【摘 要】
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目的 本研究通过体外长期培养皮肤成纤维细胞,试图建立此种细胞的长期培养体系,探讨其向肝细胞分化的潜能.方法 从人胎上臂取皮肤组织,分离培养成纤维细胞.采用免疫细胞化学法及流式细胞术检测细胞的CD34、CD90、CD105等细胞表型；染色体分析及软琼脂克隆形成实验鉴定细胞的生物学特性.利用肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子4(FGF4)、抑瘤素(OSM)等细胞因子对第3～30代细胞进行肝细
【机 构】
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300170天津市第三中心医院，天津市人工细胞重点实验室，天津市再生医学与疾病生物治疗工程研究中心,300170天津市第三中心医院，天津市人工细胞重点实验室，天津市再生医学与疾病生物治疗工程研究中心,
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目的 本研究通过体外长期培养皮肤成纤维细胞,试图建立此种细胞的长期培养体系,探讨其向肝细胞分化的潜能.方法 从人胎上臂取皮肤组织,分离培养成纤维细胞.采用免疫细胞化学法及流式细胞术检测细胞的CD34、CD90、CD105等细胞表型；染色体分析及软琼脂克隆形成实验鉴定细胞的生物学特性.利用肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子4(FGF4)、抑瘤素(OSM)等细胞因子对第3～30代细胞进行肝细胞诱导分化,采用免疫细胞化学方法对诱导和未诱导的细胞进行白蛋白ALB、细胞角蛋白CK18、CK19等免疫学检测,PAS法糖原染色,RT-PCR法检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)mRNA表达.结果 皮肤成纤维细胞表达CD29、CD49f、HLA-Ⅰ、CD105等间充质细胞标志,几乎不表达CD90.在肝细胞诱导条件培养基中培养,成纤维细胞转化为类肝细胞的比例约为5％.此种细胞可在体外长期稳定培养,传50余代,保持正常核型,无致瘤性.结论皮肤成纤维细胞具有间充质干细胞的特性,体外能够诱导分化为类肝细胞。
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