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从器官移植受者PBMC中分离鉴定HHV-6
【机 构】
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410078 长沙，湖南医科大学微生物免疫学教研室,410078 长沙，湖南医科大学微生物免疫学教研室,410078 长沙，湖南医科大学微生物免疫学教研室
【出 处】
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中华微生物学和免疫学杂志
【发表日期】
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1996年16期
其他文献
本文报道建立肺炎链球菌的PCR定性及定量诊断方法。并用其它几种呼吸道感染常见菌作对照，检测下限为20fg，相当于9个细菌基因组DNA。对30例临床痰标本检测出7例阳性，而普通痰培养无一例阳性。PCR扩增产物的定量测定结果显示，直接定量法简单快速，但在起始模板浓度低时，扩增产物量与模板浓度的线性关系不明显。在竞争定量法中，得出y=-0.54+0.165x函数关系式，此方法较为精确，但繁杂费时。
本研究中，用PCR方法扩增了受体相关蛋白基因第633～957碱基cDNA片段。将编码成熟分子量为44×103受体相关蛋白和羧基端108氨基酸多肽的cDNA克隆到表达载体pGEX-4T-1内，限制性图谱分析测定了插入子的方向并用DNA序列分析加以证实。带有质粒pGEX-R93（包含完全RAP cDNA 957碱基）的重组菌过度表达了分子量为65×103融合蛋白，其含量占总蛋白的39.4%。带有质粒p
本文报道建立了一种基于PCR-RFLP技术的HLA-DPB1分型方法。经计算机分析而选出10个限制性内切酶，在31个DPB1等位基因组成的496个DPB1基因型中，可唯一性分辨484个。用于确定DPB1基因型的33个多态性酶切片段有29个在8种纯合／杂合子分型细胞DNA的DPB1分型中得到验证。经研究来自十个家系23人的DPB1等位基因分布，证实在等位基因和杂合性多态片段的分布上均符合孟德尔分离律
在国内首次借助PCR/SSP技术对52例湖北汉族人SLE患者进行了HLA-DRB1基因型别分析。结果发现，实验组HLA-DRB1 * 0301基因频率为24%，表型频率为44.2%，RR=4.76，X2=21.2，P<0.01；其它等位基因频率在实验组与对照组间差异无显著性。该结果提示HLA-DRB1 * 0301基因与SLE有关联。
在PCR/SSO分型的基础上，用一对PCR引物扩增DPB1基因后作SSCP分析，发现该方法能够确定那些用PCR/SSO方法只检出一个等位基因的样本为纯合基因型或是含一个空白基因的杂合子，9个用PCR/SSO方法只检出一个DPB1等位基因的湖南汉族人样本中，用PCR-SSCP方法发现1个样本表现为杂合子。用银染的方法使得SSCP更快速、可靠和没有同位素污染，并为探测新的HLA等位基因提供了可能性。也
本文作者首次应用地高辛标记的大肠杆菌16+23S rRNA基因探针分析中国莱姆病螺旋体rRNA基因限制性图谱。45株中国菌株和6株国外菌株（美国B31，297；法国20047；瑞士VS461；德国LW2和俄罗斯菌株IP2l）用于实验，选用EcoR V和Hind Ⅲ两种限制性内切酶。实验结果表明，中国菌株遗传差异性较大，分属三个基因种，即Genospecies Ⅰ（B. burgdorferi Se