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摘要：目的：探讨和分析使用高效液相色谱仪测定泰魄颗粒中阿魏酸的含量。
方法：使用高效液相色谱仪对泰魄颗粒中的阿魏酸含量进行测定。
结果：记Y为阿魏酸的峰面积，X（ug）为进样量，则Y与X之间的回归关系为：Y=2513X+26.4821，线性范围为2.1ug/ml-12.3ug/ml，相关系数为r=0.999。
结论：该检测方法简单，灵敏度高，准确率高，可以用于相关药物中阿魏酸含量的检测中。
关键词：高效液相色谱 阿魏酸 泰魄颗粒
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.051
By high performance liquid chromatography determination of Thai angular particles of ferulic acid content
Tian Jian
Abstract：Objective：To investigate and analysis using high performance liquid as the determination of the content of ferulic acid in taipo granules chromatograph.
Methods：Using high-performance liquid chromatography on the content of ferulic acid in taipo granules was determined.
Result： Y is the peak area of ferulic acid， X （UG） as the sample， the regression relationship between Y and X： Y=2513X+26.4821， the linear rang ：2.1ug/ml-12.3ug/ml，the correlation coefficients：r=0.999.
Conclusion：The method is simple， high sensitivity， high accuracy rate.
Keywords：High performance liquid chromatography Ferulic acid Taipo granules
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2013）08-0054-02
泰魄颗粒是一种由熟地、白术、枳壳、生地、郁李仁、当归、瓜蒌仁等成分组成颗粒药物，有润肠通便、滋阴养血之功效[1-3]。临床上常常使用该种药物治疗老年性或习惯性便秘，该药物能调节虚火，润肠降火，具有很好的治疗疗效[1，2]。为了保证该种药物的治疗疗效和药物质量，本文对泰魄颗粒中的有效组成成分阿魏酸的含量进行了测定，测定使用方法为高效液相色谱法，先将研究和测量分析过程整理如下。
1 材料与测量仪器
1.1 仪器。测量泰魄颗粒中所使用的仪器有以下几种：高效液相色谱仪（型号：LC-IOAP）、紫外分光检测器（型号：UV2930）、超声处理器（型号：kh-250db）、光学读书分析天平（型号：TG328A）。
1.2 试药。相关测定药物对照样品：阿魏酸样品；提供方：中国药品生物制品检定所；药品批号：110773-10254。测定药物：泰魄颗粒；纯分两种，一种为色谱纯（检测使用的甲醇），另外一种为分析纯（其他检测中使用到的试剂，水为超纯水）。
2 测定方法和结果
2.1 测定色谱条件。使用的色谱柱为功能较为完善的依立特ODS2柱；使用的流动相溶液为的浓度为1%冰醋酸-甲醇溶液，二者比例为70：30，溶液流动速率为每分钟1.0ml，检测波长设定为320nm，进样量数据设定为5ul。色谱柱所在温度为室温；根据阿魏酸相关计算法则以及理论塔板数进行相关计算结果应该不小于3000，相关分离度至少在2以上。根据上述设定好的色谱条件，将相关部门提供的样品中所含有的组成成分阿魏酸能得到充分分离，且对照样品和阴性对照样品溶液之间并没有峰重叠。
2.2 对照样品溶液的制定。精密称量合适量的阿魏酸对照药品，称取上述样品之前，需要用P2O5（五氧化二磷）干燥24小时才能称取，称取之后用浓度为70%的甲醇溶液进行溶解，并将溶解样品液制成浓度为12.5ug/ml的溶液，该溶液既是对照样品溶液。样品及对照品的高效液相色谱示意图如下图所示（见图1～2）。
2.3 检测样品溶液的制定。同样精密称取1.5g的使用P2O5干燥24小时候的样品药品，并将称取后的样品放置在容量瓶中，向容量瓶中加入合适剂量的浓度为70%的甲醇溶液进行溶解，充分震荡容量瓶，放置等待充分溶解并定容，取上层清夜随后使用0.40um的滤膜对容量瓶中的溶液进行过滤。
2.4 阴性溶液的制定。按照制定好的处方精密称取除当归以外的各种药材，通过相关的制作工艺进行相关组成成分的提取，依照上述方法制定成缺少当归药物的阴性药品溶液；精密量取5ml上述制定好的阴性药品溶液，依照上述检测样品溶液的制定方法，制成相关的阴性溶液。通过依照上述色谱条件进行相关分析，发现在与对照样品相对应的保留时间位置，并未出现无显著的其他峰值，检测结果判定为：该试验不会受到阴性样品的干扰。
2.5 测定法。取一定量的上述检测样品溶液和对照样品溶液，分别精密量取5ul的上述两种样品溶液，将量取后的样品溶液分别诸如液相色谱仪中，以上述色谱条件进行相关分析和测定，依据相关规定以阿魏酸的峰面积为基础条件和相关的外标记法来对检测样品中阿魏酸的含量进行计算。 2.6 相关线性关系的测定。取一定量的阿魏酸对照样品溶液，并精密量取10mg上述溶液，将量取后样品溶液置入棕色容量瓶中，容量瓶的容量为25ml，并向其中加入适量的流动相进行充分溶解并稀释，直至刻度，随后摇晃均匀，制定成浓度为400ug/ml的对照样品溶液以备用。分别精密吸取0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml的上述400ug/ml备用对照样品溶液并放入容量为100ml的棕色容量瓶中，随后添加适量的流动相进行稀释直至刻度线，摇晃均匀，随后进行进样测定。设横坐标（X）为对照样品溶液的进样溶度，纵坐标（Y）为峰面积积分值，进行相关曲线的绘制，回归方程为：Y=2513X+26.4821，相关系数r为0.999。相关结果分析表明：阿魏酸的进样浓度在2.1ug/ml-12.3ug/ml之间，且发现阿魏酸峰面积和进样溶度之间呈现正面的线性关系。
2.7 精密度检测试验。取一定量的上述定制好的测定样品溶液和对照样品溶液（浓度为6.0ug/ml），分别精密吸取上述两种样品溶液各5ul，对上述取样溶液分别进行6次重复进样，并记录色谱图的相关数据，测定和记录阿魏酸的面积，其中RSD为0.53%，这说明仪器精密性能良好。
2.8 稳定性检测试验。精密吸取5ul的检测样品溶液，放置0h、4h、8h、12h、16h、24h后分别进行一次测定，相关峰面积RSD的结果为0.72%，这说明24h内检测样品溶液具有一定的稳定性。
2.9 重现性检测实验。取合适量度的检测药品溶液，对同样批次的取样溶液实行平行检测，检测次数为6次，并根据相关算法来计算溶液中阿魏酸的含定量。相关结果显示：6次平行检测所计算出平均阿魏酸含量和RSD分别为42.59ug/ml和1.01%。
2.10 加样回收率测定试验。精密量取2ml上述已知阿魏酸含量的检测样品溶液（42.59ug/ml），一共量取6份，向每份量取样品中都精密添加2ml的阿魏酸对照样品溶液，根据上述测定样品溶液的制定方法，制成相关的检测对照样品溶液，随后进行相关测定。根据上述试验测定得出的结果和投料量来计算相关的回收率。结果测得的平均回收率和RSD为98.39%和0.85%。
综上，对上述四种指标进行对比总结，详细结果见下表1。
3 讨论
相关试验表明，用70%甲醇、纯甲醇、纯水等试剂分别稀释检测样品溶液，最后三种稀释液进行相关测定结果表明测定阿魏酸面积最大为70%甲醇稀释样品后的溶液，不会受到杂质峰的干扰，所以常常选用70%的甲醇溶液进行相关稀释[1]。
阿魏酸属于一种弱酸化合物，较易分离，因此在流动相中添加少量的弱酸物质可以对相关峰形进行改善，因此常常加入浓度为1%冰醋酸-甲醇溶液（70∶30）来进行相关调整，改善溶液测定中阿魏酸的峰形[2，3]。另外，需要注意的是阿魏酸的光稳定性和热稳定性较差，因此保存方式要得当[1-3]。
本文相关检测研究表明，使用高效液相色谱测定法来检测泰魄颗粒中组成成分阿魏酸的含量，检测方法简单，重现性、精密度、稳定性好，能用于泰魄颗粒的含量检测中。
参考文献
[1] 涂传发，王丽君.阿魏酸哌嗪与贝那普利联用对早期糖尿病肾病患者尿白蛋白排泄率的影响[J].药学实践杂志，2013（01）：49-50
[2] 王宏天，马继伟.内皮素拮抗剂阿魏酸钠联合奥美沙坦治疗早期糖尿病肾病的研究[J].中国中西医结合肾病杂志，2012（11）：981-983
[3] 李学敏.新型多功能二聚体他克林-6-阿魏酸在体外和体内均能抑制淀粉样β肽诱导的阿尔茨海默病相关病变[J].中国病理生理杂志，2012（11）：1942-1942
方法：使用高效液相色谱仪对泰魄颗粒中的阿魏酸含量进行测定。
结果：记Y为阿魏酸的峰面积，X（ug）为进样量，则Y与X之间的回归关系为：Y=2513X+26.4821，线性范围为2.1ug/ml-12.3ug/ml，相关系数为r=0.999。
结论：该检测方法简单，灵敏度高，准确率高，可以用于相关药物中阿魏酸含量的检测中。
关键词：高效液相色谱 阿魏酸 泰魄颗粒
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.051
By high performance liquid chromatography determination of Thai angular particles of ferulic acid content
Tian Jian
Abstract：Objective：To investigate and analysis using high performance liquid as the determination of the content of ferulic acid in taipo granules chromatograph.
Methods：Using high-performance liquid chromatography on the content of ferulic acid in taipo granules was determined.
Result： Y is the peak area of ferulic acid， X （UG） as the sample， the regression relationship between Y and X： Y=2513X+26.4821， the linear rang ：2.1ug/ml-12.3ug/ml，the correlation coefficients：r=0.999.
Conclusion：The method is simple， high sensitivity， high accuracy rate.
Keywords：High performance liquid chromatography Ferulic acid Taipo granules
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2013）08-0054-02
泰魄颗粒是一种由熟地、白术、枳壳、生地、郁李仁、当归、瓜蒌仁等成分组成颗粒药物，有润肠通便、滋阴养血之功效[1-3]。临床上常常使用该种药物治疗老年性或习惯性便秘，该药物能调节虚火，润肠降火，具有很好的治疗疗效[1，2]。为了保证该种药物的治疗疗效和药物质量，本文对泰魄颗粒中的有效组成成分阿魏酸的含量进行了测定，测定使用方法为高效液相色谱法，先将研究和测量分析过程整理如下。
1 材料与测量仪器
1.1 仪器。测量泰魄颗粒中所使用的仪器有以下几种：高效液相色谱仪（型号：LC-IOAP）、紫外分光检测器（型号：UV2930）、超声处理器（型号：kh-250db）、光学读书分析天平（型号：TG328A）。
1.2 试药。相关测定药物对照样品：阿魏酸样品；提供方：中国药品生物制品检定所；药品批号：110773-10254。测定药物：泰魄颗粒；纯分两种，一种为色谱纯（检测使用的甲醇），另外一种为分析纯（其他检测中使用到的试剂，水为超纯水）。
2 测定方法和结果
2.1 测定色谱条件。使用的色谱柱为功能较为完善的依立特ODS2柱；使用的流动相溶液为的浓度为1%冰醋酸-甲醇溶液，二者比例为70：30，溶液流动速率为每分钟1.0ml，检测波长设定为320nm，进样量数据设定为5ul。色谱柱所在温度为室温；根据阿魏酸相关计算法则以及理论塔板数进行相关计算结果应该不小于3000，相关分离度至少在2以上。根据上述设定好的色谱条件，将相关部门提供的样品中所含有的组成成分阿魏酸能得到充分分离，且对照样品和阴性对照样品溶液之间并没有峰重叠。
2.2 对照样品溶液的制定。精密称量合适量的阿魏酸对照药品，称取上述样品之前，需要用P2O5（五氧化二磷）干燥24小时才能称取，称取之后用浓度为70%的甲醇溶液进行溶解，并将溶解样品液制成浓度为12.5ug/ml的溶液，该溶液既是对照样品溶液。样品及对照品的高效液相色谱示意图如下图所示（见图1～2）。
2.3 检测样品溶液的制定。同样精密称取1.5g的使用P2O5干燥24小时候的样品药品，并将称取后的样品放置在容量瓶中，向容量瓶中加入合适剂量的浓度为70%的甲醇溶液进行溶解，充分震荡容量瓶，放置等待充分溶解并定容，取上层清夜随后使用0.40um的滤膜对容量瓶中的溶液进行过滤。
2.4 阴性溶液的制定。按照制定好的处方精密称取除当归以外的各种药材，通过相关的制作工艺进行相关组成成分的提取，依照上述方法制定成缺少当归药物的阴性药品溶液；精密量取5ml上述制定好的阴性药品溶液，依照上述检测样品溶液的制定方法，制成相关的阴性溶液。通过依照上述色谱条件进行相关分析，发现在与对照样品相对应的保留时间位置，并未出现无显著的其他峰值，检测结果判定为：该试验不会受到阴性样品的干扰。
2.5 测定法。取一定量的上述检测样品溶液和对照样品溶液，分别精密量取5ul的上述两种样品溶液，将量取后的样品溶液分别诸如液相色谱仪中，以上述色谱条件进行相关分析和测定，依据相关规定以阿魏酸的峰面积为基础条件和相关的外标记法来对检测样品中阿魏酸的含量进行计算。 2.6 相关线性关系的测定。取一定量的阿魏酸对照样品溶液，并精密量取10mg上述溶液，将量取后样品溶液置入棕色容量瓶中，容量瓶的容量为25ml，并向其中加入适量的流动相进行充分溶解并稀释，直至刻度，随后摇晃均匀，制定成浓度为400ug/ml的对照样品溶液以备用。分别精密吸取0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml的上述400ug/ml备用对照样品溶液并放入容量为100ml的棕色容量瓶中，随后添加适量的流动相进行稀释直至刻度线，摇晃均匀，随后进行进样测定。设横坐标（X）为对照样品溶液的进样溶度，纵坐标（Y）为峰面积积分值，进行相关曲线的绘制，回归方程为：Y=2513X+26.4821，相关系数r为0.999。相关结果分析表明：阿魏酸的进样浓度在2.1ug/ml-12.3ug/ml之间，且发现阿魏酸峰面积和进样溶度之间呈现正面的线性关系。
2.7 精密度检测试验。取一定量的上述定制好的测定样品溶液和对照样品溶液（浓度为6.0ug/ml），分别精密吸取上述两种样品溶液各5ul，对上述取样溶液分别进行6次重复进样，并记录色谱图的相关数据，测定和记录阿魏酸的面积，其中RSD为0.53%，这说明仪器精密性能良好。
2.8 稳定性检测试验。精密吸取5ul的检测样品溶液，放置0h、4h、8h、12h、16h、24h后分别进行一次测定，相关峰面积RSD的结果为0.72%，这说明24h内检测样品溶液具有一定的稳定性。
2.9 重现性检测实验。取合适量度的检测药品溶液，对同样批次的取样溶液实行平行检测，检测次数为6次，并根据相关算法来计算溶液中阿魏酸的含定量。相关结果显示：6次平行检测所计算出平均阿魏酸含量和RSD分别为42.59ug/ml和1.01%。
2.10 加样回收率测定试验。精密量取2ml上述已知阿魏酸含量的检测样品溶液（42.59ug/ml），一共量取6份，向每份量取样品中都精密添加2ml的阿魏酸对照样品溶液，根据上述测定样品溶液的制定方法，制成相关的检测对照样品溶液，随后进行相关测定。根据上述试验测定得出的结果和投料量来计算相关的回收率。结果测得的平均回收率和RSD为98.39%和0.85%。
综上，对上述四种指标进行对比总结，详细结果见下表1。
3 讨论
相关试验表明，用70%甲醇、纯甲醇、纯水等试剂分别稀释检测样品溶液，最后三种稀释液进行相关测定结果表明测定阿魏酸面积最大为70%甲醇稀释样品后的溶液，不会受到杂质峰的干扰，所以常常选用70%的甲醇溶液进行相关稀释[1]。
阿魏酸属于一种弱酸化合物，较易分离，因此在流动相中添加少量的弱酸物质可以对相关峰形进行改善，因此常常加入浓度为1%冰醋酸-甲醇溶液（70∶30）来进行相关调整，改善溶液测定中阿魏酸的峰形[2，3]。另外，需要注意的是阿魏酸的光稳定性和热稳定性较差，因此保存方式要得当[1-3]。
本文相关检测研究表明，使用高效液相色谱测定法来检测泰魄颗粒中组成成分阿魏酸的含量，检测方法简单，重现性、精密度、稳定性好，能用于泰魄颗粒的含量检测中。
参考文献
[1] 涂传发，王丽君.阿魏酸哌嗪与贝那普利联用对早期糖尿病肾病患者尿白蛋白排泄率的影响[J].药学实践杂志，2013（01）：49-50
[2] 王宏天，马继伟.内皮素拮抗剂阿魏酸钠联合奥美沙坦治疗早期糖尿病肾病的研究[J].中国中西医结合肾病杂志，2012（11）：981-983
[3] 李学敏.新型多功能二聚体他克林-6-阿魏酸在体外和体内均能抑制淀粉样β肽诱导的阿尔茨海默病相关病变[J].中国病理生理杂志，2012（11）：1942-1942