蒜酶HPLC定性检测方法的建立及应用

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采用高效分子排阻色谱法定性测定大蒜中蒜酶.采用TSK gel G3000SWXL(7.8 mm × 300 mm,7 μm)高效液相色谱法色谱柱,流动相为0.1 mol/L磷酸盐缓冲液,柱温25 ℃,流速0.5 mg/mL,检测波长325 nm,进样量15 μL.结果表明,经提取纯化后的蒜酶提取物中蒜酶含量较高,而蒜酶亚基含量明显降低;不同产地大蒜冻干粉和鲜蒜中均含有蒜酶二聚体和蒜酶亚基,它们分别在14 min和19 min处出峰,并且不同产地大蒜蒜酶含量有较大差异.方法检测大蒜中蒜酶时,可同时检测到蒜酶峰和蒜酶亚基峰,且不受其他蛋白的影响.用于测定鲜蒜和纯化后蒜酶中的二聚体及亚基,该方法简便易行,且结果准确可靠.
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