鼠重组磷脂酶D2腺病毒的构建及功能的初步研究

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhumuray
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将磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D2基因及其功能缺陷点突变基因(K758R)从真核表达载体pCGN中克隆至带有绿色荧光标记蛋白的穿梭质粒pAdTrack-CMV中;再与腺病毒骨架载体一起在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,成功构建磷脂酶D2重组腺病毒。该病毒颗粒感染人胚肾293细胞,高效表达磷脂酶D2及其功能缺陷蛋白。这种表达对M3乙酰胆碱受体介导的细胞内磷脂酶D激活无影响。但磷脂酶D2功能缺陷蛋白对蛋白激酶C介导的胞内磷脂酶D激活有显著抑制作用;相反,磷脂酶D2蛋白有显著增强作用。结果表明,磷脂酶D2基因的同
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