论文部分内容阅读
探索获得优良的新型普鲁兰酶基因，丰富普鲁兰酶理论，对实现普鲁兰酶国产化具有重要意义。分析GenBank数据库中蜡样芽胞杆菌假定I型、II型普鲁兰酶基因序列，从实验室保藏的蜡样芽胞杆茵Bacilluscereus GXBC-3中克隆得到3个普鲁兰酶基因pulA、puIB、pulC，并分别导入大肠杆菌进行胞内诱导表达。纯化重组酶酶学性质研究表明重组酶PuLA能水解a-1,6-和a-1,4-糖苷键，为II型普鲁兰酶，以普鲁兰糖为底物时，最适反应温度及pH分别为40℃和6.5，比活力为32.89 U／mg；以可溶性淀粉为底物时，最适反应温度及pH分别为50℃和7.0，比活力为25.71 u／mg。重组酶PulB和pulc二者均只能水解a-1,6-糖苷键，为I型普鲁兰酶，以普鲁兰糖为底物时，其最适反应温度及pH分别为45℃、7.0和45℃、6.5，比活力分别为228.54 u／mg和229.65 U/mg。