论文部分内容阅读
【摘要】目的：观察Sprague-Dawley(SD)大鼠骨骼肌钝挫伤后外用三色膏对组织修复过程中血清MDA、LDH活性的影响。方法：雄性SD大鼠腓肠肌钝挫伤后不同时期处死取材分别作血清乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的检测。结果：伤后第3、5、10、14天三色膏均可持续降低大鼠血清LDH和MDA。结论：三色膏能促进骨骼肌损伤后血清酶活性的正常恢复。
【关键词】三色膏血清乳酸脱氢酶(LDH)血清丙二醛(MDA)骨骼肌损伤修复
Serum MDA，LDH Activity of the Effect of Sansegao For Skeletal Muscles Healing Following Contusion
Wu Junhao1Zhou Chun1Wang Xiang2
【Abstract】Objective：To investigate the effect of serum MDA,LDH activity during regeneration following skeletal muscles contusion in Sprague-Dawley(SD)rats．Methods Male SD rats were used to make contusion healing model and were killed in different time specimens possessed for serum MDA and serum LDH activity determine．Results Serum MDA and serum LDH activity can be declined by Sansegao at day 3、5、10、14 after injury．Conclusions Serum MDA and serum LDH activity can be declined by Sansegao at day 3、5、10、14 after injury.Conclusions Serum MDA and LDH activity can be declined by San segao for skeletal muscles healing following contusion．
【Keywords】Sansegaoserum LDHserum MDAskeletal musclecontusionheal
1材料
1.1药物:三色膏由上海黄浦区中心医院提供，扶他林乳胶剂为诺华公司产品，产品批号：X0113。
1.2实验动物和分组:雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，体重180～220克，购自上海西普尔——必凯实验动物有限公司，动物合格证号：SCXK(沪)2003-0002。大鼠随机分为损伤模型组，三色膏治疗组和扶他林组，每组30只，另设本底对照组6只。
2实验方法
2.1实验大鼠腓肠肌损伤造模方法:按照文献造模方法［1］，雄性SD大鼠，氯胺酮腹腔麻醉(30mg／Kg体重)，重物下落导致一次击打伤，致伤位置为右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)，致伤物为一段固体木质圆柱体，打击面直径为1厘米，下落物体长20厘米，重620克，从40厘米高处落下，重力6．08N，动能2．43J。
2.2处理方法:大鼠造模后，三色膏组动物腓肠肌处涂擦药膏，敷以透气棉纸，并用透气胶布包扎固定，隔天换药一次。扶他林组腓肠肌处涂抹扶他林乳胶剂，每次轻轻揉擦10分钟，每天揉擦3次。
2.3血清乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的检测:各组大鼠随机抽取6只，分别于造模后l天，3天，5天，10天，14天处死，腹主动脉取血6ml，37℃水浴，3500rpm，离心20分钟，取血清备用。LDH和MDA试剂盒由南京建成生物有限公司提供，严格按照说明书进行操作。
3统计检验
采用SPSSll．5统计学专用分析软件进行统计分析，所有测定数据以均值±标准差(X±SD)表示，ANOVA比较组间差异，GLM比较组内差异，P<0．05为有统计学差异。
4结果
4.1药物对大鼠血清LDH影响的结果:结果提示造模后第一天血清LDH的值明显升高，各组与本底组相比有统计学差异；GLM分析提示三色膏，扶他林持续降低大鼠血清LDH，且与模型组相比有统计学差异。见表1。
4.2药物对大鼠血清MDA影响的结果:结果提示造模后第一天血清MDA的值明显升高,各组与本底组相比有统计学差异;统计分析提示三色膏,扶他林均可持续降低大鼠血清MDA,且与模型组相比有统计学差异。三色膏组与扶他林组比较无统计学差异。见表2。
5讨论
骨骼肌运动创伤有钝挫伤、拉伤、撕裂伤等多种类型，其中以骨骼肌钝挫伤在对抗性和接触性体育运动中最为常见［2］。钝挫伤可导致结缔组织及各种肌细胞成分包括肌膜、肌原纤维和细胞骨架的破坏。机械性损伤后，骨骼肌内氧化应激会随着中性粒细胞和巨噬细胞的出理而增强。炎性浸润产生的自由基可损伤脂质膜并导致细胞坏死［3］［4］。这些自由基可与细胞各种成分，如卵磷脂、 蛋白质、核酸等发生反应，造成细胞结构损伤和功能代谢障碍。脂质过氧化是肌肉损伤过程中的一种重要机制。丙二醛(MDA)是一种源自多不饱和脂肪酸的主要的二次氧化产物，是脂质过氧化物的终产物之一，因此丙二醛的检测被视为细胞膜结构性氧化损伤的指标。丙二醛的升高提示自由基反应引起的脂质过氧化增强。在受损组织中可明显升高［5］。
本研究利用骨骼肌钝挫伤动物模型，观察三色膏对骨骼肌钝挫伤导致的过氧化损伤的拮抗作用，为促进骨骼肌钝挫伤后肌肉修复提供有效参考措施。实验中造模后血清丙二醛明显升高提示自由基产生增加，氧化应激增强。血清生化检测结果提示三色膏可以显著降低反映组织损伤程度的指标MDA，提示三色膏能减缓由于钝挫伤引起的骨骼肌损伤，促进骨骼肌修复。
乳酸脱氢酶(LDH)来源于组织细胞，当细胞受到损伤时，酶从细胞内逸出进入细胞外液，引起血清中酶活性的增加［6］。骨骼肌损伤后血清肌肉酶活性的升高是肌纤维损伤的间接证据，一般以血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)变化较显著［7］。部分研究表明骨骼肌损伤早期LDH、CK的升高最为显著，骨骼肌损伤越严重，血清酶变化越明显［8］。随着损伤的恢复，LDH也会逐渐下降至正常水平。实验造模后血清乳酸脱氢酶明显升高提示肌纤维损伤，酶进入细胞外液，血清生化检测结果提示三色膏可以显著降低反映组织损伤程度的指标LDH，提示三色膏能减缓由于钝挫伤引起的骨骼肌损伤，促进骨骼肌修复。
参考文献
1李云霞、陈世益、马昕等.外源性胰岛素样生长因子促进骨骼肌损伤修复的实验研究.中华物理医学与康复杂志，2002年，卷24，期3，147～151
2Oberley LW,Buettner GR．Role of superoxide dismutase in cancer：a review．Cancer res1979,39(4)：1141
3HalliwellB．Chiric'o S．Lipid peroxidation：its mechanism．Measurement and singnificance．Am JClin Nutr1993；57：715S-25S
4SalaA．Recio MC．Schinella GR．et a1．Assessment of the anti-inflammatory activand free radical scavenger activity of tiliroside．Eur J Phar 2003：416：53-61
5王立金、王慧、方玉荣．自由基在骨骼肌缺血再灌注损伤中作用的实验性研究．中国工业医学杂志，2004，17(2)：68-70
6全国体育学院教材委员会．运动生物化学．人民体育出版社．1995
7王建芳等．运动对血清和肌红蛋白的影响．中国运动医学杂志．1998；7(1)：46-48
8金花等．运动性骨骼肌损伤时某些组织学、生化学及力学变化．广州体育学院学报．1997；17(4)：41-43
9宋济昊．舒筋活血类中药对大鼠急性骨骼肌拉伤后血清CK、LDH活性的影响．中国运动医学杂志，2000，19(3)：287-290
作者单位：200002上海市黄浦区中心医院1
201203上海中医药大学骨伤科研究所2
【关键词】三色膏血清乳酸脱氢酶(LDH)血清丙二醛(MDA)骨骼肌损伤修复
Serum MDA，LDH Activity of the Effect of Sansegao For Skeletal Muscles Healing Following Contusion
Wu Junhao1Zhou Chun1Wang Xiang2
【Abstract】Objective：To investigate the effect of serum MDA,LDH activity during regeneration following skeletal muscles contusion in Sprague-Dawley(SD)rats．Methods Male SD rats were used to make contusion healing model and were killed in different time specimens possessed for serum MDA and serum LDH activity determine．Results Serum MDA and serum LDH activity can be declined by Sansegao at day 3、5、10、14 after injury．Conclusions Serum MDA and serum LDH activity can be declined by Sansegao at day 3、5、10、14 after injury.Conclusions Serum MDA and LDH activity can be declined by San segao for skeletal muscles healing following contusion．
【Keywords】Sansegaoserum LDHserum MDAskeletal musclecontusionheal
1材料
1.1药物:三色膏由上海黄浦区中心医院提供，扶他林乳胶剂为诺华公司产品，产品批号：X0113。
1.2实验动物和分组:雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，体重180～220克，购自上海西普尔——必凯实验动物有限公司，动物合格证号：SCXK(沪)2003-0002。大鼠随机分为损伤模型组，三色膏治疗组和扶他林组，每组30只，另设本底对照组6只。
2实验方法
2.1实验大鼠腓肠肌损伤造模方法:按照文献造模方法［1］，雄性SD大鼠，氯胺酮腹腔麻醉(30mg／Kg体重)，重物下落导致一次击打伤，致伤位置为右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)，致伤物为一段固体木质圆柱体，打击面直径为1厘米，下落物体长20厘米，重620克，从40厘米高处落下，重力6．08N，动能2．43J。
2.2处理方法:大鼠造模后，三色膏组动物腓肠肌处涂擦药膏，敷以透气棉纸，并用透气胶布包扎固定，隔天换药一次。扶他林组腓肠肌处涂抹扶他林乳胶剂，每次轻轻揉擦10分钟，每天揉擦3次。
2.3血清乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的检测:各组大鼠随机抽取6只，分别于造模后l天，3天，5天，10天，14天处死，腹主动脉取血6ml，37℃水浴，3500rpm，离心20分钟，取血清备用。LDH和MDA试剂盒由南京建成生物有限公司提供，严格按照说明书进行操作。
3统计检验
采用SPSSll．5统计学专用分析软件进行统计分析，所有测定数据以均值±标准差(X±SD)表示，ANOVA比较组间差异，GLM比较组内差异，P<0．05为有统计学差异。
4结果
4.1药物对大鼠血清LDH影响的结果:结果提示造模后第一天血清LDH的值明显升高，各组与本底组相比有统计学差异；GLM分析提示三色膏，扶他林持续降低大鼠血清LDH，且与模型组相比有统计学差异。见表1。
4.2药物对大鼠血清MDA影响的结果:结果提示造模后第一天血清MDA的值明显升高,各组与本底组相比有统计学差异;统计分析提示三色膏,扶他林均可持续降低大鼠血清MDA,且与模型组相比有统计学差异。三色膏组与扶他林组比较无统计学差异。见表2。
5讨论
骨骼肌运动创伤有钝挫伤、拉伤、撕裂伤等多种类型，其中以骨骼肌钝挫伤在对抗性和接触性体育运动中最为常见［2］。钝挫伤可导致结缔组织及各种肌细胞成分包括肌膜、肌原纤维和细胞骨架的破坏。机械性损伤后，骨骼肌内氧化应激会随着中性粒细胞和巨噬细胞的出理而增强。炎性浸润产生的自由基可损伤脂质膜并导致细胞坏死［3］［4］。这些自由基可与细胞各种成分，如卵磷脂、 蛋白质、核酸等发生反应，造成细胞结构损伤和功能代谢障碍。脂质过氧化是肌肉损伤过程中的一种重要机制。丙二醛(MDA)是一种源自多不饱和脂肪酸的主要的二次氧化产物，是脂质过氧化物的终产物之一，因此丙二醛的检测被视为细胞膜结构性氧化损伤的指标。丙二醛的升高提示自由基反应引起的脂质过氧化增强。在受损组织中可明显升高［5］。
本研究利用骨骼肌钝挫伤动物模型，观察三色膏对骨骼肌钝挫伤导致的过氧化损伤的拮抗作用，为促进骨骼肌钝挫伤后肌肉修复提供有效参考措施。实验中造模后血清丙二醛明显升高提示自由基产生增加，氧化应激增强。血清生化检测结果提示三色膏可以显著降低反映组织损伤程度的指标MDA，提示三色膏能减缓由于钝挫伤引起的骨骼肌损伤，促进骨骼肌修复。
乳酸脱氢酶(LDH)来源于组织细胞，当细胞受到损伤时，酶从细胞内逸出进入细胞外液，引起血清中酶活性的增加［6］。骨骼肌损伤后血清肌肉酶活性的升高是肌纤维损伤的间接证据，一般以血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)变化较显著［7］。部分研究表明骨骼肌损伤早期LDH、CK的升高最为显著，骨骼肌损伤越严重，血清酶变化越明显［8］。随着损伤的恢复，LDH也会逐渐下降至正常水平。实验造模后血清乳酸脱氢酶明显升高提示肌纤维损伤，酶进入细胞外液，血清生化检测结果提示三色膏可以显著降低反映组织损伤程度的指标LDH，提示三色膏能减缓由于钝挫伤引起的骨骼肌损伤，促进骨骼肌修复。
参考文献
1李云霞、陈世益、马昕等.外源性胰岛素样生长因子促进骨骼肌损伤修复的实验研究.中华物理医学与康复杂志，2002年，卷24，期3，147～151
2Oberley LW,Buettner GR．Role of superoxide dismutase in cancer：a review．Cancer res1979,39(4)：1141
3HalliwellB．Chiric'o S．Lipid peroxidation：its mechanism．Measurement and singnificance．Am JClin Nutr1993；57：715S-25S
4SalaA．Recio MC．Schinella GR．et a1．Assessment of the anti-inflammatory activand free radical scavenger activity of tiliroside．Eur J Phar 2003：416：53-61
5王立金、王慧、方玉荣．自由基在骨骼肌缺血再灌注损伤中作用的实验性研究．中国工业医学杂志，2004，17(2)：68-70
6全国体育学院教材委员会．运动生物化学．人民体育出版社．1995
7王建芳等．运动对血清和肌红蛋白的影响．中国运动医学杂志．1998；7(1)：46-48
8金花等．运动性骨骼肌损伤时某些组织学、生化学及力学变化．广州体育学院学报．1997；17(4)：41-43
9宋济昊．舒筋活血类中药对大鼠急性骨骼肌拉伤后血清CK、LDH活性的影响．中国运动医学杂志，2000，19(3)：287-290
作者单位：200002上海市黄浦区中心医院1
201203上海中医药大学骨伤科研究所2