讨[J].云南农业大学学报，2006，21（3）：329-332.
[3] 佟英.提高卷烟安全性促进烟草业健康发展[J].世界农业，2006（3）：46-51.
[4] 陈庆园，黄刚，商胜华.烟草农药残留研究进展[J].安徽农业科学，2008，36（11）：4575-4576.
[5] 雷丽萍，郭荣君，缪作清，等.微生物在烟草生产中应用研究进展[J].中国烟草学报，2006，8（4）：13-16.
[6] 赵荣艳，杨靖华，蒋士君.烟草病害生物防治研究进展[J].安徽农业科学，2006，34（22）：5918-5919.