固化金属离子亲和层析富集磷酸化多肽方法的选择及优化

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在磷酸化蛋白质组学研究中,根据是否需要对待富集样品进行甲酯化处理,可将固化金属离子亲和层析(IMAC)方法分为两类,即需要甲酯化处理的IMAC方法(ME—IMAC)和不需要甲酯化处理的IMAC方法(Non—ME—IMAC)。要实现对磷酸化多肽的有效富集和鉴定,就必须对富集方法进行选择和优化。利用基质辅助激光解析离子化串联飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)对两种方法富集的磷酸化多肽进行了比较研究。结果表明,ME—IMAC方法容易发生样品丢失,质谱结果的分析也比较复杂,而Non—ME—IMAC方法则不仅
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